宮汝淳，趙 楊，崔曉漫，包美茜，譚 陽，苗婷婷，何曉燕

（通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，吉林通化 134002）

近年來，隨著全球氣候的變化，高溫天氣出現(xiàn)頻率增加，熱應(yīng)激成為制約蛋雞生產(chǎn)的重要因素之一。蛋雞全身被羽且無汗腺，自身散熱困難。夏季高溫環(huán)境會引起蛋雞的生理機能發(fā)生改變，并降低其生產(chǎn)性能。如夏季高溫條件下蛋雞產(chǎn)蛋量下降，蛋重減輕，破殼率增加，并且蛋雞的死淘率增加[1]。最新研究發(fā)現(xiàn)，在雞日糧中添加植物提取物可提高高溫條件下雞的生產(chǎn)性能和機體抗氧化能力[2-4]。薄荷（Mentha haplocalyx Briq.）是傳統(tǒng)的辛涼解表中藥，味辛，性涼，具有疏風(fēng)、散熱、疏肝、辟穢、解毒、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、抗菌抗病毒及抗炎等功效[5-6]。薄荷提取物（Herba Menthae Heplocalycis）是薄荷經(jīng)水提或醇提等方法得到的產(chǎn)物，主要為1-薄荷醇（1-menthol）、1-薄荷酮（1-menthol）及薄荷酯類等抗氧化活性成分[7-8]。薄荷提取物中黃酮類物質(zhì)具有很強的抗氧化、抑菌、增強機體免疫力的作用[9]。薄荷或薄荷提取物能提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、雞蛋哈氏單位和蛋殼厚度、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率，并降低血清膽固醇水平[10-11]。然而，關(guān)于薄荷提取物對高溫時蛋雞生產(chǎn)性能的影響鮮有報道。因此，本研究旨在探討不同添加量的薄荷提取物對夏季高溫條件下蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及血液生化指標(biāo)的影響，為薄荷提取物在夏季高溫環(huán)境下蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 薄荷干粉購買于華誠中藥有限公司，參考陳智坤等[12]方法制備薄荷提取物（水提法，料液比為1:20），得到黑色浸膏狀產(chǎn)物，將其置于60℃恒溫烘箱干燥24 h 至恒重，最終產(chǎn)物為黑色固體，產(chǎn)物提取率為15.84%，所得薄荷水提物中總酚和總黃酮含量分別為（60.28±4.97）mg/g 和（0.74±0.06）mg/g。

1.2 試驗設(shè)計及日糧組成 試驗從2020 年7 月1 日—8月12 日在江蘇某養(yǎng)雞場進行。選取健康無病、體重基本一致的600 只300 日齡海蘭褐蛋雞，隨機分成4 組，每組5 個重復(fù)，每個重復(fù)30 只。對照組不添加薄荷提取物，試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物并混合均勻飼喂，預(yù)試驗7 d，正試期35 d?；A(chǔ)飼糧參照《蛋雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33-2004）和NRC（1994）《家禽營養(yǎng)需要》配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分

1.3 飼養(yǎng)管理 采取3 層階梯式籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)，由專業(yè)人員按照雞場飼養(yǎng)管理模式進行管理。蛋雞自由飲水與采食，每天06:00 和14:00 各喂料1 次，17:00 開始收集雞蛋并記錄。每天定時進行雞舍內(nèi)消毒且對糞便進行清理。每天光照16 h。在雞舍內(nèi)高于雞背部5 cm 處懸掛溫濕計，于每天08:00、14:00、20:00 記錄溫濕度，并計算溫濕度平均值。試驗期間雞舍溫濕度變化情況如圖1 所示。

圖1 試驗期內(nèi)雞舍溫濕度變

1.4 樣品采集 每天記錄產(chǎn)蛋雞蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)、投料量、破軟蛋數(shù)。在試驗期最后一天，每個重復(fù)隨機選取5 只蛋雞，從翅下靜脈采血7 mL，2 mL 置于肝素鈉抗凝管中，用于血液常規(guī)指標(biāo)檢測；5 mL 靜置后，以3 000 r/min 離心10 min，分離血清，于-80℃冰箱保存?zhèn)溆茫糜跍y定血清生化指標(biāo)[13]。

1.5 指標(biāo)測定及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能 以重復(fù)為單位記錄每天的蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)量、采食量、破軟蛋數(shù)量、死淘情況等，每天觀察蛋雞的健康狀況。

平均蛋重=每組總蛋重/每組雞蛋數(shù)

產(chǎn)蛋率=總產(chǎn)蛋個數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%

破軟蛋率=（破蛋總數(shù)+軟蛋總數(shù)）/ 產(chǎn)蛋總數(shù)×100%

日均采食量=（每天喂料量－每天剩余量）/試驗組雞數(shù)

料蛋比=日耗料量/日產(chǎn)蛋總重×100%

死淘率=死淘雞只數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%

1.5.2 蛋品質(zhì) 通過游標(biāo)卡尺分別測量雞蛋的最大縱徑和橫徑（精確到 0.02 mm）并計算蛋形指數(shù)，蛋形指數(shù)=最大縱徑/最大橫徑；采用羅氏比色扇測定蛋黃顏色；通過螺旋測微器分別測量剝離了內(nèi)膜的蛋殼銳端、鈍端和中間的厚度，計算三者平均值，即為蛋殼厚度，精確到 0.02 mm；用蛋殼強度測定儀測定蛋殼強度；選取蛋黃邊緣和濃蛋白邊緣的中間的等距離，即為蛋白高度，用蛋白高度測定儀平行測定3 次，

哈氏單位=100log（H+1.7W0.37+7.57）

其中，H 為蛋白高度（mm）；W 為蛋重（g）。

1.5.3 血液生化指標(biāo) 總蛋白（TP）、球蛋白（GLOB）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（CHO）等血液生化指標(biāo)均采用青島宏森生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒進行測定；葡萄糖（GLU）根據(jù)葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定，采用浙江榮康生物科技有限公司所生產(chǎn)的試劑盒。超氧化物歧化酶（SOD）用黃嘌呤氧化酶法測定；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）用還原型谷胱甘肽消化法測定；丙二醛（MDA）用硫代巴比妥酸法測定；過氧化物酶（CAT）采用比色法測定；總抗氧化能力（T-AOC）用比色法測定，以上血清抗氧化指標(biāo)的測定試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，按照試劑盒說明進行操作。

1.6 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2007 處理及SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行方差分析，用Duncan's 法進行多重比較，試驗結(jié)果采用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。當(dāng)P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 薄荷提取物對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 所示，與對照組相比，200 mg/kg 和400 mg/kg 薄荷提取物組蛋雞的產(chǎn)蛋率和日均采食量顯著升高，破軟蛋率、料蛋比和死淘率均顯著降低。而各組蛋雞的平均蛋重之間差異不顯著。

表2 薄荷提取物對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 薄荷提取物對蛋雞蛋品質(zhì)的影響 由表3 所示，薄荷提取物組的蛋形指數(shù)和蛋黃顏色與對照組無顯著差異；日糧中添加薄荷提取物顯著增加了蛋殼厚度和蛋殼強度，其中3 個薄荷提取物組間的蛋殼強度均無顯著差異；與對照組相比，薄荷提取物組的哈氏單位顯著增加。

表3 薄荷提取物對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 薄荷提取物對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響 由表4 所示，與對照組相比，薄荷提取物組TP 和GLOB 均極顯著升高，TG、CHO 均顯著降低，其中400 mg/kg 薄荷提取物組最低。而各組間ALB 和CLU 無顯著性差異。

表4 薄荷提取物對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

由表5 所示，與對照組相比，試驗組SOD、GSHPx 和T-AOC 均極顯著升高，400 mg/kg 薄荷提取物組CAT 顯著升高。隨著薄荷提取物添加量提高，MDA 極顯著下降，且3 個薄荷提取物組間均差異極顯著。

表5 薄荷提取物對蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 薄荷提取物對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 當(dāng)雞舍內(nèi)溫度≥27℃時，雞群將面臨熱應(yīng)激的危害[14]?，F(xiàn)代雞舍一般采用濕簾降溫，但降溫效果有限，夏季雞舍內(nèi)溫度依然偏高，從而導(dǎo)致雞舍內(nèi)蛋雞出現(xiàn)熱應(yīng)激，減少蛋雞的食物攝入量和增加蛋雞熱負荷，進而影響蛋雞的產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)[15]。本研究試驗期間，雞舍內(nèi)平均溫度27～34℃，濕度為 42%～82%，超過蛋雞產(chǎn)蛋期的最適溫度和濕度，雞舍內(nèi)蛋雞存在一定的高溫應(yīng)激現(xiàn)象。高溫會降低蛋雞的產(chǎn)蛋量、蛋質(zhì)量和采食量[16]，腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力下降。夏季高溫環(huán)境導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)蛋量降低可能是采食量降低，進而減少了可用于產(chǎn)蛋的養(yǎng)分。此外，高溫環(huán)境也會引起動物機體腸道損傷，從而降低腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。薄荷中含有豐富的多酚類和黃酮類等抗氧化性物質(zhì)[17]，這些抗氧化物質(zhì)可有效緩解高溫環(huán)境對蛋雞帶來的負面影響，提高蛋雞產(chǎn)蛋性能。Abdel-Wareth 等[11]報道，蛋雞日糧中添加薄荷提取物可顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋量、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率。本研究中，在蛋雞基礎(chǔ)日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物顯著提高了蛋雞產(chǎn)蛋率，降低了蛋雞的死淘率、破軟蛋率和料蛋比，但對蛋雞采食量無顯著影響。

3.2 薄荷提取物對蛋雞蛋品質(zhì)的影響 雞蛋蛋品質(zhì)評定指標(biāo)主要包括蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、蛋殼厚度、蛋殼強度、哈氏單位等。其中，蛋殼厚度和蛋殼強度是評價蛋殼質(zhì)量的主要指標(biāo)，蛋殼厚度主要與日糧中鈣、磷等礦物元素相關(guān)，鈣是構(gòu)成蛋殼的主要物質(zhì)，而磷影響蛋殼的彈性及韌性[18]。蛋殼質(zhì)量的好壞與雞蛋破損率相關(guān)[19]。本研究結(jié)果表明，與對照組相比蛋殼厚度和強度顯著增加，說明薄荷提取物對改善蛋殼質(zhì)量有明顯效果。研究表明，熱應(yīng)激會導(dǎo)致動物腸道損傷，影響腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的利用[20]。當(dāng)在蛋雞日糧中添加薄荷提取物后，緩解了熱應(yīng)激，提高了腸道對鈣磷的消化吸收，從而改善了熱應(yīng)激蛋雞的蛋殼質(zhì)量。蛋黃顏色是評價雞蛋品質(zhì)的重要感官指標(biāo)之一。本試驗中，在日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物對蛋黃顏色沒有顯著影響，可能是高溫環(huán)境下蛋雞生理狀態(tài)發(fā)生了變化，而薄荷提取物不能影響高溫環(huán)境下蛋雞對飼料中色素物質(zhì)的吸收和沉積，因而各組蛋黃顏色之間無差異性。蛋形指數(shù)直接關(guān)系到種蛋價值、破蛋率和孵化率。本研究中，與對照組相比，薄荷提取物對蛋形指數(shù)無顯著影響。哈氏單位是衡量雞蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)，在一定程度上可以反映蛋白質(zhì)量。本試驗中，各試驗組雞蛋哈氏單位均顯著提高，這表明薄荷提取物可以改善熱應(yīng)激蛋雞的蛋品質(zhì)。

3.3 薄荷提取物對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響 生化血液參數(shù)通常可反映動物的健康，是鳥類和哺乳動物營養(yǎng)和生理狀況的重要指標(biāo)[21]。夏季高溫會引起蛋雞熱應(yīng)激，導(dǎo)致細胞中過量的不飽和脂肪酸氧化，產(chǎn)生過量的脂質(zhì)過氧化物，將過量的脂肪轉(zhuǎn)化為TG，導(dǎo)致血清中TG含量升高[22]。熱應(yīng)激也會阻礙CHO 的代謝和排泄途徑，導(dǎo)致血清CHO 濃度增加。本研究中，添加薄荷提取物顯著降低了蛋雞血液中TG 和CHO 含量，表明薄荷提取物可在一定程度上改善高溫環(huán)境導(dǎo)致的蛋雞機體脂質(zhì)代謝紊亂。此外，日糧中添加薄荷提取物也提高了夏季高溫環(huán)境蛋雞血液中TP 和GLOB 水平，但對血糖水平無影響。這是因為血糖水平通常與蛋雞的采食量具有一定的正相關(guān)性[23]，而本研究中添加薄荷提取物并未提高蛋雞的采食量。

SOD、GSH-Px 和CAT 是機體內(nèi)重要的抗氧化應(yīng)激酶。夏季高溫導(dǎo)致家禽處于熱應(yīng)激狀態(tài)，并降低家禽機體內(nèi)抗氧化酶活性，從而改變活性氧的產(chǎn)生與抗氧化酶系統(tǒng)之間的平衡，引起脂質(zhì)過氧化，進而導(dǎo)致機體氧化損傷[24]。MDA 是生物體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)物，會引起生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，血清中MDA 的含量可直觀反映機體氧化應(yīng)激水平[25]。在本試驗條件下，薄荷提取物顯著提高了蛋雞血清中SOD、CAT、GSH-Px 和T-AOC 活性，降低了血清中MDA 含量，表明薄荷提取物對機體抗氧化具有積極作用。體外研究也表明，薄荷提取物具有很強的抗氧化能力和自由基清除能力[5,17]。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，在日糧中添加薄荷提取物可以緩解夏季高溫對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)帶來的負面影響，提高蛋雞生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)，增強抗氧化、清除自由基作用，對蛋雞血液生化指標(biāo)均有不同程度改善。在日糧中添加400 mg/kg 薄荷提取物效果最好，更高劑量的薄荷提取物對蛋雞生產(chǎn)的影響還有待進一步研究。