郭美娟，張 斌，張春林，李俊娣，張?zhí)m天，史國華

（河北省食品檢驗(yàn)研究院，河北省食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 石家莊 050200）

硒是人體必需的微量元素之一，它是多種蛋白質(zhì)和酶的必要組成部分，具有抗氧化、抗炎和調(diào)節(jié)甲狀腺激素等功能[1]。研究表明，硒對(duì)新生兒，尤其是早產(chǎn)兒的健康和發(fā)育有至關(guān)重要的作用[2]。嬰兒食用含硒量低的乳粉可能會(huì)引起硒缺乏，對(duì)嬰兒健康造成影響，近年來，嬰幼兒配方乳粉中有強(qiáng)化硒的傾向[3-4]，因此準(zhǔn)確測(cè)定嬰幼兒配方乳粉、特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中硒的含量非常重要。GB 25596—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品通則》[5]中規(guī)定，特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中硒的限量為0.48～1.90 μg/100 kJ。

特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品與嬰幼兒配方食品的基質(zhì)區(qū)別較大[6-8]。GB 5009.93—2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中硒的測(cè)定》[9]可用于食品包括嬰幼兒配方乳粉中硒的檢測(cè)，并沒有針對(duì)特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品的檢測(cè)方法，因此在特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中的適用性有待研究。國內(nèi)外關(guān)于硒檢測(cè)方法的研究很多，目前文獻(xiàn)已報(bào)道的檢測(cè)方法有原子吸收光譜法[10]、原子熒光光譜法[11]、熒光法[12]、電感耦合等離子體-質(zhì)譜法[13-14]及電感耦合等離子體-發(fā)射光譜法[15]等。其中，原子熒光光譜法和電感耦合等離子體-質(zhì)譜法為檢測(cè)乳粉中硒最常用的測(cè)定方法。本研究聯(lián)合7 家實(shí)驗(yàn)室分別采用以上2 種常見方法對(duì)不同種類和配方特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中的硒含量進(jìn)行測(cè)定，研究硒檢驗(yàn)方法的適用性，以推動(dòng)特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品檢測(cè)方法的完善[16]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

選用市售嬰兒配方乳粉參考樣品和不同品牌、不同配方的特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品，分別為乳蛋白部分水解配方乳粉3 種、早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方乳粉2 種、無乳糖配方乳粉1 種。特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品的樣品編號(hào)及具體配方信息如表1所示。共7 個(gè)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室6 個(gè)樣品，共42 個(gè)樣品。

表1 樣品信息Table 1 Information about samples tested in this study

1.2 方法

樣品前處理及硒含量測(cè)定分別采用GB 5009.93—2017第一法（氫化物原子熒光光譜法）和GB 5009.93—2017第三法（電感耦合等離子體-質(zhì)譜法）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Microsoft Office Excel 2007軟件和SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 嬰兒配方乳粉參考樣品硒含量測(cè)定結(jié)果

采用嬰兒配方乳粉參考樣品作為參考，參考值由具有ISO 17043資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室基于EN14122、EN14152、EN14164和EN15652的內(nèi)部檢測(cè)方法，依據(jù)能力驗(yàn)證統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算得出。

由表2可知，7 家實(shí)驗(yàn)室采用GB 5009.93—2017第一法測(cè)得的硒含量普遍偏低，采用GB 5009.93—2017第三法測(cè)得的硒含量均與參考值相近，2 組數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差比相同。

表2 嬰兒配方乳粉參考樣品硒含量測(cè)定結(jié)果Table 2 Results of determination of selenium content in reference samples of infant formula

Z值=（測(cè)試結(jié)果－中位值）/測(cè)試結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)四分位數(shù)間距，|Z|≤2為滿意結(jié)果，2＜|Z|＜3為可疑或有問題結(jié)果，|Z|≥3為不滿意結(jié)果。Z值用來衡量測(cè)試結(jié)果在一組數(shù)據(jù)中相對(duì)于中位值的偏離程度，|Z|越大，表明該結(jié)果的偏離程度越高[17]。

由表3可知，除實(shí)驗(yàn)室2采用GB 5009.93—2017第一法測(cè)得的Z值為－2.0以外，其余|Z|＜2，證明檢測(cè)結(jié)果滿意。通過嬰兒配方乳粉參考樣品的檢測(cè)結(jié)果，驗(yàn)證了2 種檢測(cè)方法在嬰兒配方乳粉中的適用性，同時(shí)驗(yàn)證了參與的7 家實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)?zāi)芰δ軌驖M足本研究的要求。

表3 嬰兒配方乳粉參考樣品Z值測(cè)定結(jié)果Table 3 Z values for selenium content in infant formula

2.2 采用GB 5009.93—2017第一法檢測(cè)特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中硒含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)GB/T 27404—2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢驗(yàn)》[18]中對(duì)精密度的要求，被測(cè)組分含量為1 mg/kg時(shí)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)為11%。由表4可知，實(shí)驗(yàn)室間變異系數(shù)為8.5%～14.2%，說明實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果存在一定差異性。

表4 GB 5009.93—2017第一法硒含量測(cè)定結(jié)果Table 4 Results of determination of selenium content in real samples by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

ZB值是指實(shí)驗(yàn)室間測(cè)定結(jié)果的Z值，用來衡量實(shí)驗(yàn)室間測(cè)試結(jié)果的系統(tǒng)誤差。由表5可知，除實(shí)驗(yàn)室3的早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方樣品D檢測(cè)結(jié)果ZB值為3.6、實(shí)驗(yàn)室7的乳蛋白部分水解配方樣品A和B的檢測(cè)結(jié)果ZB值為－2.1和－2.2外，其他檢測(cè)結(jié)果|ZB|≤2，精密度符合檢測(cè)要求。

表5 GB 5009.93—2017第一法硒含量測(cè)定結(jié)果ZB值Table 5 ZB value for selenium content in real samples determined by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

2.3 采用GB 5009.93—2017第三法檢測(cè)特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中硒含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)GB/T 27404—2008規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)小于11%。由表6可知，只有無乳糖配方樣品C和乳蛋白部分水解配方樣品F的變異系數(shù)低于11%，其他樣品測(cè)定結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室間變異系數(shù)均大于11%，說明各實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果存在差異。

表6 GB 5009.93—2017第三法硒含量測(cè)定結(jié)果Table 6 Results of determination of selenium content in real samples by inductively coupled plasma mass spectrometry

由表7可知，除實(shí)驗(yàn)室3的早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方樣品D和實(shí)驗(yàn)室7的乳蛋白部分水解配方樣品E的測(cè)定結(jié)果|ZB|大于2，其余所有7 個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的|ZB|≤2，說明檢測(cè)結(jié)果精密度符合實(shí)驗(yàn)要求。

表7 GB 5009.93—2017第三法硒含量測(cè)定結(jié)果ZB值Table 7 ZB value for selenium content in real samples determined by inductively coupled plasma mass spectrometry

2.4 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別對(duì)乳蛋白部分水解配方樣品A、早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方樣品B和無乳糖配方樣品C進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)添加量與樣品含量基本一致，驗(yàn)證2 種方法的測(cè)定準(zhǔn)確度。

GB/T 27404—2008規(guī)定，被測(cè)組分含量在1～100 mg/kg時(shí)，實(shí)驗(yàn)室加標(biāo)回收率應(yīng)為90%～110%。由表8可知，采用GB 5009.93—2017第一法的硒加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果，乳蛋白部分水解配方樣品A，有4 家實(shí)驗(yàn)室超出90%～110%的范圍，早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方樣品B有2 家實(shí)驗(yàn)室為85%，其余均符合要求，無乳糖配方樣品C僅有實(shí)驗(yàn)室2加標(biāo)回收率為75%，較低。采用GB 5009.93—2017第三法的硒加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果，乳蛋白部分水解配方樣品A測(cè)定結(jié)果實(shí)驗(yàn)室1、2均高于110%，早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方樣品B實(shí)驗(yàn)室1、2、6均高于110%，無乳糖配方樣品C同樣是實(shí)驗(yàn)室1、2高于110%。從實(shí)驗(yàn)室角度看，實(shí)驗(yàn)室1的檢測(cè)結(jié)果加標(biāo)回收率均高于100%，4 個(gè)樣品的加標(biāo)回收率高于110%，可能與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中存在系統(tǒng)誤差有關(guān)。實(shí)驗(yàn)室2采用GB 5009.93—2017第一法的加標(biāo)回收率均低于90%，第二法的加標(biāo)回收率均高于110%，也可能是由于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中存在系統(tǒng)誤差。特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品加標(biāo)回收率達(dá)不到國標(biāo)要求的原因主要是由于特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品基質(zhì)特殊且復(fù)雜，與普通嬰兒配方乳粉基質(zhì)也有著很大區(qū)別，且各配方之間差異性較大。

表8 各實(shí)驗(yàn)室加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果Table 8 Spiked recoveries of selenium obtained by different laboratories

3 結(jié) 論

除了本研究中的乳蛋白部分水解配方、早產(chǎn)/低出生體質(zhì)量配方和無乳糖配方，常見的特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品還包括無乳糖配方或低乳糖配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方、嬰兒營養(yǎng)補(bǔ)充劑和氨基酸代謝障礙配方[19]。無論從配方還是基質(zhì)來看，特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品是一類既特殊又復(fù)雜的食品。每類特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品均有其自身的配方特點(diǎn)[20-21]。本研究選取的3 種配方是特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中較常見且較有代表性的配方。本研究結(jié)果表明，GB 5009.93—2017第一法和GB 5009.93—2017第三法均適用于嬰兒配方乳粉中硒含量測(cè)定，在特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品各種配方中的適用性有待進(jìn)一步研究。