余萍　趙寶娥　李欠

摘要 目的：比較不同提取工藝的黃芪多糖提取率。方法：選用超聲波輔助提取法對(duì)黃芪多糖進(jìn)行提取，比較正交實(shí)驗(yàn)最優(yōu)提取工藝和響應(yīng)面試驗(yàn)最優(yōu)提取工藝的提取率。結(jié)果：經(jīng)由響應(yīng)面優(yōu)化得出：最優(yōu)提取時(shí)間22 min，最優(yōu)提取溫度50 ℃，最優(yōu)料液比16∶1（mL/g），理論提取率為9.93%;經(jīng)過(guò)正交設(shè)計(jì)優(yōu)化得出：最優(yōu)提取時(shí)間20 min，最優(yōu)提取溫度40 ℃，最優(yōu)料液比15∶1（mL/g），理論提取率為9.56%。結(jié)論：經(jīng)二種優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證比較，研究結(jié)果表明響應(yīng)面法優(yōu)化結(jié)果更為準(zhǔn)確、合理，更適宜推廣。

關(guān)鍵詞 黃芪多糖;正交優(yōu)化;響應(yīng)面優(yōu)化;工藝比較;提取溫度;提取時(shí)間;液料比;提取率

Comparison of Different Extraction Optimization Processes of Astragalus Polysaccharides

YU Ping，ZHAO Bao′e，LI Qian

（Gansu Provincial Key Laboratory of Arid Land Crop Science，Gansu Provincial Key Laboratory of Technical Innovation for Standardized Production of Chinese Medicinal Materials，Materials College of Agriculture，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China）

Abstract Objective：To compare the extraction rate of Astragalus polysaccharides under different extraction technologies.Methods：Astragalus polysaccharides were extracted by ultrasonic-assisted extraction method，and the extraction rate of the optimal extraction process of the orthogonal test and the optimal extraction process of the response surface test were compared.Results：Through response surface optimization，the optimal extraction time was 22 min，the optimal extraction temperature was 50 ℃，the optimal material-to-liquid ratio was 16∶1（mL/g），and the theoretical extraction rate was 9.93%; After orthogonal design optimization，the optimal extraction time was 20 min，the optimal extraction temperature was 40 ℃，the optimal material-to-liquid ratio was 15∶1（mL/g），and the theoretical extraction rate was 9.56%.Conclusion：After verification and comparison of 2 optimization results，the research results show that the response surface method optimization results are more accurate，reasonable and more suitable for promotion.

Keywords Astragalus polysaccharide; Orthogonal optimization; Response surface optimization; Process comparison; Extraction temperature; Extraction time; Liquid-to-material ratio; Extraction rate

中圖分類(lèi)號(hào)：R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.12.003

黃芪是中藥方劑中最常用補(bǔ)益藥之一，古代曾書(shū)寫(xiě)為“黃耆”，始見(jiàn)于《五十二病方》[1]，清代始，將“耆”字簡(jiǎn)寫(xiě)成“芪”字，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中列為上品[2]。

黃芪是甘肅的道地藥材，同時(shí)也是十大隴藥之一，主要分布在甘肅、內(nèi)蒙古、山西、東北等地。黃芪在防病治病實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中入藥部位一般取自于豆科植物膜莢黃芪和蒙古黃芪干燥根，黃芪主要藥效成分為黃芪多糖類(lèi)，黃芪皂苷類(lèi)，黃芪黃酮類(lèi)。它具有補(bǔ)氣固表，利尿脫毒，斂瘡生肌之效[3]。近年來(lái)在防病治病上的需求量一直在增加[4]。黃芪多糖對(duì)人體具有免疫調(diào)節(jié)的功效，一般用于治療免疫調(diào)節(jié)障礙等癥，同時(shí)具有抗病毒、抗衰老、抗輻射及抗氧化等功效，應(yīng)用前景十分廣闊，因此具有開(kāi)發(fā)為新的中藥標(biāo)準(zhǔn)提取物的潛在價(jià)值，但以黃芪多糖含量為指標(biāo)成分的研究報(bào)道較少[5-7]。本實(shí)驗(yàn)采用超聲法輔助提取法，運(yùn)用苯酚硫酸法對(duì)產(chǎn)自隴西黃芪進(jìn)行多糖含量進(jìn)行測(cè)定，把多糖作為正交優(yōu)化和響應(yīng)面優(yōu)化的目標(biāo)，為黃芪多糖在后續(xù)生產(chǎn)實(shí)踐中的合理開(kāi)發(fā)利用提供理論參考，同時(shí)也為黃芪多糖作為目標(biāo)提取物的提取制備工藝提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 植物材料黃芪（購(gòu)自蘭州黃河藥材市場(chǎng)，產(chǎn)自甘肅隴西）經(jīng)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院中草藥教研室陳垣教授鑒定為中藥黃芪;D-無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、苯酚、濃硫酸均為分析純。

HH-S2數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇正基儀器有限公司）;離心機(jī)（湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司）;電子天平（慈溪市天東衡器廠，型號(hào)：HX203T）;紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（島津企業(yè)（中國(guó)）有限公司）;超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 多糖提取方法 黃芪飲片經(jīng)干燥后粉碎，過(guò)40目篩，取10 g黃芪粉末并按設(shè)計(jì)液料比加純水，按設(shè)計(jì)的相應(yīng)提取溫度和提取時(shí)間進(jìn)行超聲提取，經(jīng)紗布或脫脂棉濾過(guò)后濃縮至20 mL，加入3倍體積無(wú)水乙醇靜置數(shù)小時(shí)，置冰箱中過(guò)夜沉淀，然后于離心機(jī)離心最后干燥，得到粗多糖[8]。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 把D-無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品粉末在105 ℃下干燥至恒重，并置于分析天平上進(jìn)行精密稱定，最后于100 mL容量瓶中定容至100 mL，最終得到濃度為100 μg/mL的D-無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，作為對(duì)照品溶液，然后放置于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。用移液管移取?biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL濃度為100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于不同的試管之中，加蒸餾水至2.0 mL。再在試管中分別加入5%的苯酚溶液1.0 mL，然后迅速在試管中加入濃硫酸5.0 mL，搖勻后置于水浴鍋中在40 ℃下保溫加熱15 min，取出后置于裝有冷水的燒杯中冷卻10 min，然后在490 nm處測(cè)定吸光度值并記錄。濃度作為橫坐標(biāo)，吸光度值作為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[9]，在0.010 0～0.100 0 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，求得出回歸方程為：Y=0.0128X+0.02，R2=0.996。見(jiàn)表1。

1.2.3 精密度考察 精確吸取D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品溶液0.4 mL置試管中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線操作步驟重復(fù)測(cè)定5次，測(cè)得RSD%=1.73%。見(jiàn)表2。

1.2.4 供試品溶液制備 精確稱取所得粗多糖約50 mg，加水溶解并定容至50 mL，搖勻后量取1 mL，加水稀釋定容至250 mL，即為供試品溶液。采取苯酚-硫酸法對(duì)黃芪多糖進(jìn)行含量測(cè)定，首先精密量取樣品溶液0.5 mL移入10 mL容量瓶中加蒸餾水定容至10 mL。然后再精密量取1 mL置于試管中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的方法（1.3.2）操作，測(cè)得吸光度。用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)490 nm處測(cè)定吸光度，同時(shí)采用蒸餾水做空白對(duì)照，進(jìn)而計(jì)算出粗多糖濃度。

2.5 多糖含量測(cè)定計(jì)算 R（%）=[（C×V₁×V₂×N）/（V₃×M×10⁶）]×100

R為多糖提取率，C是比色液濃度（μg/mL），V1是比色液體積（mL），V2是定容體積（mL），N表示稀釋倍數(shù)，V3是提供樣品體積（mL），M為試驗(yàn)樣品質(zhì)量（g）[10]。

3 結(jié)果

3.1 最佳單因素條件

3.1.1 提取時(shí)間對(duì)多糖提取率的影響 經(jīng)查閱文獻(xiàn)把黃芪多糖提取料液比設(shè)計(jì)為20∶1（mL/g），把黃芪多糖提取溫度設(shè)計(jì)為40 ℃，把黃芪多糖提取時(shí)間分別設(shè)計(jì)為10、20、30、40、50 min。然后進(jìn)行時(shí)間因素對(duì)黃芪多糖提取率影響試驗(yàn)。見(jiàn)圖1。由此可知，黃芪多糖提取率在10～20 min之間遞增，在20 min時(shí)達(dá)到較大值，之后稍有下降但趨于平緩，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)使多糖結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或破壞而影響多糖提取率使之下降，所以選擇20 min為較佳的黃芪多糖提取時(shí)間[11]。

3.1.2 提取液料比對(duì)多糖提取率的影響 經(jīng)查閱文獻(xiàn)把黃芪多糖提取過(guò)程料液比分別設(shè)計(jì)為10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1（mL/g），把提取溫度設(shè)計(jì)為40 ℃、把時(shí)間設(shè)計(jì)為30 min進(jìn)行液料比因素對(duì)黃芪多糖提取率影響試驗(yàn)。見(jiàn)圖2。由此可知，在5∶1（mL/g）增加到15∶1（mL/g）時(shí)黃芪多糖提取率呈遞增趨勢(shì)，在15∶1（mL/g）時(shí)達(dá)到最大值，之后稍有起伏，但提取率與15∶1（mL/g）相差不大，考慮到提取容器的容量問(wèn)題選擇15∶1（mL/g）為較佳液料比。

3.1.3 提取溫度對(duì)多糖提取率的影響 將查閱文獻(xiàn)把黃芪多糖料液比設(shè)計(jì)為20∶1，把黃芪多糖時(shí)間設(shè)計(jì)為30 min，同時(shí)選取溫度為30、40、50、60、70 ℃進(jìn)行溫度因素對(duì)黃芪多糖提取率影響試驗(yàn)。見(jiàn)圖3。

如圖3所示，多糖提取率在溫度30～50 ℃之間呈明顯遞增，并在50 ℃時(shí)提取率達(dá)到最大，之后逐漸降低，研究結(jié)果表明溫度過(guò)高可使糖分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而降低，因此選擇50 ℃為較優(yōu)提取溫度[12]。綜上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，單因素最優(yōu)條件為提取時(shí)間20 min，提取溫度50 ℃，液料比15∶1（mL/g）。

3.2 響應(yīng)面優(yōu)化多糖提取工藝

3.2.1 Box-Behnken設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果與分析 根據(jù)Box-Behnken原理進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，把多糖提取率作為響應(yīng)值，結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行試驗(yàn)因素的水平范圍的確定，軟件Design-Expert 8.0.6，同時(shí)采用液料比（A）、提取時(shí)間（B）、提取溫度（C）進(jìn)行三因素三水平的響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)。見(jiàn)表3。

根據(jù)表中設(shè)計(jì)的各因素水平進(jìn)行試驗(yàn)，利用所得吸光度計(jì)算各種條件下的多糖提取率。見(jiàn)表4。

從表4分析可知，當(dāng)把黃芪多糖的提取時(shí)間設(shè)定為20 min，提取溫度設(shè)定為50 ℃，液料比設(shè)定為15∶1（mL/g）時(shí)黃芪多糖提取率最高，結(jié)果顯示為10.43%。以黃芪多糖的多糖提取率（R）為響應(yīng)值，采用Design-Expert8.0.6軟件對(duì)黃芪多糖的提取時(shí)間、提取溫度，液料比進(jìn)行回歸分析，所得回歸模擬方程為：

R=9.86+0.52A+0.68B+0.012C-0.46AB-0.49AC+0.42BC-1.88A²-1.23B²-0.29C²-0.56A2B-0.062A2C+0.070AB²。

經(jīng)過(guò)對(duì)模型進(jìn)行方差分析，得出的結(jié)果見(jiàn)表5、表6。

由表5可知，試驗(yàn)整體模型F=18.47，P=0.000 4，說(shuō)明該模型有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），失擬項(xiàng)F=1.42，P=0.361 5，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），結(jié)合表6中多元相關(guān)系數(shù)R2=0.959 6，調(diào)整后R2Adj=0.907 7，說(shuō)明模型擬合良好，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)合理，可用此模型進(jìn)行黃芪多糖的提取工藝的分析和預(yù)測(cè)。從F值可以判斷出各因素對(duì)黃芪多糖提取率影響程度為：A（提取液料比）>B（提取時(shí)間）>C（提取溫度）。

3.2.2 響應(yīng)面及等高線結(jié)果（工藝優(yōu)化最佳條件）依據(jù)所得二次線性回歸方程，采用Design-Expert8.0.6軟件繪制出3個(gè)因素對(duì)糖提取率交互影響的三維響應(yīng)曲面圖和等高線圖。見(jiàn)圖4。

由圖4可知，當(dāng)提取溫度一定時(shí)，在液料比不斷增加的情況下，黃芪多糖提取率呈現(xiàn)出先增大后趨于平緩的趨勢(shì)，相反，當(dāng)液料比保持一定時(shí)，隨著提取溫度的升高，黃芪多糖提取率同樣呈現(xiàn)出先平緩增大后減小的趨勢(shì)，說(shuō)明液料比大于溫度對(duì)多糖提率影響[13]。由圖5可知，當(dāng)提取時(shí)間一定時(shí)，隨著液料比的增大，黃芪多糖提取率逐漸增大后趨于平緩，反之亦然，當(dāng)液料比一定時(shí)，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，黃芪多糖提取率同樣呈現(xiàn)出先增大后減小的趨勢(shì)。由圖6可知，當(dāng)提取溫度一定處于一定的水平時(shí)，黃芪多糖提取率隨著提取時(shí)間的推移呈現(xiàn)先增大后減小，反之亦然，當(dāng)提取時(shí)間處于一定的水平時(shí)，黃芪多糖提取率跟著提取溫度先增大后減小。

由效應(yīng)曲面圖a、c、e可知響應(yīng)面具有最高點(diǎn)，從響應(yīng)面的陡峭程度和等高線的橢圓程度來(lái)看，提取的液料比對(duì)黃芪多糖提取率的影響最顯著，液料比和溫度的交互作用顯示出很明顯的作用，時(shí)間和溫度的交互作用也顯示出相對(duì)明顯的作用，料液比和時(shí)間的交互作用顯示較弱的作用[13]。這與表5、6中的方差分析結(jié)果相一致。

3.2.3 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果及驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)Design-Expert 根據(jù)對(duì)回歸方程進(jìn)行分析得到黃芪多糖提取率最大時(shí)對(duì)應(yīng)的最佳提取條件為：液料比15.7∶1，提取時(shí)間21.25 min，提取溫度49.40 ℃，且黃芪多糖理論提取率為9.93%，結(jié)合實(shí)際情況確定最終優(yōu)化方案為：液料比16∶1，提取時(shí)間22 min，提取溫度50 ℃。在根據(jù)圖表中顯示出的最佳工藝條件，進(jìn)行3次平行驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，進(jìn)而分別得到的多糖提取率分別為9.36%、8.98%、9.52%，平均值為9.29%，與預(yù)測(cè)值的相近。由此可知，該模型的預(yù)測(cè)性良好，此工藝提取黃芪多糖是可靠的，有較大實(shí)用價(jià)值。

3.3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化多糖提取工藝

3.3.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 參考前期單因素實(shí)驗(yàn)考察結(jié)果對(duì)黃芪多糖提取率進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，用多糖提取率作為正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)劣評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別從提取時(shí)間、提取溫度、料液比3個(gè)因素對(duì)多糖提取率進(jìn)行影響程度的考察，使用正交試驗(yàn)法設(shè)計(jì)多糖提取工藝，設(shè)置的因素水平見(jiàn)表7。

3.3.2 試驗(yàn)結(jié)果 L9（33）正交試驗(yàn)直觀分析結(jié)果。見(jiàn)表8。根據(jù)R值[14]大小，可得各因素對(duì)黃芪多糖提取影響程度大小為：C1（提取液料比）>A1（提取時(shí)間）>B1（提取溫度）。

由表9可知，F(xiàn)A1=58.581，F(xiàn)B1=17.928，F(xiàn)C1=73.639，PA1=0.017<0.05，PC1=0.013<0.05，因此可認(rèn)為因素A1（提取時(shí)間）、C1（提取液料比）均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，為主要影響因素，PB1=0.053>0.05，因此因素B1（提取溫度）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，為次要影響因素，即各因素影響程度大小為C1（提取液料比）>A1（提取時(shí)間）>B1（提取溫度）。

R2=0.993（調(diào)整后R2=0.974），以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

3.3.3 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化結(jié)果及驗(yàn)證性試驗(yàn) 由表9可知，各因素對(duì)黃芪多糖提取率影響程度大小為C1（提取液料比）>A1（提取時(shí)間）>B1（提取溫度）;結(jié)合表8中各因素Ki值[14]確定黃芪多糖最佳提取條件為A1，2、B1，1、C1，2，即提取時(shí)間為20 min，提取溫度為40 ℃，提取液料比為15∶1（mL/g）。通過(guò)3組平行試驗(yàn)驗(yàn)證，得到在最優(yōu)提取條件下多糖提取率分別為9.26%，8.46%，8.70%，平均值為8.81%，與正交試驗(yàn)結(jié)果幾近一致，表明此提取條件穩(wěn)定、可靠。

3.4 優(yōu)化工藝結(jié)果比較 由表10可知，SPSS正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化得出的最優(yōu)黃芪多糖提取條件為：提取時(shí)間20 min，料液比15∶1（mL/g），提取溫度40 ℃，黃芪多糖理論預(yù)測(cè)提取率為9.56%，實(shí)際提取率為8.81%，偏差為0.75%。經(jīng)響應(yīng)面優(yōu)化得出黃芪多糖最優(yōu)提取條件為：提取時(shí)間22 min，提取溫度50 ℃，料液比16∶1（mL/g），黃芪多糖理論預(yù)測(cè)提取率為9.93%，實(shí)際實(shí)驗(yàn)提取率為9.29%，偏差為0.64%。就提取率和偏差度而言，二種優(yōu)化結(jié)果均可，具體哪一種更為符合要求需視具體情況和要求而定。

4 討論

4.1 本實(shí)驗(yàn)采用超聲提取法，運(yùn)用苯酚硫酸法對(duì)多糖含量進(jìn)行測(cè)定，作為正交優(yōu)化和響應(yīng)面優(yōu)化的指標(biāo)。通過(guò)對(duì)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化得出的最佳提取工藝和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化得出的最佳提取工藝的比較，可以看出二種方法優(yōu)化的最優(yōu)工藝條件除溫度相差10 ℃外，其他條件幾乎趨于一致，而且在響應(yīng)面優(yōu)化和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化二種優(yōu)化結(jié)果中，溫度對(duì)提取率的影響小于液料比和時(shí)間對(duì)提取率的影響，在不考慮生產(chǎn)能耗等問(wèn)題的情況下，二種優(yōu)化結(jié)果均可作為提取工藝的選擇依據(jù)。

4.2 就二種優(yōu)化方法而言，與響應(yīng)面法優(yōu)化比較，正交法優(yōu)化只能得到觀察組中的最佳組合，無(wú)法考察或預(yù)測(cè)觀察組以外的情況[15]。而響應(yīng)面法建立的二次回歸優(yōu)化模型則能較好預(yù)測(cè)試驗(yàn)設(shè)置水平之外黃芪多糖的提取率，精確度也略優(yōu)于正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法[16]。本實(shí)驗(yàn)中響應(yīng)面法優(yōu)化的工藝條件下得到的多糖提取率也略大于正交試驗(yàn)法得到的多糖提取率，從這些方面來(lái)看，選擇響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果作為最佳工藝生產(chǎn)條件更為合理，更值得推廣。

4.3 多糖是黃芪藥材的重要活性成分之一，具有多種多樣的生物功效和臨床應(yīng)用效果，應(yīng)用前景十分廣闊，具有開(kāi)發(fā)為新的中藥標(biāo)準(zhǔn)提取物的潛在價(jià)值。黃芪多糖提取的方法目前已經(jīng)普遍運(yùn)用的有大孔樹(shù)脂提取法、水提純沉法、堿水提法、堿醇提法、超微粉碎技術(shù)提取等，但都存在耗能高，高級(jí)結(jié)構(gòu)容易發(fā)生改變等缺點(diǎn)[17-18]。雖然超聲法單獨(dú)提取并不常用，但在能耗方面少于其他方法。以黃芪多糖含量為指標(biāo)成分的研究報(bào)道也較少，水提醇沉法作為一種可取的多糖提取方法，得到了工業(yè)化生產(chǎn)廣泛應(yīng)用[19]。隨著工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)水平的發(fā)展和黃芪多糖利用價(jià)值如藥用價(jià)值、食用價(jià)值、美容價(jià)值等的不斷發(fā)展應(yīng)用，超聲輔助提取黃芪多糖也將成為工業(yè)化生產(chǎn)的選擇方向[4]。本實(shí)驗(yàn)采用超聲法提取、二種優(yōu)化設(shè)計(jì)方法比較所得到的最優(yōu)黃芪多糖提取條件，可為其提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)黃芪藥材的質(zhì)量控制也具有重要的意義。

參考文獻(xiàn)

[1]嚴(yán)健民.五十二病方注補(bǔ)譯[M].北京：中國(guó)古籍出版社，2005：139-141.

[2]佚名.神農(nóng)本草經(jīng)[M].尚志鈞，校注.北京：學(xué)苑出版社，2008：111.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典.一部[S].北京：中藥醫(yī)藥科技出版社，2015：25.

[4]張曉霞.隴西縣黃芪產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[5]Shao P，Zhao LH，Zhi-Chen，et al.Regulation on maturation and function of dendritic cells by Astragalus mongholicus polysaccharides[J].Int Immunopharmacol，2006，6（7）：1161-1166.

[6]Yu DH，Bao YM，Wei CL，et al.Studies of chemical constituents and their antioxidant activities from Astragalus mongholicus Bunge[J].Biomed Environ Sci，2005，18（5）：297-301.

[7]呂琴，趙文曉，王世軍，等.黃芪活血功效及現(xiàn)代藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2020，26（9）：215-224.

[8]梁子敬，張景艷，馮海鵬，等.響應(yīng)面優(yōu)化黃芪多糖的提取工藝[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2018，39（21）：72-76.

[9]于曉輝，劉自揚(yáng)，楊勁松，等.薄層色譜法與苯酚硫酸法聯(lián)用控制黃芪多糖粗粉質(zhì)量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（14）：7312-7314.

[10]彭雪嬌，黃林華，王華，等.柑橘加工廢渣糖蜜糖分的分離提取及含量測(cè)定[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2017，43（5）：247-254.

[11]宋慶燕，楊相，張魯，等.響應(yīng)面法優(yōu)化黃芪總多糖超聲提取工藝[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，20（2）：44-47.

[12]楊曉杰，王世佳，李旭業(yè).溫度對(duì)生姜多糖提取率及抗氧化活性的影響[J].中國(guó)調(diào)味品，2018，43（3）：6-8.

[13]姚思揚(yáng)，趙春莉，劉子平，等.響應(yīng)面法優(yōu)化草莓品種紅顏離體繁殖的增殖條件[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（23）：88-91.

[14]張亞環(huán)，陳萍，王小芳.正交試驗(yàn)法優(yōu)選黃芪多糖的水提工藝研究[J].化學(xué)世界，2007（6）：345-347.

[15]繆偉偉，王志雄，石仝雨，等.響應(yīng)曲面法與正交法在二氧化碳超臨界萃取桑葉總黃酮中的比較[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（18）：189-193.

[16]王茜，王啟之，時(shí)維靜，等.響應(yīng)面法與正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化黃蜀葵總黃酮閃提工藝比較[J].安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，29（5）：24-31.

[17]韓真賢，張宇，張?jiān)平埽?黃芪多糖三種提取工藝比較[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2009，32（4）：72-73.

[18]劉衛(wèi)東，王蘭英，任建國(guó)，等.黃芪多糖的化學(xué)組成和提取方法研究進(jìn)展[J].西北藥學(xué)雜志，2010，25（2）：151-153.

[19]姜慧妍，嚴(yán)思敏，吳秋惠，等.多糖的新型制劑研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2020，45（19）：4582-4588.

（2020-07-05收稿 責(zé)任編輯：楊覺(jué)雄）

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31860102）;甘肅省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（18JR3RA185）;甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)盛彤笙科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目（GSAU-STS-2037）;甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)人才引進(jìn)專(zhuān)項(xiàng)（GSAU-RCZX201704）

作者簡(jiǎn)介：余萍（1995.05—），女，碩士研究生在讀，研究方向：中藥分析及質(zhì)量評(píng)價(jià)，E-mail：shinianyue@qq.com

通信作者：李欠（1984.02—），女，博士，副教授，研究方向：中藥分析及質(zhì)量評(píng)價(jià)，E-mail：liqian1984@gsau.edu.cn