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        三七花玫瑰復(fù)合飲料的研制

        2021-08-09 10:23:40梁應(yīng)忠崔秀明向巧郭敏鄒玉林李銀飛邵琳嬌楊曉艷
        食品與發(fā)酵工業(yè) 2021年15期
        關(guān)鍵詞:浸膏白砂糖玫瑰花

        梁應(yīng)忠,崔秀明,向巧,郭敏,鄒玉林,李銀飛,邵琳嬌,楊曉艷*

        1(昆明理工大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,云南 昆明,650500)2(云南省三七資源可持續(xù)發(fā)展利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明,650500)

        三七花是五加科人參屬植物三七(Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥花蕾。三七距今已有400多年的使用歷史[1],在傳統(tǒng)的使用習(xí)慣中多半以三七根及剪口入藥,三七莖葉用來(lái)生產(chǎn)酒,而三七花則用來(lái)代茶飲用或者炒肉食用[2]。三七中公認(rèn)的活性成分是皂苷類(lèi)成分,即三七總皂苷[3],三七花是全株三七中皂苷含量最高的部位,在一級(jí)三七花中總皂苷含量達(dá)28.48%[4]。雖然在民間一直存在食用三七花的習(xí)慣,但因?yàn)闆](méi)有相關(guān)的食品標(biāo)準(zhǔn),不能作為普通食品原料開(kāi)發(fā)利用,而且三七花經(jīng)干燥處理后,易碎且不能長(zhǎng)期儲(chǔ)存[5],極大限制了三七花市場(chǎng)的發(fā)展。經(jīng)過(guò)多年的努力,2016年云南省衛(wèi)計(jì)委正式將三七花、莖葉作為普通地方特色食品原料進(jìn)行管理[6],自此各類(lèi)三七花保健產(chǎn)品相繼問(wèn)世,比如三七花醋[7]、三七花苷元牙膏[8]、三七花花生酥糖[9]、三七花菠蘿夾心軟糖[10]、三七花保健硬糖[11]、三七花啤酒[12]、三七花姜茶[13]等,但用三七花研制的復(fù)合飲料產(chǎn)品卻較少,以三七花搭配玫瑰花研制的復(fù)合飲料就更少。本研究選用文山三七花、云南墨紅玫瑰搭配白砂糖、蜂蜜、檸檬酸研制一款酸甜可口、色香俱全、營(yíng)養(yǎng)豐富的三七花玫瑰飲料。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        干燥三七花,云南文山中藥材市場(chǎng),經(jīng)昆明理工大學(xué)崔秀明研究員鑒定為五加科人參屬植物三七的干燥花蕾;干燥墨紅玫瑰花瓣,云南省昆明市花太美花茶店;白砂糖,云南云縣甘化有限公司;蜂蜜,云南滇云蜜語(yǔ)生物科技有限公司;檸檬酸,濰坊英軒實(shí)業(yè)有限公司;三七總皂苷(純度>90%),上海源葉生物科技有限公司;人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3對(duì)照品(純度≥98%),四川省維克奇生物科技有限公司;95%(體積分?jǐn)?shù))食用乙醇,河南鑫河陽(yáng)酒精有限公司;香草醛、冰乙酸、高氯酸,天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;色譜級(jí)甲醇、乙腈,德國(guó)Sigma-Aldrich公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        UV—2600紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)、SPD-20 A型高效液相色譜儀,日本島津公司;UPT-I-20 T優(yōu)普系列超純水器,成都超純科技有限公司;BL10-250A超聲清洗儀,上海比朗有限公司;RE-5205旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海亞榮生化儀器廠;MS-0212經(jīng)濟(jì)型磁力攪拌器,上海泰坦科技股份有限公司;BS-3型10L小型巴氏滅菌機(jī),上東商廚電器科技有限公司;pH計(jì),梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。

        1.3 工藝流程

        三七花提取液浸膏制備:

        三七花粉→過(guò)50目篩→食用乙醇回流提取→抽濾→減壓濃縮濾液→浸膏。

        墨紅玫瑰花提取液制備:

        干燥墨紅玫瑰花瓣→研磨→水浴浸泡、超聲輔助提取→抽濾→玫瑰花提取液。

        三七花玫瑰復(fù)合飲料調(diào)配:

        三七花提取液浸膏、白砂糖、蜂蜜、墨紅玫瑰花提取液、檸檬酸→混合調(diào)配→均質(zhì)→密封→加熱滅菌→冷卻→飲料成品。

        1.4 操作要點(diǎn)

        1.4.1 三七花總皂苷的制備

        本實(shí)驗(yàn)采用乙醇回流法[14-16]對(duì)三七花中的總皂苷進(jìn)行提取,用60%(體積分?jǐn)?shù))食用乙醇進(jìn)行提取,料液比1∶14(g∶mL),提取時(shí)間1.5 h,溫度60 ℃,過(guò)濾得濾液,濾渣按上述條件重復(fù)提取1次,合并濾液濃縮成浸膏,經(jīng)比色法[17]測(cè)定所提取的三七花浸膏中三七總皂苷的含量為26.6%。

        1.4.2 墨紅玫瑰花提取液制備

        墨紅玫瑰花提取液制備工藝選用何菁等[18]優(yōu)化的超聲輔助水浸提法,水浴溫度65 ℃,加熱75 min,料液比1∶25(g∶mL),超聲20 min。

        1.4.3 三七花玫瑰復(fù)合飲料制作

        稱(chēng)取三七花提取液浸膏用適量純凈飲用水超聲溶解,加入白砂糖、蜂蜜、墨紅玫瑰花提取液、檸檬酸粉,根據(jù)具體設(shè)計(jì)用純凈水補(bǔ)足復(fù)合飲料總質(zhì)量,超聲溶解10 min,磁力攪拌10 min,將飲料裝入玻璃瓶中立即封口,82 ℃殺菌30 min,立即冰水浴20 min即得三七花玫瑰復(fù)合飲料成品。

        1.4.4 三七花玫瑰復(fù)合飲料配方優(yōu)化

        復(fù)合飲料的主要用料是三七花提取液浸膏、白砂糖、蜂蜜、墨紅玫瑰花提取液、檸檬酸,通過(guò)單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)三七花玫瑰復(fù)合飲料配方進(jìn)行優(yōu)化,得到一個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的最佳配方組合。

        1.4.4.1 復(fù)合飲料配方優(yōu)化的單因素試驗(yàn)

        各因素水平分別設(shè)置為三七花浸膏0.03%、0.08%、0.13%、0.18%、0.23%;白砂糖2.50%、5.00%、7.50%、10.00%、12.50%;蜂蜜1.50%、3.00%、4.50%、6.00%、7.50%;墨紅玫瑰花提取液1.50%、3.00%、4.50%、6.00%、7.50%;檸檬酸0.08%、0.10%、0.13%、0.15%、0.18%,均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)。復(fù)合飲料感官評(píng)分由10名學(xué)生(5男,5女)組成的小組評(píng)價(jià)得出。

        1.4.4.2 復(fù)合飲料配方優(yōu)化的正交試驗(yàn)

        在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取3個(gè)因素水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),為使試驗(yàn)設(shè)計(jì)更加合理,將“誤差項(xiàng)”也作為一個(gè)因素納入試驗(yàn)設(shè)計(jì),運(yùn)用軟件Minitab 15進(jìn)行L27(36)的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)、結(jié)果分析和最佳配方預(yù)測(cè)。

        1.5 感官評(píng)分方法

        感官評(píng)價(jià)主要包括色澤、香味、滋味、組織狀態(tài)4個(gè)方面,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)及分值比例如表1所示。

        表1 感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)表

        1.6 三七花特征皂苷的高效液相色譜分析

        人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3是三七花主要的特征性皂苷,對(duì)其含量的測(cè)定便于明確三七花玫瑰復(fù)合飲料中保健成分皂苷的含量。高效液相色譜分析條件:C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm;柱溫30 ℃;體積流量1.0 mL/min;進(jìn)樣量20 μL;流動(dòng)相0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B);洗脫程序:0~12 min,19% B;12~60 min,19%~36% B;60~75 min,36%~70% B;75~80 min,70%~100% B。分別精確稱(chēng)取人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb30.8、1.1、0.7、0.5 mg,用甲醇定容至10 mL,得到混合對(duì)照品溶液,分別吸取0.1、0.3、0.5、1、1.5、2.0、2.5 mL混合對(duì)照品溶液用甲醇定容至10 mL,用于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制,并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程進(jìn)行包括精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、加樣回收試驗(yàn)在內(nèi)的方法學(xué)考察。

        1.7 理化指標(biāo)及微生物指標(biāo)測(cè)定

        總酸的測(cè)定參照GB/T 12456—2008《食品中總酸的測(cè)定》;還原糖的測(cè)定參照GB/T 5009.7—2016《食品中還原糖的測(cè)定》;pH值的測(cè)定使用pH計(jì)。大腸菌群和菌落總數(shù)測(cè)定分別參照GB/T 4789.3—2016《食品微生物學(xué)檢測(cè)大腸菌群計(jì)數(shù)》和GB/T 4789.2—2016《食品微生物學(xué)檢測(cè)菌落總數(shù)測(cè)定》;微生物限量值參照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 7101—2015《飲料》。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 三七花玫瑰復(fù)合飲料配方優(yōu)化

        2.1.1 復(fù)合飲料配方優(yōu)化的單因素試驗(yàn)

        單因素試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明三七花浸膏、墨紅玫瑰花提取液、檸檬酸存在較高評(píng)分的添加量水平,而白砂糖、蜂蜜隨添加量增加,感官評(píng)分呈上升趨勢(shì),這可能因?yàn)樵谝欢ㄌ鸲确秶鷥?nèi),糖分含量越高產(chǎn)品越容易被人接受,但根據(jù)2016版《中國(guó)居民膳食指南》中每天攝糖量不超過(guò)50 g的相關(guān)建議,經(jīng)綜合考慮,白砂糖和蜂蜜的最適添加量分別選擇7.50%、6.00%,三七花浸膏、玫瑰花提取液、檸檬酸的最適添加量分別為0.08%、6.00%、0.13%。

        a-三七花濃縮浸膏添加量;b-白砂糖添加量;c-蜂蜜添加量;d-玫瑰花提取液添加量;e-檸檬酸添加量

        2.1.2 復(fù)合飲料配方優(yōu)化的正交試驗(yàn)

        在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,得如表2所示的正交因素水平表,運(yùn)用軟件Minitab 15進(jìn)行L27(36)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),結(jié)果如表3所示。

        表2 正交因素水平表 單位:%

        表3 正交試驗(yàn)結(jié)果

        續(xù)表3

        對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差分析得表4的結(jié)果,各因素對(duì)復(fù)合飲料影響程度的順序依次為:三七花浸膏>白砂糖>玫瑰花提取液>檸檬酸>蜂蜜。

        表4 正交試驗(yàn)極差分析結(jié)果

        對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析得表5的結(jié)果,從結(jié)果可知,選取置信水平α=0.05時(shí),三七花浸膏、白砂糖、墨紅玫瑰花提取液、檸檬酸對(duì)復(fù)合飲料品質(zhì)的影響具有顯著性差異,而蜂蜜對(duì)其無(wú)顯著性差異。最終得到復(fù)合飲料的最佳預(yù)測(cè)組合。三七花浸膏0.03%, 白砂糖10.00%, 蜂蜜4.50%, 玫瑰花提取液7.50%, 檸檬酸0.15%.此時(shí)預(yù)測(cè)響應(yīng)值為88.088 5。

        表5 感官評(píng)分的方差分析表

        2.1.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

        按照軟件預(yù)測(cè)的三七花玫瑰復(fù)合飲料最佳配方組合進(jìn)行實(shí)際驗(yàn)證,最終得87.99的感官評(píng)分與預(yù)測(cè)值僅相差0.098 5分,說(shuō)明模型建立良好,復(fù)合飲料的最佳配方預(yù)測(cè)結(jié)果可靠。

        2.2 三七花特征皂苷的高效液相色譜分析

        4種三七花特征性人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3的高效液相色譜分析結(jié)果如圖2所示。

        a-混合對(duì)照品;b-未加熱滅菌飲料;c-加熱滅菌飲料;1-人參皂苷Rb1;2-人參皂苷Rc;3-人參皂苷Rb2;4-人參皂苷Rb3

        2.2.1 方法學(xué)考察

        精密度試驗(yàn)。取人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3混合對(duì)照品溶液適量,連續(xù)進(jìn)樣6次,計(jì)算峰面積。結(jié)果顯示人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(relative standard deviation,RSD)分別為2.25%、1.89%、0.83%、2.55%,儀器精密度良好。

        穩(wěn)定性試驗(yàn)。取三七花玫瑰復(fù)合飲料成品適量,分別于室溫下放置0、4、16、24 h后進(jìn)樣測(cè)定峰面積,Rc、Rb1、Rb2、Rb3峰面積的RSD分別為0.55%、0.24%、0.27%、0.42%。

        重復(fù)性試驗(yàn)。取三七花玫瑰復(fù)合飲料成品適量,平行設(shè)置6份進(jìn)行峰面積測(cè)定,結(jié)果人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3峰面積的RSD分別為0.92%、0.66%、0.25%、1.24%。

        加樣回收試驗(yàn)。取一定量三七花玫瑰復(fù)合飲料成品,平行設(shè)置6份,通過(guò)已建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程初步計(jì)算出飲料中4種人參皂苷的質(zhì)量,再按質(zhì)量比1∶1加入4種人參皂苷對(duì)照品。人參皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rb3的加樣回收率分別為98.13%、96.24%、95.61%、96.88%。

        2.2.2 特征性皂苷含量測(cè)定

        通過(guò)表6所示的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程對(duì)三七花玫瑰復(fù)合飲料中的4種三七花特征性人參皂苷進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如表7所示。高溫滅菌過(guò)程會(huì)破壞三七花中人參皂苷的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致復(fù)合飲料中保健成分人參皂苷含量降低。

        表6 三七花特征性皂苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

        表7 復(fù)合飲料中人參皂苷含量

        2.3 復(fù)合飲料理化指標(biāo)及衛(wèi)生指標(biāo)測(cè)定

        三七花玫瑰復(fù)合飲料的理化指標(biāo)及微生物指標(biāo)測(cè)定結(jié)果如表8所示,其中的微生物指標(biāo)限量值參照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 7101—2015《飲料》,從結(jié)果可知該飲料的微生物指標(biāo)合格。

        表8 理化指標(biāo)及微生物指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

        3 結(jié)論

        本實(shí)驗(yàn)通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)三七花玫瑰復(fù)合飲料配方進(jìn)行優(yōu)化,得到的最佳配方組合是三七花浸膏0.03%,白砂糖10.00%,蜂蜜4.50%,墨紅玫瑰花提取液7.50%,檸檬酸0.15%,用該配方配制的三七花玫瑰復(fù)合飲料成品酸甜可口,色香兼?zhèn)?。飲料成品中三七花特征性人參皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rb3的含量分別為4.20、2.25、1.34、1.74 mg/L。

        在測(cè)定三七花總皂苷(主要是原人參二醇型皂苷)提取率時(shí),使用的對(duì)照品是三七總皂苷,其中既含原人參二醇型皂苷也含原人參三醇型皂苷,用于表征提取效果雖然是可行的,但如果選用原人參二醇組苷元作為對(duì)照品,那么提取率的測(cè)定可能會(huì)更加準(zhǔn)確。從三七花特征性皂苷含量測(cè)定結(jié)果來(lái)看,加熱滅菌的過(guò)程會(huì)破壞皂苷結(jié)構(gòu),使保健成分減少,如果能改善飲料的滅菌方式,將會(huì)較大程度地保留其中的人參皂苷。

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