李 賢，符悅冠，陳俊諭，王建贇，朱俊洪，張方平*

（1.海南大學植物保護學院，?？?570228；2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所，海口 571101）

橡副珠蠟蚧ParasaissetianigraNietner是橡膠樹上的一種重要害蟲。自2004年以來，該蟲相繼在云南及海南暴發(fā)成災，并對生產(chǎn)造成巨大損失[1]。目前，該蟲仍是海南苗圃的重要害蟲之一。隨著人們對生態(tài)安全的要求越來越高，綠色防控技術(shù)在害蟲防治中的作用日益突顯。天敵昆蟲作為綠色防控的重要組成部分，長期以來在介殼蟲的防治上發(fā)揮著重要作用[2]。自橡副珠蠟蚧在國內(nèi)暴發(fā)以來，多位學者對其開展了天敵資源調(diào)查及防控技術(shù)的研究，并發(fā)現(xiàn)了日本食蚧蚜小蜂CoccophagusjaponicusCompere、副珠蠟蚧闊柄跳小蜂MetaphycusparasaissetiaeZhang and Huang、優(yōu)雅岐脈跳小蜂DiversinervuselegansSilvestri和藍色長盾金盾金小蜂ScutellistacaeruleaFonscolombe等優(yōu)勢天敵[3-6]，它們在該蟲的防控上起著重要作用。

日本食蚧蚜小蜂，屬膜翅目Hymenoptera，小蜂總科Chalcidoidea，蚜小蜂科Aphelinidae食蚧蚜小蜂屬Coccophagus[7]。該蜂是橡副珠蠟蚧的一種跨期內(nèi)寄生蜂[8]，能寄生2齡若蟲至褐色成蟲在內(nèi)的所有蟲態(tài)，并偏好寄生 3齡若蟲至褐色期成蟲[9]。藍色長盾金小蜂ScutellistacaeruleaFonscolombe，屬膜翅目Hymenoptera，小蜂總科 Chalcidoidea，金小蜂科 Pteromalidae[10]，該蜂是一種外寄生蜂，將卵產(chǎn)在寄主的腹面，以寄主產(chǎn)在腹下的卵為食[11]，且只寄生橡副珠蠟蚧成蟲[6]。目前，國外未見關(guān)于日本食蚧蚜小蜂的研究，國內(nèi)報道了日本食蚧蚜小蜂生物學及擴繁技術(shù)方面的相關(guān)研究，明確了該寄生蜂的寄生行為、適應的寄主齡期及對橡副珠蠟蚧控害能力等[3,8,9,12,13]。對于藍色長盾金小蜂的報道多以其分布范圍和寄主種類[14,15]和生物學習性為主[6]。

利用寄生蜂對寄主害蟲進行田間防控時，其防治效果會受到許多因素的影響。其中，溫度[16-20]、寄主齡期[21-24]、放蜂比例[25,26]是重要的3個影響因子。Hackett-Jones等[27]基于離散-時間模型，得出了利用不同寄生蜂之間的不同生態(tài)位，同時釋放兩種寄生蜂可以將同一種害蟲的種群密度在較長時間內(nèi)控制在一個合適的平衡點的結(jié)論。為探明日本食蚧蚜小蜂與藍色長盾金小蜂在同一生態(tài)系統(tǒng)中共同釋放后是否會增強二者對橡副珠蠟蚧的控制效率，并明確寄主齡期、兩種蜂的釋放比例以及釋放時的溫度對控制效果的影響，筆者在室內(nèi)進行了3因子5水平，即寄主齡期（若蚧＋成蚧）、寄生蜂比例（蚜小蜂＋金小蜂）、溫度的正交試驗，以期找到合理的放蜂溫度、寄主齡期、寄生蜂比例組合并明確這3個因子的主次關(guān)系，為兩種蜂大田聯(lián)合釋放提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

橡副珠蠟蚧：于云南省熱帶作物研究所試驗場6隊的橡膠樹上采集，在中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所內(nèi)的養(yǎng)蟲室（溫度25 ℃～27 ℃、相對濕度70%～90%），用南瓜進行飼養(yǎng)繁殖以備用。

日本食蚧蚜小蜂：于海南省儋州市中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所的試驗基地里采集日本食蚧蚜小蜂褐蛹，待其羽化后，用橡膠樹上的橡副珠蠟蚧進行繁殖，形成數(shù)量較大的試驗種群后，將蜂轉(zhuǎn)接到南瓜飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧上，形成以南瓜為植物寄主的種群以供試驗所需。

藍色長盾金小蜂：于海南省瓊中縣新進農(nóng)場橡膠增殖苗圃園收集金小蜂蛹，待其羽化后，用南瓜飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧繁殖，形成以南瓜為植物寄主的種群以供試驗所需。

1.2 試驗方法

在南瓜表面上挑選橡副珠蠟蚧，并將帶蟲區(qū)的南瓜用小刀切下，去瓜囊及多余的瓜肉，僅留厚度為3 mm左右的帶介殼蟲的南瓜表皮，將帶有蚧蟲的南瓜塊表面朝上放入培養(yǎng)皿（D＝15 cm，用150目的紗網(wǎng)封皿，以便透氣）中，并用脫脂棉蘸取15%的蔗糖水貼于培養(yǎng)皿底部作為小蜂的補充營養(yǎng)。在人工氣候箱內(nèi)（相對濕度70%，光周期12L∶12D）接蜂（在試管中交配了24 h的雌蜂）24 h后取出，通過體視鏡（NIKON，SMZ1500）解剖統(tǒng)計蚜小蜂與金小蜂的產(chǎn)卵數(shù)，計算寄生率。以寄主齡期（3齡若蟲＋褐色期成蟲）（A）、寄生蜂（日本食蚧蚜小蜂＋藍色長盾金小蜂）（B）、溫度（C）為考察因子，每因子 5個水平，按表 1進行正交試驗。共計25個處理，每個處理重復3次。

表1 正交試驗設(shè)計Table 1 Orthogonal test design

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

金小蜂寄生率（%）＝被金小蜂寄生的成蟲數(shù)/處理成蟲頭數(shù)×100%；蚜小蜂寄生率（%）＝被蚜小蜂寄生的蚧蟲數(shù)/處理蚧蟲頭數(shù)×100%；若蟲被寄生率（%）＝被寄生若蟲數(shù)/處理若蟲數(shù)×100%；成蟲被寄生率（%）＝被寄生成蟲數(shù)/處理成蟲數(shù)×100%；總寄生率（%）＝被寄生蚧蟲數(shù)/處理蚧蟲數(shù)×100%。

采用極差、方差、多重比較（Duncan氏法），分析不同因素對兩種寄生蜂的產(chǎn)卵量和寄生率的影響。試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2010、SAS 9.2統(tǒng)計軟件進行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂聯(lián)合控害效果的影響

因處理組合不同，日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂對橡副珠蠟蚧產(chǎn)卵量和寄生率存在明顯差異。藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量最高的處理為S3，為46.0粒；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量最高的處理為S21，為99.3粒；藍色長盾金小蜂寄生率最高的為處理S7（90.00%）；日本食蚧蚜小蜂寄生率最高的為處理S9（68.00%）；對于藍色長盾金小蜂與日本食蚧蚜小蜂對蚧蟲總的寄生率，處理S8最高，為71.00%，處理S12時最低，為5.67%。綜合來看，在所進行的試驗中，處理S8，即組合A1B4C3，若蚧＋成蚧＝10＋90、日本食蚧蚜小蜂＋藍色長盾金小蜂＝3＋1、溫度為27 ℃時，兩蜂對橡副珠蠟蚧總的寄生率最高（表2）。

表2 不同處理對日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率的影響Table 2 Different treatment on the impact of the number of eggs and parasitic rate of C.japonicus and S.caerulea

2.2 試驗各因子的多重比較

寄主齡期對藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量、藍色長盾金小蜂寄生率、日本食蚧蚜小蜂寄生率、成蟲被寄生率、總寄生率均有顯著影響。其中藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量、總寄生率在水平3時最高，分別為22.1粒、46.52%；藍色長盾金小蜂寄生率、日本食蚧蚜小蜂寄生率和成蟲被寄生率在水平5時最高，分別為39.61%、34.08%和55.17%；寄主齡期組成對日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量和若蟲被寄生率無顯著影響。

兩種蜂的組成比例對產(chǎn)卵量、寄生率、若蟲被寄生率、總寄生率均有顯著影響。其中，藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率在水平1時最高，分別為24.6粒和44.07%；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量和寄生率、若蟲被寄生率在水平5時最高，分別為74.4粒、49.61%和50.00%；兩蜂聯(lián)合控害的總寄生率也在水平5時最高，為49.61%。

溫度對所有指標均有顯著影響。藍色長盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率在水平 5時最高，分別為 23.2粒和41.80%；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量、寄生率、若蟲被寄生率、成蟲被寄生率和總寄生率在水平3時最高，分別為52.3粒、39.07%、39.94%、59.83%和48.84%。

總體上，寄主齡期組成在水平3、兩種蜂的組合為水平5、溫度在水平3，即若蚧＋成蚧＝50＋50、27 ℃單獨接蚜小蜂的控害效果最好（表3）。

表3 不同因子對日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂防控效果影響的多重比較分析Table 3 The multiple comparison analysis of the effects of different factors on C.japonicus and S.caerulea’s prevention and control

2.3 試驗各因子主次效應分析

對于金小蜂產(chǎn)卵量、蚜小蜂產(chǎn)卵量、金小蜂寄生率、蚜小蜂寄生率、若蟲被寄生率、總寄生率而言，各因子的主次水平均為寄生蜂比例＞溫度＞寄主齡期；對于成蟲被寄生率而言，各因子主次水平為溫度＞寄主齡期＞寄生蜂比例。同時由表4可知，日本食蚧蚜小蜂與藍色長盾金小蜂聯(lián)合控制橡副珠蠟蚧時，總寄生率最適組合為A3B5C3，即若蚧＋成蚧＝50＋50、27 ℃單獨接蚜小蜂時，總寄生率最高。

表4 日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂防控指標的極差分析Table 4 The range analysis of C.japonicus and S.caerulea’s prevention and control indicators

3 討論

寄生蜂是最常見的一種寄生性昆蟲，屬膜翅目，分為內(nèi)寄生和外寄生兩大類[28]，前者是把卵產(chǎn)在寄主體內(nèi)，后者是把卵產(chǎn)在寄主體表。本試驗涉及的日本食蚧蚜小蜂和藍色長盾金小蜂分別是橡副珠蠟蚧的內(nèi)寄生蜂和外寄生蜂，其取食對象分別為蚧蟲的體液和腹下的卵粒，理論上這兩種蜂對橡副珠蠟蚧的防治可以起到互補作用。在自然界中，影響寄生蜂防效的因子有很多，如溫度、濕度、光周期、寄主種類及齡期等[29-32]。本研究以寄生率作為指標評價防治效果，就寄主齡期、接蜂時兩種寄生蜂與蚧蟲的比例及環(huán)境溫度對控害效果的影響進行了3因子5水平正交試驗，得到最優(yōu)組合為A3B5C3，即若蟲∶成蟲=1∶1、27 ℃、單獨接蚜小蜂的寄生效果最好，并通過極差分析法分析多種因子在寄生過程中的主次作用，對于兩蜂對蚧蟲總的寄生率而言，各因子的主次水平為寄生蜂比例＞溫度＞寄主齡期。

利用兩種不同生態(tài)位的寄生蜂進行組合釋放，可以彌補單一寄生蜂控制害蟲所帶來的寄生率低、防治成本增加、生態(tài)系統(tǒng)不穩(wěn)定等缺陷[33,34]，Ehler[35]、Heinz和Nelson[36]發(fā)現(xiàn)寄生蜂聯(lián)合應用比單獨使用一種寄生蜂能殺死更多的害蟲。Moreno-Ripoll等[37]將麗蚜小蜂Encarsiaformosa和碩恩蚜小蜂E.pergandiella聯(lián)合釋放后，發(fā)現(xiàn)二者對煙粉虱的控制效果均好于單獨釋放；利用淺黃恩蚜小蜂E.sophia與麗蚜小蜂聯(lián)合控制粉虱時，在釋放寄生蜂20 d內(nèi)，單一釋放淺黃恩蚜小蜂的防治效果最佳，但隨著時間的增加，兩種蜂聯(lián)合釋放的防治效果好于單一釋放一種蜂的防治效果[38]。本研究中，室內(nèi)接蜂24 h時，日本食蚧蚜小蜂與藍色長盾金小蜂同時接蜂的寄生率顯著高于只接藍色長盾金小蜂時的寄生率，但低于只接日本食蚧蚜小蜂時的寄生率，表明日本食蚧蚜小蜂的寄生能力顯著高于藍色長盾金小蜂[6,9]。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)，日本食蚧蚜小蜂在最適溫區(qū)24 ℃～27 ℃時，發(fā)育快、出蜂量較高，有較強的種群增長能力。當溫度高達33 ℃以上時，日本食蚧蚜小蜂仍然有較高的產(chǎn)卵量和寄生率，但不能完成世代發(fā)育（未發(fā)表）。另外，藍色長盾金小蜂在33 ℃時，有較強的種群增長能力（未發(fā)表）。在高溫情況下，藍色長盾金小蜂與日本食蚧蚜小蜂聯(lián)合釋放，可彌補日本食蚧蚜小蜂高溫下不能完成世代發(fā)育的缺陷。研究發(fā)現(xiàn)在海南、云南等地區(qū)橡副珠蠟蚧3個繁殖高峰期分別是3月初和6至7月及9至10月[39]，根據(jù)天氣網(wǎng)可知海南3月白天平均氣溫28 ℃，6至7月白天平均氣溫為34 ℃，9至10月白天平均氣溫為33 ℃。其次由試驗結(jié)果可知，日本食蚧蚜小蜂在寄主若蟲占比高情況下的寄生率要顯著高于寄主若蟲占比較低時的寄生率，且前期試驗發(fā)現(xiàn)日本食蚧蚜小蜂偏好寄生3齡若蟲至褐色期成蟲，幾乎不寄生黑色期成蟲，而藍色長盾金小蜂偏好寄生褐色期成蟲和黑色期成蟲，在田間聯(lián)合放蜂時，可根據(jù)表3中寄主齡期比例對聯(lián)合防控寄生率影響做參考。

本文通過3因子5水平正交試驗，得到日本食蚧蚜小蜂與藍色長盾金小蜂聯(lián)合防控效率受溫度、齡期和蜂比的影響，這對指導二者的田間釋放有一定的意義，但對于田間兩種蜂聯(lián)合防控的具體效果，仍需做長時間的研究記錄。