陳麗芳 李艷奇 鞠超

（1，山東省榮成市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 264300；2，山東省榮成市城西畜牧獸醫(yī)站 264300）

羊小反芻獸疫是羊只感染小反芻獸疫病毒引發(fā)的一種急性、熱性傳染病，以病羊體溫升高、口腔潰瘍、腹瀉、肺部炎癥為主要臨床特征，因此，羊小反芻獸疫又稱為口炎肺腸炎復(fù)合癥。小反芻獸疫病毒主要通過(guò)呼吸系統(tǒng)感染健康羊只，不同品種的羊均是小反芻獸疫病毒的天然宿主，其中山羊的易感性高于綿羊，由于羊小反芻獸疫發(fā)病率與死亡率較高，已被我國(guó)列為一類動(dòng)物疫病，因此，養(yǎng)殖戶需要高度關(guān)注小反芻獸疫的流行特點(diǎn)，有針對(duì)性地進(jìn)行防控，提高羊群免疫力，確保養(yǎng)羊業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展。

1 病原特點(diǎn)

羊小反芻獸疫的致病原為小反芻獸疫病毒，該病毒與牛瘟病毒具有相似的物理和化學(xué)特性，均屬于副黏病毒科麻疹病毒屬。羊小反芻獸疫病毒耐寒冷，可在低溫和冰箱內(nèi)存活較長(zhǎng)時(shí)間，但該病毒對(duì)pH 的敏感性較高，在酸性環(huán)境（pH＜4.0）和堿性環(huán)境（pH＞11）均可被殺滅，且羊小反芻獸疫病毒也不耐熱，在50℃下1h 即可被殺滅，75%酒精、2%的氫氧化鈉和碘制劑等均可有效滅活羊小反芻獸疫病毒。

2 流行特點(diǎn)

2.1 易感動(dòng)物

小反芻獸疫病毒主要感染小反芻動(dòng)物，不同品種羊均可感染，其中山羊和綿羊的易感性較高，野生山羊、野生綿羊也可感染，但山羊的發(fā)病率和死亡率高于綿羊，歐洲品系山羊的易感性高于亞洲品系，不同羊只個(gè)體因自身抗病力不同，其發(fā)病率和死亡率也存在差異。一般易感羊群發(fā)病率超過(guò)60%，死亡率超過(guò)50%[1]。

2.2 傳染源及其傳播途徑

羊小反芻獸疫的傳染源為感染病羊或隱性帶毒動(dòng)物。羊小反芻獸疫的傳播途徑包括直接感染和間接感染，健康羊只可通過(guò)直接接觸感染病畜、分泌物、排泄物或污染的飼料飼草、水源、用具、護(hù)具進(jìn)行病毒感染，小反芻獸疫病毒存在于公羊精液中，通過(guò)人工授精間接感染，該病毒也可存在于胚胎中經(jīng)胚胎移植感染母羊。

2.3 流行季節(jié)

羊小反芻獸疫一年四季均可發(fā)病，大多以零星散發(fā)為主，若疫區(qū)中易感動(dòng)物數(shù)量較多且管控不嚴(yán)時(shí)也會(huì)出現(xiàn)地方流行性。

3 臨床癥狀

羊小反芻獸疫潛伏期為4～20d，大多數(shù)為1 周左右。羊小反芻獸疫根據(jù)臨床癥狀表現(xiàn)劃分為急性型、標(biāo)準(zhǔn)型和溫和型。急性型羊小反芻獸疫發(fā)病突然，病程短，不超過(guò)2d，臨床癥狀不明顯，養(yǎng)殖戶往往還未察覺(jué)，病羊已經(jīng)死亡。標(biāo)準(zhǔn)型羊小反芻獸疫是最常見(jiàn)的類型，病羊感染后持續(xù)高熱，體溫上升至41℃，可持續(xù)發(fā)熱3～5d，病羊呼吸困難，咳嗽，出現(xiàn)支氣管肺炎，口腔和鼻腔的分泌物增加，口腔也會(huì)出現(xiàn)程度不等的口腔潰瘍，病羊腹瀉嚴(yán)重，病程后期糞便中帶血，精神沉郁，脫水消瘦，若不及時(shí)治療，病羊尤其是年齡較小的羊只死亡率較高，可達(dá)50%～100%，妊娠母羊流產(chǎn)率也較高。溫和型羊小反芻獸疫羊只臨床癥狀輕微，體溫最高至39℃，癥狀與感冒相似，一般經(jīng)過(guò)2～3d 治療即可康復(fù)。

4 診斷檢測(cè)

4.1 鑒別診斷

羊小反芻獸疫在臨床癥狀上和羊病毒性腹瀉、羊傳染性膿皰和羊口蹄疫有許多相似之處，在診斷時(shí)應(yīng)做好鑒別診斷，如附表所示。

附表 羊小反芻獸疫與其他疾病鑒別診斷

4.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

4.2.1 抗體檢測(cè)

主要采用阻斷ELISA 或競(jìng)爭(zhēng)ELISA 方法檢測(cè)綿羊、山羊血清或血漿中小反芻獸疫病毒抗體。檢測(cè)過(guò)程主要包括采集樣品、分離血清、布板與操作、結(jié)果判定等。一是樣品采集及處理：無(wú)菌采集血液，用常規(guī)方法分離血清備用。二是布板與操作；在分別取50ul 陰性血清、陽(yáng)性血清、稀釋液對(duì)照加在抗原包被板中，陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清各設(shè)2 孔。在樣品孔中加入稀釋液25ul/孔，再加入待檢血清25ul/孔，37℃孵育60min。棄去板中液體，加洗滌液清洗4 次，最后一次拍干殘留液。每孔加入50ul 酶標(biāo)抗體，37℃孵育30min。重復(fù)步驟2，每孔加底物溶液50ul，室溫避光作用15min。最后每孔加入終止液50ul，用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定OD 值，計(jì)算阻斷率。三是結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照阻斷率（PB）＞60，陰性對(duì)照阻斷率（PB）＜40，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效；否則，應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。待檢樣品阻斷率（PB）＞50，判為陽(yáng)性；待檢樣品阻斷率（PB）≤50，判為陰性。抗體檢測(cè)可用于檢測(cè)免疫羊的免疫抗體及未免疫羊的感染抗體。

4.2.2 病原學(xué)檢測(cè)

小反芻獸疫的病原學(xué)診斷方法主要包括RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）和抗原捕獲ELISA 等。目前實(shí)驗(yàn)室常用熒光RT-PCR 方法來(lái)進(jìn)行羊小反芻獸疫病毒核酸的檢測(cè)。具體步驟包括樣品采取、樣品前處理、核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)、結(jié)果分析等。一是樣品采集及處理：首先配制0.01mol/L pH7.4 的磷酸鹽緩沖液（PBS 液），進(jìn)行高壓滅菌后，分裝于1ml 的小離心管中。采集羊的鼻腔棉拭子、結(jié)膜拭子等放在盛有PBS 液的小離心管中，冷藏送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。二是樣品處理及核酸提取：檢測(cè)時(shí)將棉拭子充分捻動(dòng)，擠干后棄去拭子，取樣品液離心取上清采取手動(dòng)提取或自動(dòng)核酸提取的方法進(jìn)行小反芻獸疫病毒核酸提取（制備RNA）。三是擴(kuò)增檢測(cè)（RT-PCR 操作）：從試劑盒中取出RT-PCR 反應(yīng)液、Taq 酶、RT-PCR 酶，在室溫融化后，瞬時(shí)離心，計(jì)算好各試劑的用量，加入適當(dāng)體積的離心管中，向每個(gè)PCR 管中各分裝15ul，每管加10ul 制備的RNA，瞬時(shí)離心，排好順序放入熒光PCR 儀內(nèi)，設(shè)置好擴(kuò)增程序，進(jìn)行RT-PCR 反應(yīng)。四是結(jié)果分析：陰性對(duì)照Ct 值應(yīng)為none，陽(yáng)性對(duì)照Ct 值應(yīng)小于或等于28.0，實(shí)驗(yàn)成立。Ct 值為none 的樣本判為陰性，Ct 值小于或等于30.0 的樣本判為陽(yáng)性。

5 防控措施

5.1 科學(xué)接種疫苗，提高羊群免疫力

科學(xué)的疫苗接種是提高機(jī)體抵抗力，降低羊小反芻獸疫感染風(fēng)險(xiǎn)的重要措施，養(yǎng)殖戶需要給予重視，制定好接種計(jì)劃并堅(jiān)持實(shí)施。目前，羊小反芻獸疫防疫疫苗主要為小反芻獸疫活疫苗，超過(guò)1 月齡的羊進(jìn)行全群免疫，妊娠母羊也可接種，疫苗用滅菌生理鹽水稀釋后，每只羊頸部皮下注射1ml，免疫后抗體保護(hù)最長(zhǎng)時(shí)間可達(dá)36 個(gè)月，需要注意稀釋后的疫苗應(yīng)避免陽(yáng)光直射，且在3h 內(nèi)需要用完，羊只注射時(shí)不能共用針頭。疫苗接種后要實(shí)時(shí)關(guān)注羊群狀況，若出現(xiàn)免疫反應(yīng)需要對(duì)其進(jìn)行隔離觀察，同時(shí)做好羊群免疫登記，記錄好疫苗批號(hào)、生產(chǎn)日期、免疫日期、免疫日齡、注射劑量等信息。

5.2 做好日常管理，切掉傳播途徑

（1）加強(qiáng)羊群的飼養(yǎng)管理，提供羊只營(yíng)養(yǎng)均衡、搭配合理的飼草飼料，保持羊舍通風(fēng)良好，干凈整潔，可以有效提高羊只對(duì)疾病的抵抗力。（2）加強(qiáng)羊場(chǎng)和羊舍的日常清潔管理，及時(shí)清掃羊舍地面的糞污，清水沖刷后及時(shí)用風(fēng)機(jī)吹干，保持地面干燥。（3）制定科學(xué)的消毒管理制度，每周對(duì)羊舍進(jìn)行一次消毒，每一批羊出欄后對(duì)羊舍進(jìn)行徹底清洗消毒。（4）堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，若引種必須堅(jiān)持科學(xué)引進(jìn)，對(duì)引入的羊只進(jìn)行為期30d 的隔離觀察，羊只健康后才能合群。（5）嚴(yán)格管理進(jìn)出場(chǎng)的人員、車輛，尤其是進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的人員和車輛要規(guī)范消毒操作，以免出現(xiàn)人員、車輛帶毒問(wèn)題。

5.3 加強(qiáng)監(jiān)測(cè)預(yù)警，實(shí)行科學(xué)防控

結(jié)合實(shí)際情況，制定小反芻獸疫監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃，主動(dòng)開(kāi)展羊群免疫抗體檢測(cè)及病原學(xué)監(jiān)測(cè)工作，監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn)群體免疫抗體水平不合格的，應(yīng)向主管部門(mén)及時(shí)報(bào)告，迅速?gòu)?qiáng)化免疫措施，按照有關(guān)免疫規(guī)定及時(shí)補(bǔ)免，并跟蹤監(jiān)測(cè)，確保免疫密度與質(zhì)量。病原學(xué)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)性樣品要及時(shí)送國(guó)家外來(lái)動(dòng)物疫病參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原分離鑒定，并將陽(yáng)性情況按快報(bào)要求逐級(jí)上報(bào)。對(duì)病原檢測(cè)陽(yáng)性畜和外引動(dòng)物感染抗體陽(yáng)性畜進(jìn)行撲殺凈化，必要時(shí)對(duì)同群畜進(jìn)行撲殺，并作無(wú)害化處理[2]。根據(jù)監(jiān)測(cè)情況進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及預(yù)警預(yù)報(bào)，為防控羊小反芻獸疫提供科學(xué)依據(jù)。

6 結(jié)語(yǔ)

本文從該病的病原特點(diǎn)、流行特點(diǎn)、臨床癥狀、診斷檢測(cè)及防控措施等方面進(jìn)行闡述，以期為大家在小反芻獸疫的認(rèn)識(shí)和防控上提供參考。綜上所述，科學(xué)的疫苗接種和飼養(yǎng)管理可以有效防控羊小反芻獸疫的發(fā)生，為羊群健康生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。今后需要進(jìn)一步探討研究更有效的防控方法，加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，做好羊場(chǎng)生物安全管理工作，從源頭杜絕該病的發(fā)生，以促進(jìn)養(yǎng)羊業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。