楊 陽，劉向前，張弘弛

（1.山西大同大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山西大同 037009；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長沙 410208）

在畜牧業(yè)中，抗生素在過去被廣泛用于促進(jìn)生長、預(yù)防腹瀉、胃腸炎和許多疾病，但由于抗生素的耐藥性及其在畜產(chǎn)品中殘留風(fēng)險(xiǎn)，因此，大部分國家目前已禁止在飼料中添加抗生素。在動(dòng)物飼料中使用乳酸菌、雙歧桿菌和芽孢桿菌等益生菌可維持或改善動(dòng)物生長性能和腸道微生物平衡（李娜和趙敏，2010），因此，益生菌具有替代抗生素的潛能。因?yàn)橐嫔梢哉{(diào)節(jié)腸道菌群，腸道菌群在腸道內(nèi)穩(wěn)定下來，并迅速繁殖成為非常穩(wěn)定的種群，因此，腸道內(nèi)穩(wěn)定的菌群可以幫助動(dòng)物抵抗感染（孫佳麗等，2020）。多項(xiàng)研究表明，乳酸菌菌株具有干擾致病菌黏附、生長，減少細(xì)菌易位和腸道炎癥的能力（龔虹等，2016）。因此，從合適的環(huán)境中分離、鑒定高水平的活性微生物，選擇能在宿主腸道中存活并抑制病原體生長的菌株對(duì)其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用非常重要。蘇雙良等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充有益菌群，如枯草芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌可以以改善腸道環(huán)境。但目前只有少數(shù)研究證明了枯草芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌在家畜和家禽行業(yè)的有益作用。因此，本研究旨在探討日糧添加這兩種益生菌對(duì)斷奶仔豬生長性能、養(yǎng)分消化及后腸菌群的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物分組與日糧設(shè)計(jì)試驗(yàn)將平均體重為（6.25±0.06）kg的630頭25 d斷奶的仔豬隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)35頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，處理1和2組分別飼喂基礎(chǔ)日糧+1×105CFU/g枯草芽孢桿菌和1×105CFU/g乳酸菌，試驗(yàn)分為1～14 d和15～28 d兩個(gè)階段。

1.2 生長性能和養(yǎng)分消化試驗(yàn)開始、14 d和28 d 對(duì)每個(gè)重復(fù)的仔豬進(jìn)行稱重，每周記錄每個(gè)重復(fù)仔豬飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束后用于計(jì)算生長性能指標(biāo)。在試驗(yàn)第25天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇4頭仔豬進(jìn)行代謝試驗(yàn)，采用全收糞法連續(xù)收集3 d糞樣。糞樣混合后，-20℃保存，同時(shí)收集各階段飼料樣品，飼料和糞樣用于分析營養(yǎng)指標(biāo)。

表1 仔豬斷奶后1～28 d日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 腸道菌群分析試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇4頭體重接近的仔豬進(jìn)行屠宰，分離回腸、盲腸和結(jié)腸，用無菌EP管收集腸道內(nèi)容物，-80℃保存。參考Manzanilla等（2004）的方法測定回腸、盲腸和結(jié)腸中總厭氧菌、乳酸菌、梭菌和大腸桿菌數(shù)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件單因素方差分析模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間采用Turkey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加不同益生菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響由表2可知，對(duì)照組與益生菌組對(duì)仔豬斷奶后14 d體重、1～14 d和1～28 d平均日增重和飼料報(bào)酬以及各階段平均日采食量的影響均無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，枯草芽孢桿菌組仔豬斷奶后28 d體重、15～28 d平均日增重和飼料報(bào)酬分別顯著提高5.65%、19.36%和19.05%（P＜0.05）。

表2 益生菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 益生菌對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分消化的影響由表3可知，對(duì)照組與枯草芽孢桿菌組、乳酸菌組對(duì)斷奶仔豬干物質(zhì)、粗脂肪和淀粉表觀消化率及氮攝入量、尿氮、糞氮及氮沉積量的影響均無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，枯草芽孢桿菌組斷奶仔豬能量和粗蛋白表觀消化率分別顯著提高4.29%和3.31%（P＜0.05）。

表3 益生菌對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分消化及氮代謝的影響

2.3 益生菌對(duì)斷奶仔豬后腸菌群的影響由表4可知，日糧處理對(duì)回腸總厭氧菌、乳酸菌、梭菌、大腸桿菌數(shù)量、盲腸總厭氧菌、梭菌數(shù)量及結(jié)腸總厭氧菌和梭菌數(shù)量的影響均無顯著差異（P＞0.05）?？莶菅挎邨U菌和乳酸菌組盲腸乳酸菌數(shù)量較對(duì)照組分別提高15.89%和16.82%（P＜0.05），但盲腸大腸桿菌數(shù)量分別顯著降低15.66%和18.07%（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，枯草芽孢桿菌組仔豬結(jié)腸乳酸菌數(shù)量顯著提高30.24%（P＜0.05），而枯草芽孢桿菌和乳酸菌組結(jié)腸大腸桿菌數(shù)量分別顯著降低26.09%和23.91%（P＜0.05）。

表4 益生菌對(duì)斷奶仔豬后腸菌群的影響

3 討論

日糧添加不同益生菌對(duì)斷奶后前期的體重、日增重和整個(gè)試驗(yàn)期的采食量均無顯著差異，但枯草芽孢桿菌可以提高斷奶后期的體重、平均日增重和飼料報(bào)酬，結(jié)果提示，枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能有促進(jìn)作用，這可能是由于添加了益生菌的仔豬營養(yǎng)物質(zhì)消化率更高，這與代謝試驗(yàn)中能量和粗蛋白表觀消化率提高一致。仔豬斷奶后受到來自營養(yǎng)、環(huán)境和心理上的應(yīng)激，通常會(huì)導(dǎo)致胃腸道功能紊亂，加之此時(shí)消化道未發(fā)育完全，最終導(dǎo)致生長性能降低。Jensen等（1998）研究發(fā)現(xiàn)，斷奶后2～3周腸道菌群穩(wěn)定，腸道功能恢復(fù)正常，因此在斷奶前添加枯草芽孢桿菌可以促進(jìn)斷奶后1～2周的腸道發(fā)育，進(jìn)而使生長性能的改善在后期表現(xiàn)出來。

與生長性能結(jié)果一致的是能量和粗蛋白表觀消化率在枯草芽孢桿菌組中表現(xiàn)最好，表明枯草芽孢桿菌較乳酸菌對(duì)斷奶仔豬更有效。Shon等（2005）報(bào)道，添加益生菌能顯著改善生長豬粗蛋白消化率，而Giang等（2010）發(fā)現(xiàn)，嗜酸乳桿菌可以改善粗蛋白質(zhì)、粗纖維和有機(jī)物的表觀消化率。本研究中大部分養(yǎng)分表觀消化率無顯著差異，作者推測可能與益生菌的種類、分離溯源及試驗(yàn)動(dòng)物營養(yǎng)水平和階段不同有關(guān)。此外，Rossland等（2005）報(bào)道了枯草芽孢桿菌存活后可釋放多肽，有助于弱蛋白水解益生菌的生長。

后腸內(nèi)容物微生物分析顯示，枯草芽孢桿菌和乳酸菌組盲腸乳酸菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組，同時(shí)也降低了盲腸大腸桿菌數(shù)量。與對(duì)照組相比，枯草芽孢桿菌組仔豬結(jié)腸乳酸菌數(shù)量顯著提高，大腸桿菌數(shù)量顯著降低。由此可見，枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬腸道微生物生態(tài)系統(tǒng)的影響可能是提高斷奶仔豬生長性能的主要原因。此外，盡管Blomberg等（2003）也報(bào)道嗜酸乳酸菌與抑制大腸桿菌的腸道定植潛能有關(guān)，大腸桿菌是腸道中最常見的有害微生物，是引起仔豬腹瀉的主要原因之一，可影響腸道屏障，破壞腸道完整性。但在本研究中枯草芽孢桿菌的優(yōu)勢(shì)大于嗜酸乳桿菌，提示其能有效地在腸道定植，且能保證仔豬健康，避免感染性疾?。↙i等，2008）。

4 結(jié)論

斷奶仔豬日糧中添加枯草芽孢桿菌可以改善能量和粗蛋白質(zhì)表觀消化率，進(jìn)而提高體重以生長后期的日增重和飼料報(bào)酬，同時(shí)可以降低盲腸和結(jié)腸有害菌數(shù)量。