鐘 港，陳 坤，林文超，陳 東,3*，姚亞玲

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128；3.湖南舜天恒禾農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，湖南寧遠(yuǎn) 425600；4.懷化市畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，湖南懷化 418000）

湘南黃牛是湖南省湘南地區(qū)特有的地方品種，具有抗焦蟲、肉質(zhì)細(xì)嫩和醇香、繁殖性較高等優(yōu)點(diǎn)。牛肉中含有豐富的蛋白質(zhì)和人體必需氨基酸，脂肪含量低、味道鮮美，富含亞油酸及鎂、鐵、鋅等礦物質(zhì)，還含有對(duì)人體健康有利的肉堿、維生素等，深受消費(fèi)者喜愛。在家畜養(yǎng)殖中，日糧能量對(duì)動(dòng)物肥育性能起關(guān)鍵作用。Ramos-Canché 等[1]研究表明，日糧能量水平（11.72～13.39 MJ/kg）與墨西哥無毛豬的生產(chǎn)性能呈正相關(guān)；柏峻等[2]研究表明，日糧能量水平上升有助于提高育肥前期錦江牛血液中糖類和脂類代謝水平，增強(qiáng)蛋白質(zhì)的利用率；閆方權(quán)等[3]研究表明，能量水平低于營(yíng)養(yǎng)需要量有利于緩解奶牛熱應(yīng)激，同時(shí)能提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，而能量水平過高會(huì)加重奶牛熱應(yīng)激狀態(tài)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率有負(fù)面影響。本試驗(yàn)旨在研究不同日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)及抗氧化力的影響，以期為湘南黃牛的實(shí)際生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)和數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將19 月齡左右、體況良好、體重260 kg 的12 頭育肥前期湘南黃牛（閹公牛）隨機(jī)分為2 組，每組6 頭。基礎(chǔ)日糧參考《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 815-2004）中體重為260 kg 肉牛的營(yíng)養(yǎng)需要，分別按照預(yù)期日增重0.6 kg/d所需綜合凈能（低能組）和1.1 倍綜合凈能（高能組）配制試驗(yàn)精料，精料由玉米、大麥、麩皮、豆粕、大豆油、食鹽和預(yù)混料組成，精料營(yíng)養(yǎng)成分見表1，粗料為稻草秸稈。

表1 精料營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在湖南舜天恒禾農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司進(jìn)行，試驗(yàn)前消毒牛舍。試驗(yàn)預(yù)試期10 d，正試期90 d。試驗(yàn)牛統(tǒng)一管理，每天飼喂2 次（08:00、15:00），精料計(jì)量不限量，粗料每頭牛每天1.5 kg，自由飲水，保證日剩料量為投料量的5%～10%，記錄采食量。

1.3 生長(zhǎng)性能測(cè)定 正試期每天記錄參試牛的采食量，正式試驗(yàn)開始前連續(xù)2 d 在飼喂前對(duì)試驗(yàn)牛進(jìn)行空腹稱重，以其平均值作為初始體重（IBW），試驗(yàn)結(jié)束后連續(xù)2 d 在飼喂前對(duì)試驗(yàn)牛進(jìn)行空腹稱重，以其平均值作為終末體重（FBW），計(jì)算平均日增重（ADG）。每日飼喂前清理料槽并稱重剩料，計(jì)算平均日采食量（ADFI），并根據(jù)ADFI 和ADG 計(jì)算耗料增重比（F/G）。

ADG=（FBW－IBW）/試驗(yàn)天數(shù)

ADFI=正試期總采食量/試驗(yàn)天數(shù)

F/G=ADFI/ADG

參考王根林[4]的方法，分別在試驗(yàn)前和末期晨飼前測(cè)量試驗(yàn)牛的體高、十字部高、體長(zhǎng)、腹圍、胸圍、腰角寬和管圍。

1.4 血液生化指標(biāo)測(cè)定 正試期第90 天，試驗(yàn)牛于晨飼前頸靜脈采血20 mL，靜置15 min，4 000 r/min 離心15 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。血清生化指?biāo)包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHOL）、生長(zhǎng)激素（GH）、瘦素（LEP）、胰島素（INS）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）、游離脂肪酸（FFA）、乳酸脫氫酶（LDH）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px），采用南京建成生物工程研究所有限公司試劑盒用全自動(dòng)生化分析儀（Hitachi7020；Hitachi 公司，東京，日本）測(cè)定，購(gòu)買Elisa 試劑盒（安迪基因，北京，中國(guó)）測(cè)定血清激素和抗氧化指標(biāo)水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)用Excel 2010 和SPSS 17.0 軟件進(jìn)行處理分析，用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)方法進(jìn)行兩組之間的比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05 表示差異顯著，P＞0.05 表示差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)性能的影響由表2 可知，兩組IBW 和FBW 差異均不顯著，高能組ADG 和ADFI 高于低能組（P＜0.05），F(xiàn)/G 低于低能組（P＜0.05）。

表2 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)性能的影響

由表3 可知，高能組十字部高高于低能組（P＜0.05），其他指標(biāo)各組間均無顯著差異。

表3 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛體尺的影響 cm

2.2 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛血液生化指標(biāo)的影響 由表4 可知，高能組INS、LDL 含量和ALT 活性高于低能組（P＜0.05），能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛TP、ALB、GLO、BUN、TG、CHOL、FFA、LDH、GH、IGF-1、LEP、ALP、HDL 和AST 無顯著影響。

表4 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛血液生化指標(biāo)的影響

2.3 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛抗氧化指標(biāo)的影響由表5 可知，低能組GSH-Px 活性高于高能組（P＜0.05），而MDA 含量低于高能組（P＜0.05），能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛血液中SOD 活性無顯著影響。

表5 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃?？寡趸笜?biāo)的影響

3 討 論

3.1 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)性能的影響日糧能量水平是影響動(dòng)物采食量和育成牛生長(zhǎng)的主要因素。研究表明，反芻動(dòng)物攝入的能量隨著采食量的增加而升高，直接影響反芻動(dòng)物日增重和生長(zhǎng)性能[2,5-8]；柏峻等[9]研究表明，提高飼糧能量水平（6.02～7.46 MJ/kg）能提高育肥期錦江閹牛的生長(zhǎng)性能。在本研究中，高能組ADG、ADFI 和十字部高顯著高于低能組，而F/G顯著低于低能組，表明提高日糧能量水平能在一定程度上促進(jìn)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)發(fā)育，提高飼料利用率。

3.2 日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛血液生化指標(biāo)的影響血液生化指標(biāo)的變化通常與機(jī)體營(yíng)養(yǎng)水平或疾病密切相關(guān)[10]。研究表明，日糧不同能量濃度對(duì)奶公犢、新西蘭種公兔、育成期壩上長(zhǎng)尾雞、草原紅牛和生長(zhǎng)育肥豬的血液生化指標(biāo)都有不同程度的影響[11-15]。血清TP 含量反映機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝的強(qiáng)弱，TP 含量升高可促進(jìn)機(jī)體組織蛋白沉積[16]；血清ALB 含量則可反映動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)狀況[17]；血清GLO 作為免疫系統(tǒng)的載體，參與機(jī)體的免疫活動(dòng)[18]；血漿BUN 是動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物，其含量受日糧中粗蛋白質(zhì)高低影響，與體內(nèi)氮沉積、蛋白質(zhì)利用率呈顯著負(fù)相關(guān)[19-20]。唐松元等[21]研究表明，豪豬日糧能量水平在16.20～17.88 MJ/kg 時(shí)，血清BUN含量先降后升；鄭家三等[22]研究發(fā)現(xiàn)，奶牛血漿BUN濃度隨日糧能量水平呈遞增趨勢(shì)，而TP 含量無顯著變化；田春麗[18]研究表明，不同日糧能量水平（7.45～11.32 MJ/kg）對(duì)灘羊（22～35 kg）血清ALB 和血清GLO 無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，育肥期湘南黃牛日糧能量水平對(duì)血清中TP、ALB、GLO、BUN 均無顯著影響，可能是日糧在相同蛋白質(zhì)水平下，能量水平對(duì)動(dòng)物機(jī)體血液中蛋白水平無顯著影響。施瓊等[23]研究也表明，能量水平高低對(duì)血液中含氮物質(zhì)濃度無顯著影響。

INS 對(duì)機(jī)體各種組織代謝過程影響顯著，是促進(jìn)機(jī)體合成代謝的重要激素，在調(diào)節(jié)機(jī)體糖、脂肪、蛋白質(zhì)等能量物質(zhì)代謝上發(fā)揮著重要作用，還具有重要的促生長(zhǎng)作用。INS 含量升高能調(diào)節(jié)肝臟中生長(zhǎng)素受體，并通過影響肝臟中促生長(zhǎng)因子生成量，作用于生長(zhǎng)激素[24]。俞偉輝[25]和王惠影等[26]研究表明，湘東黑山羊和羅曼鵝采食不同能量水平日糧對(duì)胰島素含量影響顯著，隨著進(jìn)食能量增加，胰島素含量增加。本研究結(jié)果表明，高能組INS 含量顯著高于低能組，可能是隨著日糧能量水平增加，ADFI 上升，導(dǎo)致血糖濃度上升，葡萄糖通過葡糖糖轉(zhuǎn)運(yùn)體進(jìn)入胰島細(xì)胞后，被葡萄糖激酶磷酸化，引發(fā)一系列反應(yīng)進(jìn)而使INS 的合成和分泌增加[27]。INS 可以促進(jìn)全身組織，特別是肝、肌肉和脂肪組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，促進(jìn)肝糖原和肌糖原的合成和儲(chǔ)存，并抑制糖原的分解和糖異生，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)變成脂肪酸，儲(chǔ)存于脂肪組織中，進(jìn)而降低血糖濃度[28]。AST 和ALT 是動(dòng)物體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶，在非必需氨基酸合成和蛋白質(zhì)分解代謝中起著重要的中介作用，血清AST 和ALT 活性反映了蛋白質(zhì)合成和分解代謝的狀況，并影響血液中BUN 水平的變化[29]，二者活性升高時(shí)，可使蛋白質(zhì)分解代謝下降，合成代謝加強(qiáng)，有利于氮在體內(nèi)的蓄積，動(dòng)物生長(zhǎng)較快[30]。有學(xué)者研究表明，隨著日糧能量水平（6.02～7.46 MJ/kg）增加，錦江牛血液中AST 和ALT 活性呈上升趨勢(shì)[31]。本研究中，高能組AST 和ALT 活性高于低能組，且ALT 活性差異顯著，可能原因隨著日糧能量水平增加，動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)、脂肪和血糖三者轉(zhuǎn)換加快，體蛋白質(zhì)合成代謝加強(qiáng)，體內(nèi)轉(zhuǎn)氨基與脫氨基作用處于較高水平，從而使得AST 和ALT 活性增強(qiáng)。LDL 是由極低密度脂蛋白轉(zhuǎn)變而來，極低密度脂蛋白的主要功能是把內(nèi)源的TG、CHOL 和磷脂運(yùn)輸?shù)礁瓮饨M織去貯存或利用。血清CHOL 含量可反映機(jī)體脂類代謝的情況[32]，HDL 含量可反映體內(nèi)CHOL 清除情況[33]。孫國(guó)虎[34]研究表明，綿羊血液中LDL 含量隨著日糧能量水平（7.85～11.67 MJ/d）的增加而顯著提高，而血液中的CHOL 和HDL 差異不顯著；左之才[35]研究表明，奶牛產(chǎn)前產(chǎn)后，高能組日糧（25.20 NND/kg）血液中LDL 較對(duì)照組（21.30 NND/kg）略高；宋洪新等[36]研究表明，隨著日糧能量水平（9.7～12.1 MJ/kg）的升高，2 月齡獺兔HDL 和LDL 含量有上升趨勢(shì)，而3 月齡獺兔的LDL 含量顯著升高。本研究中，高能組LDL 含量顯著高于低能組，可能原因是飼喂高能飼料導(dǎo)致湘南黃牛體內(nèi)沉積的CHOL 含量較高，肝臟代謝能力有限，不能快速對(duì)其進(jìn)行代謝，需要更多的LDL 將CHOL 等運(yùn)到肝外組織去貯存或利用。本研究結(jié)果表明，日糧能量水平對(duì)育肥期湘南黃牛血液中INS、ALT 和LDL 含量均有顯著影響，但對(duì)其他血液指標(biāo)影響相對(duì)較小。

機(jī)體的抗氧化體系由酶促和非酶促兩大系統(tǒng)組成。酶促系統(tǒng)中的抗氧化酶主要有GSH-Px 和SOD 等，它們可以有效地清除體內(nèi)O-、H2、O2和ROOH 中的活性氧并終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能不受過氧化物的損害[37]。血漿GSH-Px 活性的升高與機(jī)體的脂質(zhì)過氧化相關(guān)，高GSH-Px 活性是機(jī)體氧化應(yīng)激的預(yù)兆。MDA 是由氧自由基引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生的過氧化物經(jīng)機(jī)體代謝后的終產(chǎn)物，可氧化細(xì)胞膜中的多不飽和脂肪酸，破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及生理完整性，其含量能反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化情況，并間接反映細(xì)胞氧化受損程度[38]。有研究表明，高能日糧（5.98 MJ/kg）更易使奶牛處于氧化應(yīng)激狀態(tài)[39]。本研究結(jié)果也表明，隨著日糧能量水平增加，湘南黃牛血液中MDA 含量顯著上升，且GSH-Px 活性顯著下降?？赡苁歉吣苋占Z使湘南黃牛處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)加劇，從而導(dǎo)致血液中MDA 含量上升，GSH-Px 活性下降，可推測(cè)育肥期湘南黃牛長(zhǎng)期飼喂高能日糧將使其抗氧能力下降。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，能量水平不是育肥期湘南黃牛蛋白質(zhì)代謝的主要影響因子；高能組育肥期湘南黃牛血液中INS、LDL、ALT、MDA 含量較低能組顯著上升，而GSH-Px 活性顯著下降?？梢?，飼喂高能日糧能促進(jìn)育肥期湘南黃牛生長(zhǎng)，而長(zhǎng)期飼喂高能日糧會(huì)導(dǎo)致其機(jī)體抗氧化能力降低。