王進(jìn)　張倩　唐好知　楊旭　王花欣

摘要 目的：探討虎潛丸對去卵巢骨質(zhì)疏松癥大鼠骨組織的保護(hù)作用，以及通過調(diào)控堿性磷酸酶（ALP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和血清骨保護(hù)素（OPG）的表達(dá)而防治骨質(zhì)疏松癥的機制研究。方法：采用卵巢切除法復(fù)制絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥大鼠模型，隨機分為模型組、虎潛丸組、雌二醇組，同時設(shè)置假手術(shù)組作為對照，各組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃。灌胃12周后取血處死，稱量各組大鼠的體質(zhì)量、子宮重量;取大鼠左側(cè)股骨、脛骨進(jìn)行骨密度檢測;全自動生化分析儀檢測各組大鼠血清中血糖、血脂、鈣磷的變化;ELISA檢測各組大鼠血清中IL-6、ALP、OPG的水平。結(jié)果：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠骨密度顯著下降（P<0.05），骨微結(jié)構(gòu)破壞明顯;與模型組比較，虎潛丸組大鼠骨密度增加，骨小梁的完整性升高，骨微結(jié)構(gòu)得到改善，體質(zhì)量增長明顯下降，血脂血糖水平降低，IL-6、ALP含量均有所降低，OPG含量升高，血鈣含量有明顯上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：虎潛丸能夠提高去卵巢大鼠的骨量，防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，其作用機制可能與降低ALP、IL-6，提高OPG含量有關(guān)。

關(guān)鍵詞 虎潛丸;絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥;骨密度;去卵巢大鼠;雌激素;白細(xì)胞介素-6;中醫(yī)藥治療

Study on the Protective Effect and Mechanism of Huqian Pill on Bone Tissue of Ovariectomized Osteoporosis Rats

WANG Jin1，ZHANG Qian 1，2，TANG Haozhi1，YANG Xu1，WANG Huaxin1，2

（1 Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji′nan 250355，China; 2 Shandong Co-Innovation Center of Classic Traditional Chinese Medicine Formula，Ji′nan 250355，China）

Abstract Objective：To explore the protective effect of Huqian Pill on bone tissue of ovariectomized osteoporosis rats and the mechanism of prevention and treatment of osteoporosis by regulating the expression of ALP，IL-6 and OPG.Methods：The model of postmenopausal osteoporosis rats was made by ovariectomy.The rats were randomly divided into a model group，a Huqian Pills group and an estradiol group.At the same time，a sham operation group was set up as a control，and each group was given corresponding drugs by gavage.After 12 weeks of gavage，blood was taken and executed，the body mass and uterus mass of each group were weighed; the bone density of left femur and tibia of each group were measured; the changes of blood glucose，blood lipid and calcium phosphorus in serum of each group were detected by automatic biochemical analyzer; the contents of IL-6，ALP and OPG in rat serum of each group were detected by ELISA.Results：Compared with sham group，model group BMD decreased significantly（P<0.05）; there was significant destruction of bone microarchitecture; compared with model group，Huqian Pill increased bone density of rats，increases the integrity of trabecular bone，bone microarchitecture was improved，the amount of weight gain decreased，blood lipid and glucose levels decreased，IL-6，and ALP content were decreased，levels of OPG elevated，calcium content significantly increased.The differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Haqian Pills can improve bone mass in ovariectomized rats，prevent postmenopausal osteoporosis，and its mechanism may reduce ALP，IL-6，and improve OPG related content.

Keywords Huqian Pills; Postmenopausal osteoporosis; Bone density; Ovariectomized rats; Estrogen; IL-6; Traditional Chinese medicine treatment

中圖分類號：R285.5;R274.9文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.12.010

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（Postmenopausal Osteoporosis，PMOP）以骨量減少，骨微結(jié)構(gòu)被破壞，骨密度降低，骨脆性增加為特征[1]。此病通常發(fā)病隱蔽，臨床癥狀出現(xiàn)較晚，以突發(fā)性骨折為主，嚴(yán)重影響著中老年婦女的健康[2]。對于女性來說，絕經(jīng)后的生命時長約占其一生的三分之一，且隨著人均壽命的延長，這一時段還會不斷延長，因此提高中老年婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者生命質(zhì)量尤為重要。據(jù)預(yù)測，到21世紀(jì)中葉，中國骨質(zhì)疏松性骨折人數(shù)將達(dá)到599萬，相應(yīng)的醫(yī)療支出高達(dá)1 745億元[3]，且目前醫(yī)學(xué)上沒有針對骨質(zhì)疏松癥行之有效的治愈方法，因此骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防以及早期的干預(yù)治療尤為關(guān)鍵。

現(xiàn)階段西醫(yī)治療骨質(zhì)疏松癥的藥物有骨基礎(chǔ)藥物（如鈣劑、維生素D和其衍生物等）、抗骨吸收藥物（如雌激素、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雙膦酸鹽類和降鈣素等）、促進(jìn)骨形成藥物（如甲狀旁腺激素、胰島素生長因子-1和骨硬化素抗體等）以及雙重藥理作用藥物（如雷尼酸鍶）等，但均有不同程度的不良反應(yīng)[4]。而中藥以及中成藥治療骨質(zhì)疏松癥以其療效明顯、不良反應(yīng)少的優(yōu)勢，受到了越來越多的關(guān)注[5]。虎潛丸出自《丹溪心法》，原方由黃柏、龜甲、知母、熟地黃、陳皮、白芍、鎖陽、虎骨、干姜組成，為滋陰降火，益精填髓，強筋健骨的名方，主治肝腎虧虛，精血不足，筋骨痿弱?；撏钁?yīng)用臨床治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥效果顯著，但具體機制未明確[6-7]。

本實驗采用卵巢切除法（OVX），構(gòu)建大鼠骨質(zhì)疏松癥模型，然后分組觀察虎潛丸的療效。通過觀察大鼠體質(zhì)量、子宮形態(tài)、血糖血脂、鈣磷、骨密度及骨微結(jié)構(gòu)的情況，并檢測大鼠血清堿性磷酸酶（ALP）、IL-6、血清骨保護(hù)素（OPG）的水平，探討虎潛丸對骨質(zhì)疏松癥的療效機制，為中藥復(fù)方治療骨質(zhì)疏松癥的研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 SPF級SD大鼠32只，雌性，9月齡，體質(zhì)量250～300 g，購自北京維通利華實驗動物中心有限公司，許可證號：SCXK（京）2016-0006。于SPF級動物房進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件：溫度20～26 ℃，相對濕度40%～70%，12 h明暗循環(huán)，自由飲水。

1.1.2 藥物 虎潛丸由酒炒黃柏、酒炙龜甲、酒炒知母、熟地黃、陳皮、白芍、鎖陽、炙狗骨（替代虎骨）、干姜9味中藥組成（藥材購于山東中醫(yī)藥大學(xué)新中魯醫(yī)院，經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)李峰教授鑒定為合格產(chǎn)品）。

1.1.3 試劑與儀器 戊酸雌二醇片（拜耳醫(yī)藥保健有限公司廣州分公司，批號：621B2）;0.9%氯化鈉注射液（山東科倫藥業(yè)有限公司，批號：B180301002）;異氟烷（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，批號：217180501）;4%多聚甲醛固定液（Biosharp，批號：BL539A）;ALP試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號：A059-2）;IL-6、OPG ELISA試劑盒（武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司，批號：E-EL-R0015c;E-EL-R0050c）。小動物氣體麻醉機（Matrx公司，美國，型號：VIP3000）;高速冷凍離心機（中國賽默飛世爾科技有限公司，型號：Multifuge X1R）;全自動生化分析儀（桂林優(yōu)利特電子集團(tuán)有限公司，型號：URIT-8036）;酶標(biāo)儀（伯騰儀器有限公司，美國，型號：VT05404-0998）;離活體一體化Micro-CT設(shè)備—NEMO（平生醫(yī)療科技有限公司，型號：Super Nova Micro CT）。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按照隨機數(shù)字表的方法將大鼠分為假手術(shù)組8只和手術(shù)組24只。將手術(shù)組大鼠行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)。具體操作步驟：使用小動物麻醉機對大鼠進(jìn)行麻醉，麻醉成功后，大鼠俯臥位，固定四肢，備皮消毒。觸摸找到肋骨后緣，距離雙側(cè)肋后緣中點下1.5 cm及正中線兩側(cè)1.5 cm處，分別取2個長約1 cm的縱切口。依次切開皮膚、皮下組織、腹膜，暴露腹腔臟器;先找到一側(cè)的Y形子宮，順著子宮向遠(yuǎn)端探查，可找到梅花狀的卵巢。結(jié)扎卵巢下端輸卵管，完整地摘除雙側(cè)卵巢，摘除卵巢塊經(jīng)過切片鏡下鑒定為卵巢。逐層縫合傷口，傷口滴加青霉素注射液以防感染。再進(jìn)行另一側(cè)操作。假手術(shù)組在暴露卵巢后，不予切除，在其附近切除與卵巢體積大小相近的脂肪組織，余操作均與手術(shù)組相同。術(shù)后連續(xù)3 d肌內(nèi)注射青霉素G 20萬單位/只以預(yù)防感染。術(shù)后7 d將手術(shù)組大鼠隨機分為模型組、虎潛丸組與雌二醇組，每組8只。本實驗經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物福利倫理審查委員會審核，符合實驗動物與動物實驗福利、倫理要求（倫理審批號：SDUTCM2018112901）。

1.2.2 給藥方法 造模后1周，根據(jù)人和動物藥物等效劑量換算公式，以成人臨床用藥劑量計算動物用藥劑量[8]。參考元代朱震亨的《丹溪心法》中虎潛丸用量，黃柏（酒炒）18 g、狗骨（酒炙）15 g、龜甲（酒炙）12 g、干姜10 g，鎖陽8 g、知母（酒炒）、熟地黃、陳皮和白芍各6 g，加適量水煎。將中藥飲片水煎2次后，混合濾液并濃縮至90 mg/mL，將戊酸雌二醇片配制成10 μg/mL的混懸液。按照1 mL/100 g的灌胃劑量，分別用虎潛丸水煎液和戊酸雌二醇片混懸液灌胃;假手術(shù)組和模型組大鼠用生理鹽水灌胃;1次/d，連續(xù)灌胃12周。根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整灌胃量。

1.2.3 檢測指標(biāo)與方法

1.2.3.1 取材及實驗指標(biāo)檢測 藥物干預(yù)結(jié)束后進(jìn)行實驗動物取材。各組大鼠禁食不禁水12 h后，用10%水合氯醛麻醉，腹主動脈取血處死，血液離心，分離上清液，并置于-80 ℃冰箱中保存。取出Y形子宮用4%多聚甲醛固定，24 h后脫水石蠟包埋;取大鼠左側(cè)股骨、脛骨，剔除附著在周圍的軟組織和肌肉，固定于4%多聚甲醛中備用。

1.2.3.2 體質(zhì)量及子宮系數(shù) 大鼠造模后1周后連續(xù)給藥3個月，每周稱重并記錄體質(zhì)量。藥物干預(yù)結(jié)束后取材后稱取子宮重量。子宮系數(shù)=子宮重量/體質(zhì)量。

1.2.3.3 骨密度檢測及三維成像 取大鼠股骨，用Micro-CT進(jìn)行掃描，利用自帶軟件進(jìn)行股骨近端骨密度測定。利用BI-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行骨組織形態(tài)學(xué)計量分析，包括骨小梁數(shù)量、骨小梁面積等。

1.2.3.4 血生化檢測 將大鼠麻醉，經(jīng)腹主動脈取血，將全血以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速，13.5 cm的離心半徑，在4 ℃下離心15 min分離血清。生化儀檢測血清中血脂、血糖、鈣、磷的水平。

1.2.3.5 ELISA法檢測血清中堿性磷酸酶（ALP）、白細(xì)胞介素-6（Interleukin 6，IL-6）、人成骨細(xì)胞骨保護(hù)素（Osteoprorotegerin，OPG）的含量 將凍存血清按試劑盒操作步驟檢測ALP、IL-6、OPG的含量。設(shè)置酶標(biāo)儀吸光度A為450 nm，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，A為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算各樣品對應(yīng)的濃度值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料符合正態(tài)分布者用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 虎潛丸對去卵巢大鼠體質(zhì)量和子宮系數(shù)的影響 1）與假手術(shù)組比較，模型組體質(zhì)量增加最多（P<0.01），而虎潛丸組和雌二醇組體質(zhì)量增長比模型組低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.01）。2）與假手術(shù)組比較，模型組子宮系數(shù)明顯減小。差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。3）與模型組比較，虎潛丸組和雌二醇組子宮系數(shù)均有增長趨勢。見表1。

2.2 虎潛丸對于去卵巢大鼠子宮形態(tài)的影響 假手術(shù)組大鼠子宮內(nèi)膜組織輪廓清晰，血管豐富，腺體數(shù)量多。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠子宮宮腔干癟變形且內(nèi)膜厚度明顯變薄，柱狀上皮細(xì)胞萎縮，胞質(zhì)減少，固有層、肌層與漿膜層組織輪廓模糊，血管減少，腺體相對萎縮減少。與模型組比較，虎潛丸組與雌二醇組子宮宮腔相對豐滿，固有層、肌層與漿膜層組織輪廓較為完整，血管較為豐富，宮腔萎縮情況略有改善，腺體數(shù)量較模型組多。見圖1。

2.3 虎潛丸對去卵巢大鼠骨密度及骨微結(jié)構(gòu)的影響 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠的股骨骨密度顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。與模型組比較，虎潛丸組和雌二醇組骨密度均明顯上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.05）。見表2。

從股骨三維成像圖可見，假手術(shù)組大鼠骨小梁大小適中，骨小梁排列整齊且連接度好;模型組大鼠股骨骨小梁變短變小，稀疏，斷裂，呈骨質(zhì)疏松狀。與假手術(shù)組比較，模型組骨小梁數(shù)目、厚度以及小梁面積均明顯降低;與模型組比較，虎潛丸組和雌二醇組骨小梁數(shù)目、厚度以及小梁面積均明顯上升，骨小梁結(jié)構(gòu)完整。見圖2。

2.4 虎潛丸對去卵巢大鼠血脂和血糖的影響 與假手術(shù)組比較，模型組的血糖、三酰甘油（Triglyceride，TG）、總膽固醇（Total Cholesterol，TC）顯著上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.01）;與模型組比較，虎潛丸組和雌二醇組大鼠的血糖、TG和TC均明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表3。

2.5 虎潛丸對去卵巢大鼠血清中鈣、磷的影響 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清中的鈣、磷水平明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;與模型組比較，虎潛丸組和雌二醇組鈣水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

2.6 虎潛丸對去卵巢大鼠血清中ALP、OPG及IL-6的影響 與假手術(shù)組比較，模型組的ALP及IL-6水平明顯升高，而OPG水平則顯著下降（P<0.01）;比較于模型組，虎潛丸組大鼠ALP及IL-6水平明顯下降，而OPG水平則明顯上升（P<0.05）。見表5。

3 討論

隨著我國老齡化程度不斷提高，骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率明顯上升。其中絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥是最常見的骨質(zhì)疏松癥類型。女性絕經(jīng)后卵巢功能衰退，雌激素分泌不足，導(dǎo)致骨代謝紊亂，骨吸收大于骨重建，進(jìn)而發(fā)展為骨質(zhì)疏松癥[9]。中醫(yī)學(xué)將PMOP列為“骨痿、骨枯、骨痹”的范疇，《素問·痿論》就有記載：“腎氣熱，則腰脊不舉，骨枯而髓減，發(fā)為骨痿。”其病位在骨，與腎肝關(guān)系密切，其主要病機是腎精虧虛，腎失滋養(yǎng)。中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為“肝主筋，主藏血，主疏泄”，在體合筋，連接骨節(jié)，與肢體運動緊密相連，氣血衰少，血不養(yǎng)筋，則易發(fā)骨質(zhì)疏松[10]。故治療以益精填髓，滋養(yǎng)肝腎為主?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥在防治PMOP方面具有很大的優(yōu)勢，能夠提高患者骨密度，減少骨折發(fā)生率，并且療效顯著，不良反應(yīng)小[5]?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明，龜甲可能通過降低骨轉(zhuǎn)換有效改善激素性骨質(zhì)疏松[11]。鎖陽中的有效成分具有清除自由基、抗氧化、增強免疫功能等作用，能夠作用于股骨頭壞死中的成骨細(xì)胞[12]。

虎潛丸出自《丹溪心法》，是經(jīng)典的補腎名方。有滋陰降火，益精填髓，強筋健骨的功效，主治肝腎虧虛，精血不足，筋骨痿弱。方中黃柏、龜甲、知母、熟地黃養(yǎng)血滋陰，益精補腎;陳皮、白芍、鎖陽、虎骨（現(xiàn)用狗骨代替）、干姜益精填髓，理氣和中，使補而不滯。諸藥合用，充養(yǎng)精血，益精填髓，強筋健骨?，F(xiàn)代藥理研究證明，虎潛丸具有促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）增殖的作用，并且可以促進(jìn)其向成骨細(xì)胞分化，對于骨質(zhì)疏松癥有較好的療效[13]。

Kim等[14]研究表明，肥胖對骨質(zhì)疏松癥具有保護(hù)作用，能夠增加骨骼負(fù)荷，使成骨細(xì)胞功能代償性增強。Saunier等[15]的研究表明，長期雌激素缺乏會增加肥胖風(fēng)險。王艷等[16]研究發(fā)現(xiàn)，雌激素通過降低脂蛋白脂肪酶，誘導(dǎo)激素敏感性脂肪酶的活性以及通過增加腎上腺素的脂解作用來抑制脂肪形成，促進(jìn)脂肪的分解。Kalinich等[17]研究表明雌激素可以直接通過影響下丘腦來影響攝食。絕經(jīng)后的女性雌激素分泌不足也多有肥胖的表現(xiàn)，主要表現(xiàn)為體質(zhì)量的上升以及血清TG、TC的升高以及血糖的異常。本研究發(fā)現(xiàn)，大鼠摘除卵巢后，模型組的體質(zhì)量較假手術(shù)組明顯升高，血清中血糖、TG、TC明顯上升，經(jīng)過雌二醇和虎潛丸治療的大鼠體質(zhì)量增長量以及血清中血糖、TG、TC含量明顯下降。研究結(jié)果顯示，大鼠切除卵巢后，雌激素分泌減少，進(jìn)而加劇了肥胖，體質(zhì)量上升。這與Saunier等[15]的研究相吻合。

血清鈣、磷含量的變化是反映全身骨質(zhì)代謝情況的重要指標(biāo)。血清中的鈣、磷含量可以間接反映骨骼中的礦物質(zhì)變化情況[18]。實驗發(fā)現(xiàn)模型組血鈣含量、血磷含量較假手術(shù)組均有降低，經(jīng)過虎潛丸和雌激素治療后，血鈣含量有明顯上升。原因可能是破骨細(xì)胞分化活躍，鈣、磷離子流失加重，導(dǎo)致了血鈣、血磷含量降低。

骨免疫在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機制中起著關(guān)鍵作用，在活化的T淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，其中就包括IL-6，IL-6起著破骨細(xì)胞增殖和分化的雙重角色[19]。IL-6也是破骨細(xì)胞活性的主要介質(zhì)，能夠激活骨吸收[20]，這是由于IL-6可以通過多種作用途徑，增加破骨細(xì)胞形成，并提高其活性，延長破骨細(xì)胞的壽命，抑制破骨細(xì)胞的凋亡，最終促進(jìn)骨吸收，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生[21]。人成骨細(xì)胞骨保護(hù)素（Osteoprorotegerin，OPG）屬于腫瘤壞死因子受體家族中的一員，OPG的主要功能是抑制破骨細(xì)胞的形成、分化，促進(jìn)成熟破骨細(xì)胞的凋亡[22]。Bucay等[23]的實驗顯示，OPG基因敲除小鼠破骨細(xì)胞數(shù)量明顯增多，并伴有嚴(yán)重的骨質(zhì)疏松。ALP在人體細(xì)胞膜分布廣泛。李海等[24]的研究顯示，在骨質(zhì)疏松發(fā)生時，破骨細(xì)胞功能增強，骨質(zhì)流失增多，代償性引起成骨細(xì)胞的功能增強，機體分泌ALP增多。Zhao等[25]的研究顯示，ALP在腎臟中近曲小管的細(xì)胞表面分布廣泛，當(dāng)骨質(zhì)疏松發(fā)生時，機體尤其是腎臟與骨的ALP流失入血，血液中的ALP含量因此升高。在本實驗中，模型組相較于假手術(shù)組IL-6、ALP含量升高，OPG含量下降。經(jīng)過虎潛丸和雌激素治療后，IL-6、ALP含量均有所降低，OPG含量升高，虎潛丸可能影響了ALP、IL-6、OPG的表達(dá)。

通過切除大鼠雙側(cè)卵巢來復(fù)制絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥模型是目前公認(rèn)的造模方法[26]，故本研究以此建立絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥模型。骨密度檢測結(jié)果顯示，模型組大鼠骨密度顯著低于假手術(shù)組，很好地模擬了絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥[27]。同時研究結(jié)果表明，虎潛丸可能通過影響ALP、IL-6、OPG的表達(dá)，促進(jìn)成骨細(xì)胞的發(fā)育以及抑制破骨細(xì)胞的分化成熟，可以有效地減緩因雌激素缺乏導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松癥。因此，臨床上使用虎潛丸治療絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥是一種安全有效的方法，具有良好的臨床推廣價值。

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（2020-07-08收稿 責(zé)任編輯：蒼寧）

基金項目：國家自然科學(xué)基金委員會青年科學(xué)基金項目（82004087）;山東省中醫(yī)藥科技發(fā)展計劃項目（2017-004）;山東省高等學(xué)?？萍加媱濏椖浚↗18KA271）;山東省自然科學(xué)基金重大基礎(chǔ)研究項目（ZR2019ZD23）;國家級大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃項目（201910441010）;山東中醫(yī)藥大學(xué)青年創(chuàng)新團(tuán)隊項目

作者簡介：王進(jìn)（1997.11—），男，本科生在讀，研究方向：骨質(zhì)疏松癥研究，E-mail：wangjinsrt@qq.com

通信作者：王花欣（1984.02—），女，博士，副教授，研究方向：骨病及分子機制研究，E-mail：whx215@163.com