馬艷萍，拉 華，闞 威

(青海省動物疫病預防控制中心，青海 西寧 810001)

0 引言

青海省幅員遼闊，自然生態(tài)環(huán)境復雜多樣，是全國畜禽遺傳資源大省之一，有地方品種16個。在現(xiàn)有的地方品種中，藏羊、牦牛是全省家畜的主體，數(shù)量多、分布廣，是農(nóng)牧民生產(chǎn)生活中必不可少的重要物質保障，尤其環(huán)湖地區(qū)的羊年出欄量位居全省前列。因此對藏系綿羊進行疫病的血清學調查十分必要。

口蹄疫(foot and mouth disease，F(xiàn)MD)是一種熱性、急性且高度接觸傳染性疾病[1]，這種傳染病是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV)引起的，主要侵染的對象為偶蹄類動物。高度的親和性、高水平的特異性抗體是自然感染動物或者免疫動物產(chǎn)生抗病毒的有效免疫應答關鍵特征指標[2]?？谔阋咴谌蚍秶即嬖冢瑫r其范圍及感染數(shù)量呈現(xiàn)出增長的趨勢，對畜牧業(yè)的穩(wěn)健發(fā)展帶來了嚴重威脅。因此，本文對環(huán)湖地區(qū)的口蹄疫免疫抗體進行血清學檢測，旨在為該地區(qū)牦牛及綿羊的口蹄疫疫苗免疫情況提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 樣品采集

采用一次性真空采血器從動物的頸靜脈抽取血樣，樣本采集后以傾斜的角度放置，自然凝固后放置到4℃冰箱中，待5 h后再放入到37℃溫箱，2 h后提取血清，最后保存到-20℃冰箱中。

1.1.2 主要試劑

采購的試劑是由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所制口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒。

1.1.3 主要儀器

本實驗主要用到的儀器包括恒溫培養(yǎng)箱、MultiskanMK3光吸收酶標儀等。

1.2 試驗方法

依照口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒的產(chǎn)品說明書開展實驗，運用MultiskanMK3光吸收酶標儀450 nm波長測定樣本的吸光值，并對結果進行詳細記錄。實驗結果的質量控制：病毒的陽性對照血清抗體效價范圍在1:(1024±1)，對照組的OD值范圍在1.5±0.5，陰性對照血清的抗體效價不超過1：8，表明實驗結果可靠。結果判定：抗體效價達到1：128及以上，判定為口蹄疫O型抗體陽性；抗體效價小于1：64，判定為口蹄疫O型抗體陰性，當其結果在1:64～1:128范圍內，則判定為疑似。

2 試驗結果

對環(huán)湖地區(qū)2017-2019年春秋防牛、羊免疫血清樣品各660份進行口蹄疫O型抗體檢測，結果如表1所示。

表1 免疫抗體檢測結果

2017-2019年環(huán)湖地區(qū)羊O型口蹄疫免疫抗體總體合格率都在70%以上，羊O型口蹄疫免疫抗體普遍高于牦牛的口蹄疫抗體合格率。2017年羊O型口蹄疫抗體陽性率均在85%以上，牛陽性率在75%以上，且有2個縣陽性率達到100%，其中興?？h牛、羊陽性率均達到100%；2018年有3個縣羊陽性率達到100%，2個縣牛陽性率為100%，但貴南、興海、天峻3個縣羊O型口蹄疫免疫抗體陽性率低至2.5%，興?？h牛陽性率為35%；2019年環(huán)湖地區(qū)牛、羊免疫抗體均達到75%以上，且有5個縣羊陽性率達到100%，如圖1所示。

圖1 環(huán)湖地區(qū)各縣牛、羊O型口蹄疫免疫陽性率分布圖

3 討論

從檢測結果可以看出，部分縣免疫合格率低至20%以下，具體原因分析是由于散養(yǎng)戶較分散，不易統(tǒng)一管理，只有每年的春秋兩季集中免疫，相對于種畜場和商品代養(yǎng)殖場，免疫合格率較低，畜群受口蹄疫病毒感染的風險較高。部分高發(fā)口蹄疫的區(qū)域，都是采取疫苗免疫接種的方式來防止豬牛羊等動物感染這種疾病。盡管環(huán)湖地區(qū)都給易感動物進行疫苗接種，可是各個區(qū)域采取同樣的預防措施及免疫疫苗的情況下，免疫抗體的陽性率依然較低，其主要原因包括專業(yè)設施落后、防疫工作人員的經(jīng)驗不足等。為動物進行免疫注射時，出現(xiàn)漏診、飛針等問題，或注射完成期不足、采集血清時間過早等問題都會導致抗體效價數(shù)值達不到要求。基于此，應該進一步加強專業(yè)技術的培訓力度，提高防疫員的專業(yè)技能，建立完善的獎勵機制，以提高防疫員的工作積極性。另外，要求散養(yǎng)戶切實落實春秋兩季的免疫工作，確保免疫質量，避免出現(xiàn)免疫漏洞。