冉永紅，路等學(xué)，趙軍霞，楊阿麗，程永龍

（1.定西市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,甘肅 定西 743000；2.甘肅省科學(xué)院甘肅 蘭州 730000）

甘肅省作為西北農(nóng)業(yè)大省，在防治病蟲(chóng)害、清除雜草、增加農(nóng)作物產(chǎn)量等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)中會(huì)使用一定劑量的農(nóng)藥。通常農(nóng)藥的使用中，有90%的農(nóng)藥殘留在土壤中，殘留量一般為使用量的20%～70%[1]。史雪巖等[2]對(duì)西北春小麥和麥田土壤中的4種殺蟲(chóng)劑、6種殺菌劑、5種除草劑的殘留情況做了檢測(cè)，結(jié)果顯示，15種農(nóng)藥均未檢出（低于方法的定量限）。李曉通[3]對(duì)煙臺(tái)市5個(gè)地區(qū)農(nóng)田土壤中23種農(nóng)藥殘留的分析結(jié)果表明，不同地區(qū)的土壤樣品中均有少數(shù)不同種類的農(nóng)藥殘留。

羊肚菌（Morchella spp.）作為一種名貴的食用菌，有著極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，其含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)，食用羊肚菌具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗疲勞、抗氧化、抗腫瘤、降血脂等功效[4-6]。近年來(lái)，羊肚菌人工栽培面積逐年增加。由于羊肚菌對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求較高，羊肚菌栽培過(guò)程中能否使用農(nóng)藥或使用了農(nóng)藥的土壤是否能栽培羊肚菌卻少有研究。謝敬宜[7]選取6種除草劑和2種殺蟲(chóng)劑配制了不同農(nóng)藥、不同濃度的培養(yǎng)基，研究其對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)除草甘膦異丙胺鹽外，其余幾種除草劑對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)有較強(qiáng)的抑制作用，含2種殺蟲(chóng)劑的培養(yǎng)基接種菌絲后均呈現(xiàn)出嚴(yán)重的毒害情況。基于此，通過(guò)調(diào)查甘肅地區(qū)主栽農(nóng)作物常用的8種農(nóng)藥，探究其不同濃度對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)和菌核形成的影響，以期為本地區(qū)羊肚菌大田栽培中針對(duì)除草和蟲(chóng)害防治、與其他作物輪作以及栽培地土壤的選擇等提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌株：六妹羊肚菌（Morchella sextelata），保藏于甘肅省科學(xué)院生物研究所食用菌實(shí)驗(yàn)室，編號(hào)為m80。

活化平板培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g，水100 mL，pH自然。供試基礎(chǔ)平板培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀1 g、蛋白胨1 g、瓊脂20 g，水100 mL，pH自然。供試農(nóng)藥基本信息見(jiàn)表1。

表1 供試農(nóng)藥Tab.1 Pesticides for testing

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的影響

將保藏菌株轉(zhuǎn)接至活化平板培養(yǎng)基中央，20℃避光恒溫培養(yǎng)4 d（96 h） 待用。按參照文獻(xiàn)[5]的方法，分別在試驗(yàn)用平板培養(yǎng)基中添加含有相應(yīng)正常施用濃度5%、10%、50%、100%和200%的各種農(nóng)藥，待用，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，對(duì)照組為未添加農(nóng)藥的試驗(yàn)用平板培養(yǎng)基。用8 mm打孔器取活化好的菌絲體塊分別接種于添加農(nóng)藥的供試基礎(chǔ)平板培養(yǎng)基中央，22℃避光恒溫培養(yǎng)，在72 h時(shí)測(cè)量并記錄菌絲的生長(zhǎng)長(zhǎng)度，對(duì)菌落長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分：5分表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)濃密；4分表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)較濃密；3分表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)較密，2分表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)一般，1分表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)稀疏，0分表示菌絲不生長(zhǎng)[8]。按參照文獻(xiàn)[9]的方法評(píng)價(jià)不同濃度農(nóng)藥培養(yǎng)基的菌絲生長(zhǎng)能力評(píng)價(jià)值（M），其計(jì)算公式為：

式中：V為菌絲日均長(zhǎng)速（mm·d-1）；G為菌落長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel整理，差異顯著性分析（P<0.05） 采用SPSS 20軟件，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

1.2.2 農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌核形成的影響

培養(yǎng)20 d（480 h）時(shí)，觀察記錄各試驗(yàn)組菌核分布區(qū)域、菌核形態(tài)、顏色和數(shù)量[11-12]。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的影響

不同農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表2。

由表2可知，氯氟吡氧乙酸·異辛酯在正常施用濃度5%（A1）時(shí)對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用，達(dá)到正常施用濃度10%（A2）和50%（A3）時(shí)抑制作用極強(qiáng)，達(dá)到正常施用濃度100%（A4）和200%（A5）時(shí)羊肚菌菌絲停止生長(zhǎng)。草甘膦異丙銨鹽在正常施用濃度5%（B1）和10%（B2）時(shí)抑制作用微弱，但達(dá)到正常施用濃度100%（B4）和200%（B5）時(shí)抑制作用較強(qiáng)。辛硫磷在正常施用濃度5%（C1）和10%（C2）時(shí)對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑制作用，在正常施用濃度100%（C4）、200%（C5）時(shí)羊肚菌停止生長(zhǎng)。烯草酮（D1～D3）低于建議施用濃度時(shí)對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑制作用，達(dá)到建議用藥量（D4）和200%用藥量（D5）時(shí)羊肚菌菌絲停止生長(zhǎng)。不同施用濃度的氟氯氰菊酯（E1～E5）總體對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用微弱。吡蟲(chóng)啉在正常施用濃度5%（F1）和10%（F2）時(shí)抑制作用微弱，但達(dá)到正常施用濃度50%（F3）及以上均表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑制作用。阿維菌素（G1～G5）和高氯·甲維鹽（H1～H5）在正常施用濃度以下時(shí)對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用，達(dá)到正常施用濃度100%和200%時(shí)抑制作用極強(qiáng)。

表2 不同農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的影響Tab.2 Effects of different pesticides on the growth of Morchella sextelata

2.2 農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌核形成的影響

不同農(nóng)藥對(duì)羊肚菌菌核形成的影響見(jiàn)表3。

由表3可知，氯氟吡氧乙酸·異辛酯在正常施用濃度5%（A1）時(shí)羊肚菌菌核的分布、數(shù)量、形態(tài)、顏色和對(duì)照相當(dāng)，高于正常施用濃度5%時(shí)，菌核數(shù)量低于對(duì)照，分布和形態(tài)與對(duì)照存在部分差異。草甘膦異丙銨鹽（B1～B5）在各不同濃度下羊肚菌菌絲均不扭結(jié)形成菌核。辛硫磷在正常施用濃度5%（C1）時(shí)形成的羊肚菌菌核數(shù)量較對(duì)照少，且顏色為黃褐色，10%（C2）和50%（C3）時(shí)在平皿中分散分布極少量的白色菌核，100%（C4）和200%（C5）時(shí)菌絲不生長(zhǎng)。烯草酮在正常施用濃度5%（D1）時(shí)在平皿中分散分布少量的黃褐色菌核，但在10%（D2） 時(shí)菌核數(shù)量明顯增多，100%（D4）和200%（D5）時(shí)菌絲不生長(zhǎng)。不用施用濃度的氟氯氰菊酯（E1～E5） 處理下羊肚菌菌核數(shù)量大體一致，均比對(duì)照少，但在50%（E3）時(shí)菌核形態(tài)為片狀，與其他濃度以及對(duì)照不同。不用施用濃度的吡蟲(chóng)啉（F1～F5） 處理下羊肚菌菌核的顏色均為黃褐色，與對(duì)照不同，50%（F3）及以上時(shí)羊肚菌菌核成片狀。不同施用濃度的阿維菌素（G1～G5）處理下羊肚菌菌核形態(tài)均為片狀，10%（G2）及以上時(shí)羊肚菌菌核為黃褐色。不同施用濃度的高氯·甲維鹽（H1～H5）處理下羊肚菌菌核均與對(duì)照一致，數(shù)量略微減少，形態(tài)均有少量的片狀菌核，菌核顏色在 5%（H1）、10%（H2）、50%（H3）、100%（H4）濃度時(shí)與對(duì)照一致。

3 結(jié)論

主要調(diào)研了甘肅省大田主栽農(nóng)作物種植中常用的8種農(nóng)藥，在供試基礎(chǔ)培養(yǎng)基上添加其正常施用濃度5%、10%、50%、100%、200%的農(nóng)藥后，觀察分析平板培養(yǎng)基上羊肚菌菌絲生長(zhǎng)和菌核形成的情況。

不同施用濃度的3種除草劑和5種殺蟲(chóng)劑對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)均有一定的抑制作用，隨著施用濃度的增加，抑制作用越來(lái)越強(qiáng)。在5%和10%正常施用濃度下，草甘膦異丙銨鹽和氟氯氰菊酯抑制作用微弱，烯草酮對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)。

8種農(nóng)藥在不同濃度下對(duì)羊肚菌菌核分布、數(shù)量、形態(tài)、顏色等均與對(duì)照有一定的差異，其中氯氟吡氧乙酸·異辛酯在正常施用量5%時(shí)與對(duì)照僅在菌核形態(tài)中略有差異。試驗(yàn)設(shè)置的不同濃度草甘膦異丙銨鹽都會(huì)造成羊肚菌菌絲不扭結(jié)，無(wú)菌核形成，正常施用濃度5%和10%的氟氯氰菊酯與對(duì)照比，菌核數(shù)量略少。高氯·甲維鹽在正常施用濃度5%、10%、50%和100%時(shí)與對(duì)照相比，菌核數(shù)量略小。

綜上結(jié)果分析，氟氯氰菊酯作為殺蟲(chóng)劑可以在羊肚菌大田栽培中必要時(shí)進(jìn)行控量使用，在羊肚菌大田栽培中，不建議使用上述試驗(yàn)中的除草劑。除氟氯氰菊酯外，在其他農(nóng)作物栽培中使用了上述農(nóng)藥后的土壤是否能作為羊肚菌的栽培地，還需要進(jìn)行土壤農(nóng)藥檢測(cè)后對(duì)比試驗(yàn)數(shù)據(jù)后謹(jǐn)慎使用。