劉 麟，于金田，王 晶，高雪芹,2，伏兵哲,2*

（1.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院，寧夏銀川 750021；2.寧夏回族自治區(qū)草牧業(yè)工程技術(shù)研究中心，寧夏銀川 750021）

碳（C）、氮（N）、磷（P）不僅是生態(tài)系統(tǒng)植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的大量元素，也是土壤結(jié)構(gòu)和養(yǎng)分的重要組成元素，不同的氣候環(huán)境、地理位置、植被類(lèi)型、成土母質(zhì)及人類(lèi)活動(dòng)等因素，都可以直接或間接影響土壤中碳、氮、磷的物質(zhì)循環(huán)過(guò)程。土壤碳氮磷化學(xué)計(jì)量比（C∶N∶P）是土壤中有機(jī)質(zhì)或者其他成分中碳素與氮素、磷素總質(zhì)量的比值，是確定土壤碳氮磷平衡特征的一個(gè)重要參數(shù)，也是反映土壤內(nèi)部碳氮磷循環(huán)的主要指標(biāo)［1］，有利于理解生態(tài)過(guò)程養(yǎng)分變化對(duì)全球變化的響應(yīng)［2］。由于各種綜合因素對(duì)土壤中碳氮磷總量的變化影響很大，進(jìn)而使得土壤碳氮磷化學(xué)計(jì)量比的空間變異性較大。

紫花苜蓿（Medicago sativa）是一種優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗旱、適應(yīng)性強(qiáng)的多年生豆科牧草［3］，其根系發(fā)達(dá)、分枝多、產(chǎn)量高，既可固氮培肥，又是優(yōu)質(zhì)的高蛋白飼料，有著“牧草之王”的美譽(yù)，是目前世界上分布最廣、種植面積最大、可利用價(jià)值最高的栽培牧草［4-5］。近年來(lái)，由于氣候條件及人為大量使用化肥、農(nóng)藥等農(nóng)用化學(xué)品，使苜蓿地土壤結(jié)構(gòu)破壞，肥力下降，微生物活性受到影響，導(dǎo)致苜蓿產(chǎn)量降低，土壤資源受到嚴(yán)重的安全威脅；適宜施肥量對(duì)于提供植被養(yǎng)分、調(diào)節(jié)土壤結(jié)構(gòu)、維持土壤肥力等方面具有非常重要的作用［6-7］。本文通過(guò)分析不同施肥處理下苜蓿地土壤理化性質(zhì)及其生態(tài)化學(xué)計(jì)量特征，探討土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分間的相關(guān)性，揭示苜蓿地土壤特性對(duì)土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量特征的影響，有助于加深對(duì)施肥處理土壤C、N、P 化學(xué)循環(huán)特征的認(rèn)識(shí)，以期為該研究區(qū)紫花苜蓿地養(yǎng)分科學(xué)管理和利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于寧夏自治區(qū)銀川市賀蘭山農(nóng)牧場(chǎng)農(nóng)墾九隊(duì)，屬賀蘭山?jīng)_積扇平原，地處北緯38°30′～38°39′，東經(jīng)106°1′～106°9′，海拔為1 111 m。該區(qū)域?qū)俚湫蜏貛Т箨懶詺夂?，四季分明，晝夜溫差大，年平均氣?.5 ℃左右，年降水量為185 mm 左右，主要集中在7、8 月，年日照時(shí)數(shù)2 800～3 100 h，無(wú)霜期185 d 左右。試驗(yàn)地土壤為淡灰鈣土，田間持水量19.17%，容重1.52 g/cm3，土壤總孔隙度38.25%，播種前檢測(cè)土壤基礎(chǔ)化學(xué)性質(zhì)（見(jiàn)表1）。

表1 試驗(yàn)地土壤理化性質(zhì)

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)材料為‘巨能7’紫花苜蓿，采用單因素完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)。于2016 年5 月條播，播量18 kg/hm2，2017 年開(kāi)始試驗(yàn)處理，設(shè)置F1、F2、F3、F4、F5共5 個(gè)施肥梯度，每個(gè)處理3 次重復(fù)，共15 個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積為4×6=24 m2。采用地下滴灌帶灌溉，配有完善的變頻系統(tǒng)和過(guò)濾系統(tǒng)，每小區(qū)設(shè)置獨(dú)立閥門(mén)控制灌水施肥，灌水量由主管道上的水表控制，滴灌帶深埋20 cm，間距60 cm，滴頭間距30 cm，滴頭每小時(shí)滴水3 L。施肥用15 L 壓差式施肥灌，將肥料溶解之后通過(guò)過(guò)濾系統(tǒng)施入。施肥所用肥料為尿素（N≥46%）、水溶性磷酸一氫銨（P2O5≥61%）和硫酸鉀（K2O≥52%）。施肥方案詳見(jiàn)表2。

表2 苜蓿地施肥處理方案

1.3 樣品采集與測(cè)定

于2020 年10 月初，在每個(gè)調(diào)查樣地內(nèi)采集土樣。每個(gè)小區(qū)隨機(jī)選取3 個(gè)采樣點(diǎn)，采集0～40 cm 土層的土壤樣品，每個(gè)處理采集5 個(gè)重復(fù)，均勻混合后讓所有土壤樣品過(guò)2.0 mm 篩子，去除雜質(zhì)保存在無(wú)菌袋中，編號(hào)后儲(chǔ)存在便攜式恒溫箱帶回實(shí)驗(yàn)室。將混合土壤樣品分為2份，1份放入4 ℃冰箱冷藏，用于土壤含水量、無(wú)機(jī)養(yǎng)分和溶解性有機(jī)養(yǎng)分的測(cè)定；1 份經(jīng)自然風(fēng)干研磨過(guò)篩后，用于土壤pH 值、有機(jī)碳、全氮和全磷的測(cè)定。

測(cè)定方法：土壤含水量（SWC）采用烘干法；土壤酸堿度（pH 值）采用pHS-3C 精密酸度計(jì)；硝態(tài)氮（NO3--N）、銨態(tài)氮（NH4+-N）用KCl浸提，分別采用紫外分光光度法和靛酚藍(lán)比色法；速效磷（AP）采用碳酸氫鈉-鉬銻抗比色法；土壤有機(jī)碳（SOC）采用重鉻酸鉀-硫酸氧化法；全氮（TN）用H2SO4消煮，全自動(dòng)凱式定氮儀測(cè)定；全磷（TP）采用H2SO4-HClO4消煮-鉬銻抗比色法。

土壤溶解性有機(jī)碳、氮、磷含量：土壤溶解性有機(jī)碳（DOC）和溶解性總氮（TDN）用KCl 浸提（水、土質(zhì)量比為5∶1），TOC/TN 分析儀測(cè)定，溶解性有機(jī)氮（DON）為溶解性總氮（TDN）與土壤無(wú)機(jī)氮（NO3--N+NH4+-N）的差值；土壤溶解性總磷（TDP）采用過(guò)硫酸鉀消化-分光光度法測(cè)定，溶解性有機(jī)磷（DOP）為溶解性總磷（TDP）與速效磷（AP）的差值。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Microsoft Excel 2010 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并作圖，用SPSS 13.0和DPS 7.05軟件進(jìn)行方差分析和相關(guān)關(guān)系分析，用LSD 法進(jìn)行顯著性多重比較，用Canoco 5.0 軟件進(jìn)行土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量比與土壤指標(biāo)的RDA分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 施肥對(duì)土壤理化性質(zhì)及其化學(xué)計(jì)量比特征的影響

不同施肥處理對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響見(jiàn)表3，隨施肥量的增加，土壤pH 值呈下降的趨勢(shì)，從8.30 逐漸降到8.26，土壤逐漸酸化；施肥量對(duì)土壤含水量沒(méi)有顯著影響；土壤硝態(tài)氮、銨態(tài)氮和速效磷含量隨施肥量的增加均表現(xiàn)為先增后減的趨勢(shì)，土壤硝態(tài)氮和銨態(tài)氮含量在F2處理下顯著增加，含量分別為8.21 mg·kg-1和4.51 mg·kg-1，速效磷含量在F3處理下最高為8.02 mg·kg-1，顯著高于F1、F5處理；土壤全量養(yǎng)分受施肥處理差異顯著，土壤有機(jī)碳隨施肥量的增加呈先增后減的趨勢(shì)，在F3處理下達(dá)11.46 g·kg-1，比F1提高了20.0%，全氮和全磷含量均隨施肥量的增加而增加，且均在F4處理下最高，在F1處理下最低，土壤C∶N 隨施肥量的增加逐漸減小，而施肥對(duì)土壤C∶P、N∶P沒(méi)有顯著影響。

表3 不同施肥處理下土壤理化性質(zhì)及其化學(xué)計(jì)量比特征

2.2 施肥對(duì)土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分及其化學(xué)計(jì)量比特征的影響

由表4 可知，隨施肥量的變化，土壤溶解性有機(jī)碳氮磷含量及其化學(xué)計(jì)量比變化規(guī)律各不相同。隨施肥量的增加，DOC 含量逐漸降低，其含量在F1處理下為45.43 mg·kg-1，顯著高于其他處理；DON 含量在F3處理下最高，達(dá)到13.68 mg·kg-1，F(xiàn)2處理下最低為8.58 mg·kg-1；DOP 含量隨施肥量的增加呈先減后增的趨勢(shì)，表現(xiàn)為F4處理下最高，F(xiàn)3處理下最低。在不同施肥處理下的土壤可溶性有機(jī)養(yǎng)分計(jì)量比中，DOC/DON 的變化范圍為2.92～4.64，隨施肥量的增加呈先增后減的變化趨勢(shì)，在F2處理下最大；DOC/DOP 和DON/DOP 的變化范圍分別為5.19～14.66和1.60～5.01，均表現(xiàn)為在F3處理下最大，在F4處理下最小。

表4 不同施肥處理下土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分及其化學(xué)計(jì)量比特征

2.3 土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分間關(guān)系

由圖1 可知，施肥處理對(duì)土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分間有一定的影響。在不同施肥處理下土壤DOC 含量與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分含量之間無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系，而土壤DON 含量與土壤NO3--N 含量和土壤NH4+-N 含量有顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，土壤DOP 含量與土壤NO3--N含量有極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。

圖1 土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分間關(guān)系

2.4 土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量特征與土壤指標(biāo)的冗余分析

RDA 結(jié)果表明（見(jiàn)圖2），土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量比的變化主要由土壤養(yǎng)分狀況驅(qū)動(dòng)，RDA 第一軸解釋了變量的64.81%，第二軸解釋了25.96%。土壤溶解性有機(jī)磷（DOP）解釋了土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量比變異的54.8%，表明施肥處理引起土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量特征的變化可以由DOP這個(gè)參數(shù)來(lái)解析。

圖2 土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量比與土壤指標(biāo)的冗余分析（RDA）

3 討論

土壤理化性質(zhì)是為營(yíng)造土壤良好環(huán)境和提供植物所需各種營(yíng)養(yǎng)元素的綜合能力，施肥是補(bǔ)充土壤營(yíng)養(yǎng)匱乏、維持土壤持續(xù)生產(chǎn)力和維持穩(wěn)定增產(chǎn)的有效措施。研究發(fā)現(xiàn)施肥能直接影響土壤的酸堿度、含水量、有機(jī)和無(wú)機(jī)等養(yǎng)分狀況［8］。本研究結(jié)果顯示，施肥處理改變了土壤理化性質(zhì)，土壤pH 值隨施肥量的增加逐漸減小，這與于樹(shù)等［9］、張煥軍等［10］研究結(jié)果相一致。施用化肥處理使土壤pH 值降低，加速土壤酸化，主要原因可能有：1）肥料中氮素的增加及苜蓿自身固氮的作用，促進(jìn)了土壤中的硝化作用和反硝化作用，硝化作用產(chǎn)生硝酸鹽，釋放出H+，以及反硝化作用產(chǎn)生的氮?dú)?、氨氣進(jìn)入大氣，在大氣中經(jīng)過(guò)氧化與水解作用轉(zhuǎn)化成硝酸，導(dǎo)致土壤酸化；2）長(zhǎng)期施用化肥，植物會(huì)選擇吸收肥料中的養(yǎng)分離子，將土壤膠體上的H+交換出來(lái)，使土壤溶液中H+濃度升高，加速土壤酸化。而唐海龍等研究得到施用有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)混肥可提高土壤pH值［11］，Tyree等研究發(fā)現(xiàn)單獨(dú)施用化肥會(huì)使土壤pH 值升高［12］。前人的研究結(jié)果雖不盡相同，但施肥處理對(duì)土壤pH 值有一定程度的影響是必然的。通過(guò)施肥處理影響土壤酸堿度值，是培肥土壤的重要措施之一。

土壤NO3--N 和NH4+-N 是植物吸收的主要氮素形態(tài)，也是植物營(yíng)養(yǎng)氮素研究的主要切入點(diǎn)。有研究認(rèn)為施用化肥和有機(jī)肥都能提高土壤NO3--N 和NH4+-N含量［13-14］，南鎮(zhèn)武研究發(fā)現(xiàn)施用有機(jī)肥或化學(xué)氮肥均能提高土壤NO3--N 或NH4+-N 含量及其積累量［15］。本研究發(fā)現(xiàn)施肥處理對(duì)土壤NO3--N 和NH4+-N 含量影響有顯著差異，NO3--N 和NH4+-N 含量隨施肥量的增加呈先增加后減少的趨勢(shì)。該結(jié)論與先前研究結(jié)果有所區(qū)別，可能是由于該研究區(qū)進(jìn)行長(zhǎng)期施肥處理和植被類(lèi)型為紫花苜蓿，具有自身固氮作用，使土壤生態(tài)系統(tǒng)中氮、磷、鉀元素豐富，促進(jìn)植物生長(zhǎng)和微生物活性，進(jìn)而引起植物和微生物對(duì)氮素需求量的增加，導(dǎo)致土壤中NO3--N 和NH4+-N 含量下降。此外，為探討施肥處理引致土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分是否對(duì)土壤溶解性有機(jī)養(yǎng)分含量產(chǎn)生影響，本研究分析了土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分與溶解性有機(jī)養(yǎng)分之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在不同施肥處理下土壤NO3--N 含量和土壤NH4+-N 含量與土壤DON 含量呈顯著負(fù)相關(guān)，NO3--N 含量與土壤DOP 含量呈顯著負(fù)相關(guān)。其說(shuō)明施肥處理改變了土壤微生物可利用底物的N∶P，進(jìn)而引起土壤無(wú)機(jī)氮含量的變化。

土壤碳、氮、磷是評(píng)價(jià)土壤肥力和滿足植物生長(zhǎng)需要的重要營(yíng)養(yǎng)元素，其構(gòu)成不僅可反映土壤中有機(jī)碳和氮、磷等養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化循環(huán)，還可表征土壤受外界影響后土壤養(yǎng)分狀況和微生物活性的變化［16］。本研究結(jié)果表明：土壤有機(jī)碳、全氮、全磷含量均受施肥處理的顯著影響，隨著施肥量的增加，有機(jī)碳含量呈先增后減的趨勢(shì)，而全氮和全磷含量呈增加的趨勢(shì)。這與李煥茹等研究碳氮添加對(duì)草地土壤有機(jī)碳量的影響［17］及馬亞娟等對(duì)杉木人工林地的施肥處理［18］的部分研究結(jié)論一致，可能由于施肥促進(jìn)了植物的生長(zhǎng)及微生物的活性，使得提高了植物凋落物和根系分泌物的積累，從而導(dǎo)致土壤有機(jī)質(zhì)含量增加，反之施肥量過(guò)高則不利于土壤有機(jī)質(zhì)的積累。也可能是由于土壤初始養(yǎng)分水平處于虧缺狀態(tài)，施肥以后使得土壤中氮、磷養(yǎng)分含量隨施肥量的增加明顯增加。通常認(rèn)為，土壤碳、氮、磷化學(xué)計(jì)量比是預(yù)測(cè)土壤養(yǎng)分限制性和有機(jī)質(zhì)分解速率的重要指標(biāo)。土壤C∶N 易受環(huán)境影響，是用來(lái)評(píng)價(jià)土壤碳氮礦化能力和有機(jī)質(zhì)分解速率是否會(huì)受土壤N 限制的重要指標(biāo)，土壤C∶N 與有機(jī)質(zhì)的分解速率之間成反比關(guān)系［19］。12＜（C∶N）＜16，表明土壤有機(jī)質(zhì)腐殖化程度高，易于有機(jī)質(zhì)礦化，土壤有效氮增加，且有機(jī)質(zhì)的分解速率不會(huì)受到N 的限制；（C∶N）＞25，土壤微生物對(duì)有機(jī)質(zhì)的分解速率小于累積速率，有機(jī)質(zhì)處于累積狀態(tài)，將受到N 的限制［20］。本研究中土壤C∶N 低于上述閾值，表明土壤有機(jī)碳在微生物作用下礦化速率較快，土壤中有效氮含量增加，土壤不受N 限制，但不利于有機(jī)碳的積累。同時(shí)，研究表明施肥處理對(duì)土壤“C∶P”“N∶P”影響無(wú)顯著差異，而對(duì)土壤C∶N影響有顯著性差異，且隨施肥量的增加土壤C∶N 呈遞減趨勢(shì)，說(shuō)明施肥處理增加土壤受碳限制。

4 結(jié)論

施肥處理對(duì)土壤SWC 和AP 無(wú)顯著影響，但顯著影響土壤pH、NO3--N 和NH4+-N。隨施肥量的增加，土壤pH 值減小，土壤逐漸酸化，NO3--N 和NH4+-N 含量也逐漸降低。土壤全量、溶解性有機(jī)養(yǎng)分含量及其計(jì)量比對(duì)施肥處理的響應(yīng)規(guī)律不一致，土壤SOC 含量隨施肥量的增加呈現(xiàn)先增后減的變化趨勢(shì)，TN 和TP含量呈遞增的趨勢(shì)，施肥處理顯著降低土壤C∶N，而土壤C∶P 和N∶P 不受施肥的影響；DOC 含量隨施肥量的增加呈現(xiàn)遞減的趨勢(shì)，DON 和DOP含量呈先減后增的趨勢(shì)，土壤DOC/DON 顯著下降，DOC/DOP 和DON/DOP 則呈先增后減的變化趨勢(shì)。土壤DON、DOP含量與土壤可利用無(wú)機(jī)養(yǎng)分存在不同程度的相關(guān)關(guān)系。土壤DOP 含量是調(diào)控施肥處理下土壤生態(tài)化學(xué)計(jì)量特征的主要因素。施肥對(duì)土壤資源計(jì)量比的影響，致使土壤微生物生長(zhǎng)受限制程度增強(qiáng)。