郭曉輝，鄭會(huì)超，姜俊芳，鄭開(kāi)之，吳建良，黃 新，江 洪，蔣永清*

（1.浙江師范大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，浙江金華 321004；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，浙江杭州 310021；3.金華市一康農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，浙江金華 321071）

維生素是生物體內(nèi)重要的微量營(yíng)養(yǎng)素，對(duì)機(jī)體的繁殖性能、生產(chǎn)性能以及免疫功能具有非常重要的作用。犢牛代乳粉、開(kāi)食料中往往額外添加脂溶性維生素[1]。B 族維生素是水溶性維生素，一般認(rèn)為，即使日糧中不含B 族維生素，反芻動(dòng)物也可以通過(guò)瘤胃合成B 族維生素，除煙酸外均能滿足自身的需求[2]。近年來(lái)研究表明，在奶牛日糧中添加維生素B3和膽堿可以提高產(chǎn)奶量和乳脂率，日糧中添加維生素B1具有增加產(chǎn)奶量和乳成分含量的趨勢(shì)[3-5]。當(dāng)犢牛缺乏維生素B1時(shí)，表現(xiàn)為食欲下降、腹瀉、脫水、痙攣，嚴(yán)重者會(huì)在12～72 h死亡[6]。飼料中添加一定量的維生素B12能改善犢牛的采食量，提高日增重，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育[7]。由此推測(cè)，處于特殊生理階段或環(huán)境應(yīng)激的反芻動(dòng)物瘤胃中合成的B族維生素不能滿足自身的營(yíng)養(yǎng)需求。

犢牛出生時(shí)瘤胃的生理和發(fā)酵功能尚未發(fā)育，主要依賴牛奶滿足維持和生長(zhǎng)需要，待瘤胃發(fā)育成熟時(shí)全部依賴固體飼料維持生長(zhǎng)，為成年后的泌乳性能奠定基礎(chǔ)[8]。關(guān)于日糧中補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛生長(zhǎng)發(fā)育影響的研究較少。本研究擬觀測(cè)復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能和血液指標(biāo)的影響，旨在探討犢牛補(bǔ)飼B 族維生素的必要性。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 復(fù)合B 族維生素（商品名：奶維多），由江蘇佳谷生物科技有限公司提供。具體成分：維生素B1≥2 400 mg/L，維生素B2≥1 200 mg/L，維生素B6≥1 800 mg/L，維生素B12≥5 mg/L，維生素≥9 mg/L，煙酰胺≥6 000 mg/L。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選用日齡（3±2）d、體重（41.7±4.0）kg的30 頭健康中國(guó)荷斯坦母犢，隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組。日糧組成為代乳粉、開(kāi)食料和燕麥草，營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。代乳粉由乳清粉、植物油、植物蛋白、右旋糖及淀粉、碳酸鈣和預(yù)混合飼料組成。開(kāi)食料由玉米、豆粕、糖蜜、石粉、磷酸氫鈣、小蘇打及預(yù)混料配合而成，壓制為直徑4 mm、長(zhǎng)10 mm 左右的圓柱形顆粒。試驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素，每天每頭10 mL，分早、晚2 次添加到稀釋后的代乳粉中，斷奶前1 周每天1 次。試驗(yàn)于2019 年10 月—12 月在浙江省金華市一康農(nóng)業(yè)有限公司進(jìn)行。

表1 日糧營(yíng)養(yǎng)成分與能量水平

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)犢牛出生后至試驗(yàn)開(kāi)始前在犢牛欄隔離飼養(yǎng)，等量飼喂初乳。試驗(yàn)期間對(duì)照組和試驗(yàn)組分2 欄飼養(yǎng)，早、中、晚3 次飼喂，每頭牛每天飼喂代乳粉750 g，飼喂時(shí)將代乳粉加入45～50℃溫水中，充分混合攪拌后喂給犢牛。斷奶前1 周，代乳粉從日喂3 次逐步過(guò)渡到2 次、1 次和0 次。2 周齡后開(kāi)始采食開(kāi)食料，1 月齡后在此基礎(chǔ)上補(bǔ)飼燕麥草，自由飲水。觀測(cè)記錄試驗(yàn)犢牛健康發(fā)病情況，直至70 日齡斷奶試驗(yàn)結(jié)束。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.4.1 體尺體重指標(biāo) 試驗(yàn)期間，于試驗(yàn)開(kāi)始（4 日齡）、試驗(yàn)中期（32 日齡）和試驗(yàn)結(jié)束（70 日齡）晨飼前空腹稱量每頭犢牛的體重，測(cè)量體斜長(zhǎng)、體高、胸圍。

1.4.2 血液指標(biāo) 每個(gè)處理隨機(jī)選取6 頭犢牛，于4、32、70 d 晨飼前空腹采集試驗(yàn)牛頸靜脈血，每頭每次2管，1 管氟化鈉抗凝劑用于測(cè)定血糖（GLU）、血漿總蛋白（TP）、白蛋白（ALB），球蛋白（GLO）含量=TP 含量－ALB 含量，白球比=ALB 含量/GLO 含量。1 管EDTA 二鈉抗凝劑用于測(cè)定尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）。采集的血液迅速送到實(shí)驗(yàn)室，3 500 r/min低溫離心8 min，分離血漿，凍存。采用日立7160 全自動(dòng)生化儀測(cè)定血漿中GLU、BUN 和TG 含量，相應(yīng)試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.4.3 糞便指標(biāo) 于32 d 和70 d 晨飼前人工刺激犢牛直腸末端收集糞便，60℃鼓風(fēng)烘干48 h，根據(jù)烘干前后的重量比計(jì)算含水率，風(fēng)干糞樣粉碎后測(cè)定淀粉含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016 整理后用SPSS 21.0 進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。以P＜0.05 作為差異顯著依據(jù)，P＜0.01 作為差異極顯著依據(jù)，以0.05≤P＜0.1 作為趨勢(shì)分析依據(jù)，P≥0.10 代表差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛體尺體重的影響 所有犢牛試驗(yàn)期間健康良好，無(wú)發(fā)病和診療記錄。由表2 可見(jiàn)，4 日齡和70 日齡時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組體重差異不顯著；32 日齡時(shí)，試驗(yàn)組體重與對(duì)照組相比有增加的趨勢(shì)（P=0.092）。試驗(yàn)組犢牛4～32 日齡日增重較對(duì)照組提高28.7%（P＜0.05），33～70、4～70 日齡，試驗(yàn)組與對(duì)照組日增重差異不顯著。

表2 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛體尺體重的影響

32 日齡時(shí)，試驗(yàn)組胸圍與對(duì)照組相比有增加的趨勢(shì)（P=0.078）；70 日齡時(shí)，試驗(yàn)組胸圍較對(duì)照組提高2.7%（P＜0.05）；4～32 日齡，試驗(yàn)組犢牛胸圍變化速率比對(duì)照組提高33.3%（P＜0.01），33～70 日齡，胸圍變化速率與對(duì)照組差異不顯著。試驗(yàn)期間2 個(gè)處理組體斜長(zhǎng)和體高差異不顯著。

2.2 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛血漿指標(biāo)的影響 由表3 可知，4 日齡時(shí)2 個(gè)處理組TP、ALB 和GLO 含量差異不顯著（P＞0.10）；32 日齡時(shí)，2 個(gè)處理組TP 含量差異不顯著（P＞0.10），試驗(yàn)組ALB 含量比對(duì)照組提高9.8%（P＜0.05），白球比極顯著增加（P＜0.01）；70日齡時(shí)，試驗(yàn)組TP 含量比對(duì)照組提高3.5%（P=0.070），2 個(gè)處理組白球比差異不顯著（P＞0.10）。試驗(yàn)期間對(duì)照組和試驗(yàn)組的GLU、TG 和BUN 含量差異不顯著（P＞0.10）。

表3 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛血漿指標(biāo)的影響

2.3 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 由表4 可知，32 日齡時(shí)，試驗(yàn)組糞便淀粉含量較對(duì)照組有增加的趨勢(shì)（P=0.066），試驗(yàn)組含水量與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.10）；70 日齡時(shí)，試驗(yàn)組糞便含水率和淀粉含量與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.10）。

表4 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 %

3 討 論

3.1 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素可以顯著促進(jìn)4～32 日齡犢牛胸圍發(fā)育和增重，而對(duì)33～70 日齡犢牛生長(zhǎng)發(fā)育影響不顯著。李雙等[9]研究表明，在犢牛日糧中添加維生素、氨基酸、酶制劑、益生菌等組成的營(yíng)養(yǎng)平衡劑可以顯著提高犢牛哺乳期日增重和胸圍變化率，與本研究結(jié)果接近。這可能是因?yàn)? 月齡前犢牛瘤胃環(huán)境處于發(fā)育早期，不能產(chǎn)生足夠的B 族維生素來(lái)輔助自身碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪的代謝，隨著時(shí)間的推移，1 月齡后犢牛瘤胃功能逐步發(fā)育完善[10]，合成的維生素能滿足自身的需要。維生素B1在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)磷酸化等一系列修飾后和多種催化酶的作用密切相關(guān)。維生素B2可以在動(dòng)物體內(nèi)與ATP 相互作用轉(zhuǎn)化為核黃素5'-磷酸，再經(jīng)ATP 的磷酸化成為黃素腺嘌呤二核苷酸，作為多種酶的輔酶，具有生理活性，并在代謝中發(fā)揮重要作用。B 族維生素中的葉酸、泛酸以及吡哆醇分別通過(guò)一碳單位的轉(zhuǎn)移、輔酶A 或?；d體蛋白和輔酶的形式參與機(jī)體碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪的代謝。瘤胃中 B族維生素主要來(lái)源于 2 個(gè)途徑，一是飼料原料在瘤胃中經(jīng)過(guò)微生物的降解和酶作用后釋放，二是瘤胃微生物合成。瘤胃中B 族維生素的合成受飼料種類、營(yíng)養(yǎng)成分、采食量及微生物等多種因素影響[11]，哺乳期犢牛瘤胃發(fā)育過(guò)程中合成、吸收、利用B 族維生素方面研究較少，B 族維生素適宜補(bǔ)飼量有待進(jìn)一步研究。

3.2 補(bǔ)飼日糧中添加復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛血漿指標(biāo)的影響 GLU 的主要來(lái)源是飼料中的糖類物質(zhì)被降解成單糖進(jìn)入血液，并通過(guò)神經(jīng)和激素調(diào)節(jié)維持GLU 濃度的恒定，以滿足機(jī)體對(duì)GLU 的需要量。血液中的TG是被儲(chǔ)藏起來(lái)的能量源，來(lái)自食物的分解吸收和肝細(xì)胞的合成。Stanley 等[12]研究表明，血漿BUN 濃度可以反映動(dòng)物體內(nèi)可消化蛋白質(zhì)的利用率和飼糧中氨基酸的平衡狀況。本研究中，2 組犢牛GLU、TG 和BUN 濃度差異均不顯著，表明補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)糖類等主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝影響不大。血清ALB 作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的載體，具有維持血漿滲透壓、提供機(jī)體蛋白質(zhì)等功能；血漿GLO 反映機(jī)體的免疫能力。動(dòng)物體氨基酸攝入不足或吸收發(fā)生障礙時(shí)可以影響血漿ALB 含量[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素可以顯著提高32 日齡犢牛血漿ALB 含量和白球比，表明試驗(yàn)組犢牛攝入的營(yíng)養(yǎng)用于生長(zhǎng)的比例較對(duì)照組多，這可能是試驗(yàn)組哺乳前期生長(zhǎng)性能高于對(duì)照組的原因。

3.3 補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 犢牛哺乳期間消化酶活性較低，尤其是淀粉酶，犢牛初生時(shí)胰淀粉酶活性很低，之后隨日齡增長(zhǎng)而增高，故犢牛對(duì)飼料淀粉的消化率較低。糞便含水率和淀粉含量在一定程度上可以反映奶牛的腸道健康狀況，腹瀉或消化不良的犢牛糞便含水率和淀粉含量往往偏高[14]。泌乳牛糞便淀粉含量大于5%，提示腸道發(fā)生炎癥[15]。本研究中，2 組犢牛糞便含水率和淀粉含量無(wú)顯著差異，且在正常范圍，表明試驗(yàn)犢牛胃腸道發(fā)育正常，補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素對(duì)犢牛消化性能影響不大。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，哺乳犢牛補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素可顯著促進(jìn)出生至1 月齡犢牛的胸圍發(fā)育和體重增長(zhǎng)；補(bǔ)飼復(fù)合B 族維生素具有提高犢牛斷奶時(shí)血漿TP 水平的趨勢(shì)，可顯著或極顯著增加1 月齡犢牛血漿ALB 水平和白球比。綜上，建議哺乳犢牛1 月齡內(nèi)補(bǔ)飼復(fù)合B族維生素，適宜補(bǔ)飼量有待進(jìn)一步研究。