宮汝淳，趙 楊，崔曉漫，包美茜，譚 陽(yáng)，苗婷婷，何曉燕

（通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，吉林通化 134002）

近年來(lái)，隨著全球氣候的變化，高溫天氣出現(xiàn)頻率增加，熱應(yīng)激成為制約蛋雞生產(chǎn)的重要因素之一。蛋雞全身被羽且無(wú)汗腺，自身散熱困難。夏季高溫環(huán)境會(huì)引起蛋雞的生理機(jī)能發(fā)生改變，并降低其生產(chǎn)性能。如夏季高溫條件下蛋雞產(chǎn)蛋量下降，蛋重減輕，破殼率增加，并且蛋雞的死淘率增加[1]。最新研究發(fā)現(xiàn)，在雞日糧中添加植物提取物可提高高溫條件下雞的生產(chǎn)性能和機(jī)體抗氧化能力[2-4]。薄荷（Mentha haplocalyx Briq.）是傳統(tǒng)的辛涼解表中藥，味辛，性涼，具有疏風(fēng)、散熱、疏肝、辟穢、解毒、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、抗菌抗病毒及抗炎等功效[5-6]。薄荷提取物（Herba Menthae Heplocalycis）是薄荷經(jīng)水提或醇提等方法得到的產(chǎn)物，主要為1-薄荷醇（1-menthol）、1-薄荷酮（1-menthol）及薄荷酯類等抗氧化活性成分[7-8]。薄荷提取物中黃酮類物質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化、抑菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用[9]。薄荷或薄荷提取物能提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、雞蛋哈氏單位和蛋殼厚度、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率，并降低血清膽固醇水平[10-11]。然而，關(guān)于薄荷提取物對(duì)高溫時(shí)蛋雞生產(chǎn)性能的影響鮮有報(bào)道。因此，本研究旨在探討不同添加量的薄荷提取物對(duì)夏季高溫條件下蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及血液生化指標(biāo)的影響，為薄荷提取物在夏季高溫環(huán)境下蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 薄荷干粉購(gòu)買于華誠(chéng)中藥有限公司，參考陳智坤等[12]方法制備薄荷提取物（水提法，料液比為1:20），得到黑色浸膏狀產(chǎn)物，將其置于60℃恒溫烘箱干燥24 h 至恒重，最終產(chǎn)物為黑色固體，產(chǎn)物提取率為15.84%，所得薄荷水提物中總酚和總黃酮含量分別為（60.28±4.97）mg/g 和（0.74±0.06）mg/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧組成 試驗(yàn)從2020 年7 月1 日—8月12 日在江蘇某養(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行。選取健康無(wú)病、體重基本一致的600 只300 日齡海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分成4 組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30 只。對(duì)照組不添加薄荷提取物，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物并混合均勻飼喂，預(yù)試驗(yàn)7 d，正試期35 d?；A(chǔ)飼糧參照《蛋雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33-2004）和NRC（1994）《家禽營(yíng)養(yǎng)需要》配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.3 飼養(yǎng)管理 采取3 層階梯式籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)，由專業(yè)人員按照雞場(chǎng)飼養(yǎng)管理模式進(jìn)行管理。蛋雞自由飲水與采食，每天06:00 和14:00 各喂料1 次，17:00 開始收集雞蛋并記錄。每天定時(shí)進(jìn)行雞舍內(nèi)消毒且對(duì)糞便進(jìn)行清理。每天光照16 h。在雞舍內(nèi)高于雞背部5 cm 處懸掛溫濕計(jì)，于每天08:00、14:00、20:00 記錄溫濕度，并計(jì)算溫濕度平均值。試驗(yàn)期間雞舍溫濕度變化情況如圖1 所示。

圖1 試驗(yàn)期內(nèi)雞舍溫濕度變

1.4 樣品采集 每天記錄產(chǎn)蛋雞蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)、投料量、破軟蛋數(shù)。在試驗(yàn)期最后一天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取5 只蛋雞，從翅下靜脈采血7 mL，2 mL 置于肝素鈉抗凝管中，用于血液常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)；5 mL 靜置后，以3 000 r/min 離心10 min，分離血清，于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?，用于測(cè)定血清生化指標(biāo)[13]。

1.5 指標(biāo)測(cè)定及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能 以重復(fù)為單位記錄每天的蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)量、采食量、破軟蛋數(shù)量、死淘情況等，每天觀察蛋雞的健康狀況。

平均蛋重=每組總蛋重/每組雞蛋數(shù)

產(chǎn)蛋率=總產(chǎn)蛋個(gè)數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%

破軟蛋率=（破蛋總數(shù)+軟蛋總數(shù)）/ 產(chǎn)蛋總數(shù)×100%

日均采食量=（每天喂料量－每天剩余量）/試驗(yàn)組雞數(shù)

料蛋比=日耗料量/日產(chǎn)蛋總重×100%

死淘率=死淘雞只數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%

1.5.2 蛋品質(zhì) 通過(guò)游標(biāo)卡尺分別測(cè)量雞蛋的最大縱徑和橫徑（精確到 0.02 mm）并計(jì)算蛋形指數(shù)，蛋形指數(shù)=最大縱徑/最大橫徑；采用羅氏比色扇測(cè)定蛋黃顏色；通過(guò)螺旋測(cè)微器分別測(cè)量剝離了內(nèi)膜的蛋殼銳端、鈍端和中間的厚度，計(jì)算三者平均值，即為蛋殼厚度，精確到 0.02 mm；用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀測(cè)定蛋殼強(qiáng)度；選取蛋黃邊緣和濃蛋白邊緣的中間的等距離，即為蛋白高度，用蛋白高度測(cè)定儀平行測(cè)定3 次，

哈氏單位=100log（H+1.7W0.37+7.57）

其中，H 為蛋白高度（mm）；W 為蛋重（g）。

1.5.3 血液生化指標(biāo) 總蛋白（TP）、球蛋白（GLOB）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（CHO）等血液生化指標(biāo)均采用青島宏森生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定；葡萄糖（GLU）根據(jù)葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法測(cè)定，采用浙江榮康生物科技有限公司所生產(chǎn)的試劑盒。超氧化物歧化酶（SOD）用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）用還原型谷胱甘肽消化法測(cè)定；丙二醛（MDA）用硫代巴比妥酸法測(cè)定；過(guò)氧化物酶（CAT）采用比色法測(cè)定；總抗氧化能力（T-AOC）用比色法測(cè)定，以上血清抗氧化指標(biāo)的測(cè)定試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007 處理及SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，用Duncan's 法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果采用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。當(dāng)P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 薄荷提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 所示，與對(duì)照組相比，200 mg/kg 和400 mg/kg 薄荷提取物組蛋雞的產(chǎn)蛋率和日均采食量顯著升高，破軟蛋率、料蛋比和死淘率均顯著降低。而各組蛋雞的平均蛋重之間差異不顯著。

表2 薄荷提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 薄荷提取物對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 由表3 所示，薄荷提取物組的蛋形指數(shù)和蛋黃顏色與對(duì)照組無(wú)顯著差異；日糧中添加薄荷提取物顯著增加了蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度，其中3 個(gè)薄荷提取物組間的蛋殼強(qiáng)度均無(wú)顯著差異；與對(duì)照組相比，薄荷提取物組的哈氏單位顯著增加。

表3 薄荷提取物對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 薄荷提取物對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響 由表4 所示，與對(duì)照組相比，薄荷提取物組TP 和GLOB 均極顯著升高，TG、CHO 均顯著降低，其中400 mg/kg 薄荷提取物組最低。而各組間ALB 和CLU 無(wú)顯著性差異。

表4 薄荷提取物對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

由表5 所示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組SOD、GSHPx 和T-AOC 均極顯著升高，400 mg/kg 薄荷提取物組CAT 顯著升高。隨著薄荷提取物添加量提高，MDA 極顯著下降，且3 個(gè)薄荷提取物組間均差異極顯著。

表5 薄荷提取物對(duì)蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 薄荷提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 當(dāng)雞舍內(nèi)溫度≥27℃時(shí)，雞群將面臨熱應(yīng)激的危害[14]?，F(xiàn)代雞舍一般采用濕簾降溫，但降溫效果有限，夏季雞舍內(nèi)溫度依然偏高，從而導(dǎo)致雞舍內(nèi)蛋雞出現(xiàn)熱應(yīng)激，減少蛋雞的食物攝入量和增加蛋雞熱負(fù)荷，進(jìn)而影響蛋雞的產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)[15]。本研究試驗(yàn)期間，雞舍內(nèi)平均溫度27～34℃，濕度為 42%～82%，超過(guò)蛋雞產(chǎn)蛋期的最適溫度和濕度，雞舍內(nèi)蛋雞存在一定的高溫應(yīng)激現(xiàn)象。高溫會(huì)降低蛋雞的產(chǎn)蛋量、蛋質(zhì)量和采食量[16]，腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力下降。夏季高溫環(huán)境導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)蛋量降低可能是采食量降低，進(jìn)而減少了可用于產(chǎn)蛋的養(yǎng)分。此外，高溫環(huán)境也會(huì)引起動(dòng)物機(jī)體腸道損傷，從而降低腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。薄荷中含有豐富的多酚類和黃酮類等抗氧化性物質(zhì)[17]，這些抗氧化物質(zhì)可有效緩解高溫環(huán)境對(duì)蛋雞帶來(lái)的負(fù)面影響，提高蛋雞產(chǎn)蛋性能。Abdel-Wareth 等[11]報(bào)道，蛋雞日糧中添加薄荷提取物可顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋量、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率。本研究中，在蛋雞基礎(chǔ)日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物顯著提高了蛋雞產(chǎn)蛋率，降低了蛋雞的死淘率、破軟蛋率和料蛋比，但對(duì)蛋雞采食量無(wú)顯著影響。

3.2 薄荷提取物對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 雞蛋蛋品質(zhì)評(píng)定指標(biāo)主要包括蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、哈氏單位等。其中，蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度是評(píng)價(jià)蛋殼質(zhì)量的主要指標(biāo)，蛋殼厚度主要與日糧中鈣、磷等礦物元素相關(guān)，鈣是構(gòu)成蛋殼的主要物質(zhì)，而磷影響蛋殼的彈性及韌性[18]。蛋殼質(zhì)量的好壞與雞蛋破損率相關(guān)[19]。本研究結(jié)果表明，與對(duì)照組相比蛋殼厚度和強(qiáng)度顯著增加，說(shuō)明薄荷提取物對(duì)改善蛋殼質(zhì)量有明顯效果。研究表明，熱應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物腸道損傷，影響腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用[20]。當(dāng)在蛋雞日糧中添加薄荷提取物后，緩解了熱應(yīng)激，提高了腸道對(duì)鈣磷的消化吸收，從而改善了熱應(yīng)激蛋雞的蛋殼質(zhì)量。蛋黃顏色是評(píng)價(jià)雞蛋品質(zhì)的重要感官指標(biāo)之一。本試驗(yàn)中，在日糧中分別添加100、200、400 mg/kg 薄荷提取物對(duì)蛋黃顏色沒有顯著影響，可能是高溫環(huán)境下蛋雞生理狀態(tài)發(fā)生了變化，而薄荷提取物不能影響高溫環(huán)境下蛋雞對(duì)飼料中色素物質(zhì)的吸收和沉積，因而各組蛋黃顏色之間無(wú)差異性。蛋形指數(shù)直接關(guān)系到種蛋價(jià)值、破蛋率和孵化率。本研究中，與對(duì)照組相比，薄荷提取物對(duì)蛋形指數(shù)無(wú)顯著影響。哈氏單位是衡量雞蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)，在一定程度上可以反映蛋白質(zhì)量。本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組雞蛋哈氏單位均顯著提高，這表明薄荷提取物可以改善熱應(yīng)激蛋雞的蛋品質(zhì)。

3.3 薄荷提取物對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響 生化血液參數(shù)通常可反映動(dòng)物的健康，是鳥類和哺乳動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)和生理狀況的重要指標(biāo)[21]。夏季高溫會(huì)引起蛋雞熱應(yīng)激，導(dǎo)致細(xì)胞中過(guò)量的不飽和脂肪酸氧化，產(chǎn)生過(guò)量的脂質(zhì)過(guò)氧化物，將過(guò)量的脂肪轉(zhuǎn)化為TG，導(dǎo)致血清中TG含量升高[22]。熱應(yīng)激也會(huì)阻礙CHO 的代謝和排泄途徑，導(dǎo)致血清CHO 濃度增加。本研究中，添加薄荷提取物顯著降低了蛋雞血液中TG 和CHO 含量，表明薄荷提取物可在一定程度上改善高溫環(huán)境導(dǎo)致的蛋雞機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂。此外，日糧中添加薄荷提取物也提高了夏季高溫環(huán)境蛋雞血液中TP 和GLOB 水平，但對(duì)血糖水平無(wú)影響。這是因?yàn)檠撬酵ǔＥc蛋雞的采食量具有一定的正相關(guān)性[23]，而本研究中添加薄荷提取物并未提高蛋雞的采食量。

SOD、GSH-Px 和CAT 是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化應(yīng)激酶。夏季高溫導(dǎo)致家禽處于熱應(yīng)激狀態(tài)，并降低家禽機(jī)體內(nèi)抗氧化酶活性，從而改變活性氧的產(chǎn)生與抗氧化酶系統(tǒng)之間的平衡，引起脂質(zhì)過(guò)氧化，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體氧化損傷[24]。MDA 是生物體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)產(chǎn)物，會(huì)引起生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，血清中MDA 的含量可直觀反映機(jī)體氧化應(yīng)激水平[25]。在本試驗(yàn)條件下，薄荷提取物顯著提高了蛋雞血清中SOD、CAT、GSH-Px 和T-AOC 活性，降低了血清中MDA 含量，表明薄荷提取物對(duì)機(jī)體抗氧化具有積極作用。體外研究也表明，薄荷提取物具有很強(qiáng)的抗氧化能力和自由基清除能力[5,17]。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，在日糧中添加薄荷提取物可以緩解夏季高溫對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)帶來(lái)的負(fù)面影響，提高蛋雞生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)，增強(qiáng)抗氧化、清除自由基作用，對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)均有不同程度改善。在日糧中添加400 mg/kg 薄荷提取物效果最好，更高劑量的薄荷提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)的影響還有待進(jìn)一步研究。