高 菲 董瑞林 宋志浩 張?zhí)N瀚 陳孟毅 邱珊珊 王成龍 許 林 成偉華

（原子高科股份有限公司 北京102413）

神經內分泌腫瘤（Neuroendocrine Tumors，NETs）是一類起源于不同神經內分泌器官的一組異質性腫瘤，主要以胃、腸和胰神經內分泌腫瘤多見，發(fā)病率約為十萬分之七［1-3］。NETs的罕見性和無癥狀的臨床過程使得漏診和誤診率高，近60%的患者在初診時發(fā)現已處于晚期［4］。生長抑素受體（Somatostatin Receptor，SSTR）為七螺旋G蛋白偶聯糖蛋白跨膜受體，有5種不同的分子亞型［5］，研究表明高達94%的NETs細胞表面有SSTR的高表達，甚至一些低分化的腫瘤細胞中也有SSTR的表達。SSTR成為診斷和治療NETs并進行治療的重要靶點。

從20世紀80年代至今，已經報道并評估了許多放射性標記的SSTR靶向分子探針［6-9］。其中奧曲肽作為一種人工合成的生長抑素類似物，因其理想的代謝半衰期，使得放射性核素標記的奧曲肽及其類似物的研究成為熱點。例如，采用治療核素放射性標記的SSTR激動劑（如90Y-或177Lu-DOTATOC和177Lu-DOTATATE），可進行肽受體放射性核素治療（Peptide Receptor Radionuclide Therapy，PRRT）［10］，以及用于正電子發(fā)射斷層顯像（Positron Emission Tomography，PET）的68Ga標記的SSTR激動 劑68Ga-DOTATOC［11］、68Ga-DOTANOC和68Ga-DOTATATE［12］，可對神經內分泌腫瘤進行顯像定位。SSTR-PET/CT在檢測原發(fā)性腫瘤、未知原發(fā)性腫瘤、分期、再灌注和評估NETs患者的治療反應等方面發(fā)揮著重要作用，18F標記的多肽類似物也成為熱門的研究方向。

與其他放射性核素相比，18F核素產生的正電子能量較低，最高只有0.635 MeV，平均為0.25 MeV，其在組織中湮滅距離短（約2.4 mm），具有合適的半衰期（t1/2=109.8 min），可以得到高分辨率的圖像，因此成為臨床應用最廣泛、最理想的PET顯像核素。Schottelius等［13］報 道 的Cel-S-Dpr（［18F］FBOA）TOCA展現出良好的藥代動力學和較高的腫瘤與背景比值，并且首次在患者研究中證實了PET成像潛力，然而較低標記效率限制18F-肽標記在臨床上的應用。之后，Wester等［14］報道18F-FP-Gluc-TOCA展現出較高的腫瘤特異性和較好的對比度，成為SSTR陽性腫瘤PET成像示蹤劑，并應用于臨床，但由于標記過程繁瑣，很大程度上影響臨床使用。William、江大衛(wèi)、李葆元等［15-18］發(fā)表的Al18F復合物偶聯雙功能螯合劑（NOTA、DOTA等）標記方法的應用很大程度上推動18F標記多肽類正電子藥物的進展，該方法標記簡單、快速，可在水環(huán)境中實現18F核素的標記。溫凱、郭飛虎等［19-20］研究糖基化奧曲肽衍生物18FTa-Gluc-TOCA以 及n-Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-TOCA探針，水溶性好，體內外穩(wěn)定。通過生物分布實驗發(fā)現，在生長抑素受體高表達的胰腺中有一定的攝取，其中18F-Ta-Gluc-TOCA在腫瘤內保留時間較長，有望用于生長抑素受體陽性腫瘤PET顯像劑。近期，美國國立衛(wèi)生研究院生物醫(yī)學影像與生物工程研究所陳小元教授實驗室聯合廈門大學分子影像暨轉化醫(yī)學中心以RGD2為靶向分子、PEG4為連接基團偶聯NOTA后，通過Al18F標記，先后開發(fā)出氟［18F］阿法和18F-阿法肽（18F-AlfatideⅡ）。與世界同類產品相比，氟［18F］阿法肽不僅有親和力高、非靶本底清除速度較快，而且穩(wěn)定性好、標記過程簡單易于操作［21］。2018年，中國國家藥品監(jiān)督管理局授予18F-AlfatideⅡ臨床試驗批件，成為國內首個獲批的正電子放射性一類新藥。這進一步表明Al18F標記方法標記多肽是具有良好應用前景。

KE108多肽作為生長抑素類似物，具有和奧曲肽相似的化學結構，并且在對5種不同亞型受體都具有較高的親和力（表1），對于SSTR陽性腫瘤具有廣譜性［23］。研究發(fā)現，奧曲肽的糖基化可降低多肽的親脂性和肝膽代謝，優(yōu)化體內代謝動力學［24］。2016年，張健等采用99Tcm間接標記的方法，利用雙功能螯合劑（Hydrazinonicotinamide，HYNIC），分別以Tricine［三（羥甲基）甲基甘氨酸］和乙二胺-N，N-二乙酸為協同配體對多肽KE108進行標記99Tcm［25］。優(yōu)化之后的標記率90%以上，標記物99Tcm-HYNICKE108在腫瘤組織中有較好攝取率，并且給藥后1 h內腫瘤顯像較為清晰，說明KE108多肽對生長抑素受體具有一定的靶向性和親和力。

表1 生長抑素及其類似物對SSTR不同亞型的親和力（IC50/nmol·L-1）Table 1 Binding affinity of somatostatin and its analogues to all sst subtypes(IC50/nmol·L-1)

本研究通過對KE108多肽進行化學修飾，設計并制備了一種新型通過偶聯雙功能螯合劑NOTA的糖基化生長抑素類似物，通過標記18F核素得到Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108以靶向SSTR陽性腫瘤，分別在體內外進行生物學評價，評估其用于SSTR陽性腫瘤早期診斷的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

ECLIPSE HP型回旋加速器（德國Siemens公司）；PET/CT（比利時Molecube公司）；自動γ計數儀（Perkinelmer Wallac公司）；ESI-MS質譜儀（美國Capintec公司）；MH-2800加熱模塊；活度計CRC-15；CBN-20A高效液相儀（日本Shimadzu公司）；色譜柱Agilent ZORBAX XDB-C18，5μm，4.6 mm×250 mm；GABI型放射性檢測器（德國Raytest公司）。

Fmoc-Phe-CTC Resin、O-苯并三氮唑-四甲基脲六 氟 磷 酸 鹽（O-Benzotriazole-N，N，N'，N'-tetramethyl-uronium-hexafluorophosphate，HBTU）、N-甲基嗎啉（4-Methylmorpholine，NMM）、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽（1-Ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl） carbodiimide hydrochloride，EDC·HCl）、Fmoc-Tyr（tBu）-OH、Glucose-Lys（Fmoc）-OH、NOTA（OtBu）、鈀碳（Pd/C）、哌啶（Piperidine，Pip）、N，N-二甲基甲酰胺（N，N-Dimethylformamide，DMF）、六 氟 異 丙 醇（Hexafluoroisopropanol，HFIP）、二 氯 甲 烷（Dichloromethane，DCM）、甲 醇、乙 二 硫 醇（Ethanedithiol，EDT）、冰 乙 醚、三 氟 乙 酸（Trifluoroacetic acid，TFA）、1-羥基苯并三唑（NHydroxybenzotrizole，HOBT）、乙腈、六水合三氯化鋁（百靈威科技有限公司）；H218O（江蘇華益科技有限公司）；龍膽酸（阿拉?。?。

1.2 多肽合成

Gluc-Lys（NOTA）-KE108結構及其合成路線見圖1和圖2。稱量0.3 mmol·g-1的Fmoc-Phe-CTC Resin 5 g，20%Pip/DMF脫保護30 min，之后按當量比例（AA:HBTU:NMM=3:2.85:6）投入原料，加入適量DMF，鼓氮氣反應30 min，通過茚三酮檢測反應完全，用DMF、DCM、甲醇依次洗滌；重復上述步驟，得 到Fmoc-Dab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe-CTC Resin（樹脂肽）。將樹脂肽置于30%HFIP/DCM中，搖床控溫1 h，抽濾收集濾液，旋蒸濃縮得到粗品Fmoc-Dab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe-OH（1）。

圖1 Gluc-Lys(NOTA)-KE108的化學結構Fig.1 Chemical structure of Gluc-Lys(NOTA)-KE108

圖2 Gluc-Lys(NOTA)-KE108的合成路線Fig.2 Synthetic route of Gluc-Lys(NOTA)-KE108

將1溶解于DCM中，分別加入EDC·HCl、HOBT（1.2當量）和NMM（2當量），攪拌反應過夜，旋蒸濃縮得到環(huán)化后的粗品Cyclo（Fmoc-Dab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe）（2）。

將2溶解于20%Pip/DMF中，攪拌反應1 h，濃縮，然后依次加入1.1當量的Fmoc-Tyr（tBu）-OH溶解于DMF中，之后添加EDC·HCl、HOBT（1.2當量）和NMM（2當量），之后用20%Pip/DMF處理1 h，濃縮后得到粗品Tyr（tBu）-Cyclo（H-Dab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe）（3）。

重復上述步驟，連接Glucose-Lys（Fmoc）-OH得到粗產品Gluc-Lys-H-Tyr（tBu）-Cyclo（H-Dab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-LysThr（tBu）-Phe）（4）。

重復上述步驟，繼續(xù)連接NOTA（OtBu）得到粗品Gluc-Lys-（NOTA（OtBu））-H-Tyr（tBu）-Cyclo（HDab-Arg（NO2）-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe）（5）。

將5溶解于甲醇中，加入Pd/C氫化后得到粗品Gluc-Lys（NOTA（OtBu））-H-Tyr（tBu）-Cyclo（H-Dab-Arg-Phe-Phe-Trp（Boc）-Lys-Thr（tBu）-Phe）（6）。

將6溶解于TFA/EDT/H2O=95/2.5/2.5切割液，搖床控溫3 h，抽濾，收集濾液后加入6倍體積冰乙醚，離心沉淀收集固體，將沉淀的粗品用乙醚洗三遍，干燥后用反相高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）純化，得到最終的產品Gluc-Lys（NOTA）-KE108。

1.3 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108制備

向西林瓶中依次加入0.1 mol·L-1醋酸緩沖液（100μL，pH=4.0），AlCl3的0.1 mol·L-1醋酸緩沖液（3μL，2 mmol·L-1），10μL 1 mg·mL-1的龍膽酸，100μL［18F］F-生理鹽水溶液，200μL無水乙腈，加入Gluc-Lys（NOTA）-KE108（50μL，1 mg·mL-1），95℃反應10 min，冷卻至常溫。用1 mL去離子水稀釋，取其中20μL用HPLC測定標記率。然后標記物緩慢上Sep-pak C-18 light柱（預先活化，用10 mL無水乙醇、10 mL純化水活化后吹干），用5 mL純化水洗去未反應的18F氟離子等水溶性雜質，用1 mL的75%乙醇淋洗下產品，通過氮吹除去乙醇，并加入適量生理鹽水稀釋。

利用高效液相色譜儀對標記產物進行標記率、比活度、放射性化學純度的測定，液相條件如表2所示。

表2 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108高效液相色譜條件Table 2 HPLC conditions of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108

1.4 理化性質研究

1.4.1 脂水分配系數

取500μL正辛醇、400μL磷酸鹽緩沖液（Phosphate Buffer Saline，PBS）溶液置于2 mL離心管內，之后加入100μL Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108注射液。將混合液劇烈旋渦充分混合1 min，并以10 000 min-1的速度離心5 min。從上述溶液中提取100μL有機相，添加到含有400μL正辛醇和500μL PBS的新離心管中，重復上述步驟三次。分別取100μL有機相和水相（n=5）溶液，使用自動γ計數儀測定，計算脂水分配系數（lgP值）。

1.4.2 體外穩(wěn)定性

在體外分別進行標記物在生理鹽水和10%小牛血清中的穩(wěn)定性測定。檢測在生理鹽水中的穩(wěn)定性：將37 MBq Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108溶于生理鹽水中，在室溫下放置2 h，通過HPLC測定標記物在0.5 h、1 h和2 h的放射性化學純度。檢測在血清中的穩(wěn)定性：將37 MBq Gluc-Lys（［18F］NOTA）-KE108溶于1 mL小牛血清中，37℃孵育，分別在0.5 h、1 h和2 h取300μL上述血清，加入相同體積的乙腈渦旋、離心，取上清液通過0.22μm過濾器，用HPLC進行檢測。

1.5 細胞攝取實驗

1.5.1 細胞培養(yǎng)及荷瘤鼠構建

所有細胞株均培養(yǎng)于中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所，SSTR陽性腫瘤AR42J和BON1細胞株用DMEM培養(yǎng)基在37℃、5%CO2細胞培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。將AR42J細胞種于BALB/c小鼠（20 g左右）右上肢腋下（腫瘤直徑為0.5~1.0 cm）進行實驗。所有動物實驗均符合動物倫理委員會標準。

1.5.2 細胞飽和實驗

將生長狀態(tài)良好的AR42J和BON1細胞分別鋪于24孔板，細胞數量約為1×105，培養(yǎng)24 h。向每孔內加入Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108（放射性濃度范圍1~250 nmol·L-1），抑制組加入Gluc-Lys（NOTA）-KE108（每孔10μL，100μg·mL-1）阻斷細胞攝取，在37℃孵育1 h。然后用1 mL PBS（pH=7.4）洗滌兩次細胞，最后使用1 mL NaOH（1 mol·L-1）消化5 min裂解細胞。采用自動γ計數儀測量收集的放射性活度。采用GraphPad Prism 5.0軟件計算Bmax和Kd值。

1.5.3 細胞攝取實驗

向生長狀態(tài)良好的每孔AR42J和BON1細胞內加 入37 kBq Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在37℃培養(yǎng)15 min、0.5 h、1 h、2 h后，抑制組加入Gluc-Lys（NOTA）-KE108（每孔10μL，100μg·mL-1）阻斷細胞攝取，之后用1 mL PBS（pH=7.4）洗滌兩次細胞，使用1 mL NaOH（1 mol·L-1）消化5 min裂解細胞，最后計算不同時間點細胞的攝取率。攝取率=細胞中的放射性計數/總放射性計數×100%。

1.6 PET顯像研究

取AR42J荷瘤鼠，正常組經尾靜脈給藥（3.7 MBq（100μL·只）），分別在給藥后0.5 h、1 h、2 h和3 h進行PET顯像，小鼠呈俯臥位，使用異氟烷和氧氣混合全身麻醉下掃描。抑制組在Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108給藥前0.5 h注射Gluc-Lys（NOTA）-KE108前體（100μg/125μL），使用異氟烷和氧氣混合全身麻醉下掃描小鼠。所有數據均進行衰減校正。勾畫腫瘤感興趣區(qū)（Region of interest，ROI），記錄ROI內的平均計數［（%ID·g-1，-x±s）］。使用Prism軟件計算各主要部位的Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108富集以及靶與非靶比值。

1.7 生物分布研究

取8只AR42J荷瘤鼠隨機分為兩組，每組4只。正 常 組 靜 脈 注 射0.18 MBq Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108后，觀察探針在AR42J荷瘤鼠體內的分布情況。抑制組將Gluc-Lys（NOTA）-KE108（100μg）和Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108共注射（n=4），小鼠在注射后1 h處死并解剖，取心、肝、脾、肺、骨、腫瘤等組織和臟器，稱取重量，用自動γ計數儀計算放射性計數，計算各組織%ID·g-1。

2 結果與討論

2.1 多肽合成

采用Fmoc固相合成法，通過氨基酸縮合，樹脂上多肽的切除，多肽的環(huán)化，反相HPLC分離純化，得到最終的產品Gluc-Lys（NOTA）-KE108。由質譜圖（圖3）可知，ESI-MS（+）m/z：1 852.8，說明制備得到的多肽分子量與Gluc-Lys（NOTA）-KE108理論分子量（1 852.1）相符合。通過HPLC分析（圖4）可知，其純度大于95%，保留時間為9.09 min。

圖3 Gluc-Lys(NOTA)-KE108多肽質譜圖Fig.3 Mass spectra of Gluc-Lys(NOTA)-KE108

2.2 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108制備

通過HPLC分析，Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108保留時間為9.69 min（圖4），與Gluc-Lys（NOTA）-KE108多肽的HPLC保留一致（9.09 min），由此確定標記化合物制備完成。Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108標記率為（30±5）%（n=6），放射化產率為（20±5）%（n=6），經HPLC檢測放射性純度大于95%，比活度大于1.37 GBq·μmol-1。

圖4 Gluc-Lys(NOTA)-KE108與Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108的HPLC分析圖譜Fig.4 HPLC analysis of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 and non-radioactive compound Gluc-Lys(NOTA)-KE108

2.3 理化性質研究

測得Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在正辛醇和PBS中的脂水分配系數lgP=-2.172±0.03（n=3），說明該探針呈水溶性，利于腎臟代謝。通過HPLC分析可知，Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在生理鹽水和小牛血清中都很穩(wěn)定（圖5），放置2 h放化純均大于95%。

圖5 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108在生理鹽水(a)和血清中(b)的體外穩(wěn)定性分析圖譜Fig.5 In vitro stability of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in saline(a)and serum(b)

2.4 細胞攝取實驗

2.4.1 細胞飽和結合實驗

Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J和BON1細胞中的飽和結合實驗結果如圖6所示。在AR42J細胞中Kd值為（152.3±49.1）nmol·L-1（n=4），Bmax為7.8×104min-1/105細胞。在BON1細胞中的Kd值 為（45.5±13.6）nmol·L-1（n=4），Bmax為1.9×104min-1/105細胞。Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108展現了較高的SSTR靶向能力。

圖6 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108在AR42J(a)和BON1(b)細胞中飽和結合實驗Fig.6 Saturation binding experimental results of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in AR42J(a)and BON1(b)cells

2.4.2 細胞攝取實驗

Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J和BON1細胞中攝取實驗結果如圖7所示。Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J細胞中攝取率隨時間延長不斷增加，在1.5 h達最大值為（5.31±0.37）%，明顯高于抑制組（2.84±0.09）%。在BON1細胞中攝取率在30 min達最大，為（4.83±0.53）%，同樣探針能夠被特異性抑制（（2.12±0.53）%）。

圖7 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108在AR42J(a)和BON1(b)細胞不同時間點的攝取Fig.7 Uptake of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in AR42J(a)and BON1(b)cells at the indicated time points

2.5 PET顯像研究

Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J和BON1腫瘤細胞均具有良好的細胞親和力和特異性，我們選擇在AR42J腫瘤鼠中進行PET顯像。結果顯示：Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在肝臟和腎臟攝取值高，說明可通過腎臟和肝膽進行清除，AR42J腫瘤攝取在注射后0.5 h達到峰值（（2.25±0.44）%ID·g-1），之后稍微降低并逐漸趨于平穩(wěn)（圖8（a）），但由于周圍器官攝取值較高，對比度較低（圖8（b）），注射后1~2 h為顯像最佳時間。

圖8 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108在AR42J荷瘤鼠中不同時間點的PET顯像(a)及定量分析(b)Fig.8 PET imaging(a)and quantitative analysis(b)of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in AR42J tumor-bearing mice at the indicated time points

采用Gluc-Lys（NOTA）-KE108進行阻斷實驗，評價Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J腫瘤中的結合特異性和選擇性（圖9）。將Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108與Gluc-Lys（NOTA）-KE108共注射后1 h進行PET顯像。結果顯示：腫瘤部位的放射性攝取顯著降低，攝取值（1.65±0.33）%ID·g-1和（0.82±0.17）%ID·g-1。其腫瘤部位的攝取與肌肉攝取基本一致，顯示Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108的攝取機制是以SSTR介導。

圖9 有無添加抑制劑注射Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 1 h后AR42J荷瘤鼠體內的PET顯像(a)及定量分析(b)Fig.9 PET imaging(a)and quantitative analysis(b)of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in AR42J tumor-bearing mice with or without adding inhibitor after 1-h injection

2.6 生物分布研究

Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在AR42J荷瘤鼠中生物分布數據如表3所示。由表3可知，在給藥后1 h，探針在腎臟的放射性攝取最高，同時肝臟對該探針的攝取也相對較高。當然，Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108在骨中也有少量的攝取，說明探針在體內未發(fā)生明顯的分解，在血液中的攝取較低，說明探針可以快速地分布在組織器官中，在SSTR表達較多的腎上腺中具有一定的攝取，表明其與SSTR具有親和力。在腫瘤中放射性攝取值為（2.04±0.40）%ID·g-1，并且加入Gluc-Lys（NOTA）-KE108以被明顯抑制，攝取值為（1.15±0.08）%ID·g-1，同樣的在腎上腺組織也表現出相同的放射性攝取抑制，表明探針具有SSTR靶向性和特異性。

表3 Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108在AR42J荷瘤鼠中注射后1 h生物分布（n=4）Table 3 Biodistribution results of Gluc-Lys([Al18F]NOTA)-KE108 in SSTR-positive AR42J tumor-bearing mice for 1 h(n=4)

3 討論與結論

本研究采用Fmoc固相合成法，合成得到Gluc-Lys（NOTA）-KE108生長抑素類似物。Al18F復合物和Gluc-Lys（NOTA）-KE108通過螯合反應制備了Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108，經過Sep-pak C-18 light柱純化之后放化純大于95%，總合成時間為20 min。水溶性較好，在生理鹽水和小牛血清中放置2 h后，放化純大于95%，體現出良好的體外穩(wěn)定性。而采用協同配體進行間接標記的99Tcm-HYNICKE108［25］，兩步法標記工藝復雜，耗費時間。多個協同配體的加入給產物的純化也帶來了一定的困難。Al18F標記方法雖然標記率較低，但是制備工藝簡單易于操作，并且穩(wěn)定可靠重復性高。而且Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108采用了糖基化修飾的KE108多肽作為標記前體，可增加在腫瘤部位的攝取。與18F-Ta-Gluc-TOCA［19］相比，腫瘤的攝取相當。通過細胞攝取實驗，發(fā)現該探針在PET顯像中展現了良好的SSTR靶向性和特異性，在AR42J和BON1細胞上的受體表現出較高的結合親和力和特異性。但是，在生物分布實驗中，Gluc-Lys（［Al18F］NOTA）-KE108少量的骨攝取，表明探針在體內具有輕微的不穩(wěn)定性，下一步將準備添加穩(wěn)定劑進行進一步探索。