李存玉，蔣佳麗，鄒雨岑，許啟龍，支興蕾，彭國(guó)平*

1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210023

2.江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，江蘇 連云港 222001

3.中藥制藥過程新技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 連云港 222001

中藥制藥過程中成分存在狀態(tài)與其傳遞規(guī)律息息相關(guān)，包括提取、分離、制劑成型等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。中藥復(fù)方是分子、離子、締合物、復(fù)合物等多狀態(tài)共存的溶液體系，不同存在狀態(tài)間的作用力差異，導(dǎo)致在制藥關(guān)鍵環(huán)節(jié)，如醇沉、樹脂吸附、澄清化過濾等，難以取得一致的成分傳遞規(guī)律，影響制劑中間體及產(chǎn)品質(zhì)量均一性[1-2]。

目前，中藥成分存在狀態(tài)解析多通過紅外光譜、核磁共振技術(shù)綜合分析[3-4]，但是成分脫離原溶液環(huán)境，引起存在狀態(tài)比例或官能團(tuán)結(jié)合位點(diǎn)變化，難以進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)價(jià)，且僅能對(duì)存在狀態(tài)進(jìn)行定性分析，無法解讀復(fù)雜溶液體系中成分存在狀態(tài)比例。納濾作為常溫化分離的技術(shù)手段，截留相對(duì)分子質(zhì)量為100～1000，適用于荷電中藥成分精制[5-6]。前期研究發(fā)現(xiàn)[7-8]，溶質(zhì)存在狀態(tài)決定納濾分離行為，且分離過程中傳質(zhì)系數(shù)與溶質(zhì)濃度呈冪值相關(guān)，溝通“存在狀態(tài)-傳質(zhì)系數(shù)-溶質(zhì)濃度”的內(nèi)在聯(lián)系，提出傳質(zhì)系數(shù)是溶質(zhì)多種存在狀態(tài)分離綜合的假說，以期為中藥復(fù)雜溶液體系中成分狀態(tài)擬合分析提供理論基礎(chǔ)。

本實(shí)驗(yàn)以酸堿共存溶液體系丹參-枳實(shí)復(fù)方為研究對(duì)象，選擇丹參酚酸及枳實(shí)生物堿為指標(biāo)，計(jì)算膜通量、成分截留率，擬合傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型，以單體成分為參照，計(jì)算丹參-枳實(shí)復(fù)方藥液中原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林的存在狀態(tài)比例，闡明多狀態(tài)共存的復(fù)方溶液納濾分離機(jī)制，為中藥復(fù)方成分分離精制提供技術(shù)支撐。

1 儀器與材料

Fog-machine 中壓納濾泵、TNZ-1 型納濾分離組件，南京拓鉒醫(yī)藥科技有限公司；Waters e2695高效液相色譜儀、PDA 檢測(cè)器，美國(guó)Waters 公司；PB-10 型pH 計(jì)，德國(guó)Sartorius 公司；MS105DU 型十萬分之一電子天平，瑞士Mettler Toledo 集團(tuán)；KH-250B 型超聲波清洗器，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司；CS-60 型電熱型蒸煮爐，山東啟信廚業(yè)有限公司。

1812 型卷式膜，納濾膜截留相對(duì)分子質(zhì)量800、微濾膜孔徑0.45 μm，有效過濾面積0.30 m2，星達(dá)（泰州）膜科技有限公司；丹參、枳實(shí)飲片購(gòu)于安徽普仁中藥飲片有限公司，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室嚴(yán)輝副教授鑒定，分別為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根及根莖、蕓香科植物酸橙Citrus aurantiumL.的干燥幼果，符合《中國(guó)藥典》2020年版相關(guān)項(xiàng)下要求；對(duì)照品丹酚酸B（批號(hào)111562-201716，質(zhì)量分?jǐn)?shù)94.1%）、原兒茶醛（批號(hào)110810-201608，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.3%）、迷迭香酸（批號(hào)111871-201706，質(zhì)量分?jǐn)?shù)90.5%）、辛弗林（批號(hào)110727-201809，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.5%），中國(guó)食品藥品檢定研究院；提取物丹酚酸B（批號(hào)jbz0501，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、原兒茶醛（批號(hào)jbz1001，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、迷迭香酸（批號(hào)jbz0810，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、辛弗林（批號(hào)jbz0101，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.0%），南京金益柏生物科技有限公司；乙腈、甲醇、甲酸為色譜純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

2.1.1 丹參-枳殼復(fù)方溶液 稱取丹參飲片3.0 kg、枳殼飲片2.0 kg 置于電熱型蒸煮爐中常壓煎煮，加入10 倍純化水常壓煎煮2 次，每次為1.0 h，濾液采用0.45 μm 卷式微濾膜濾過，制得復(fù)方溶液。

2.1.2 單體成分溶液 根據(jù)復(fù)方溶液中原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林質(zhì)量濃度，分別稱取原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林提取物，采用純化水分別配制質(zhì)量濃度為85.20 μg/mL 的原兒茶醛單體溶液、42.50 μg/mL 迷迭香酸單體溶液、6.43 mg/mL 丹酚酸B 單體溶液、103.5 μg/mL 辛弗林單體溶液，根據(jù)復(fù)方溶液pH 值，分別調(diào)節(jié)單體成分溶液pH 值為5.40，超聲10 min，即得4 種單體成分溶液。

2.1.3 混合對(duì)照品溶液 分別精密稱取干燥至恒定質(zhì)量的丹酚酸B、迷迭香酸、原兒茶醛對(duì)照品6.50、1.82、2.55 mg，置于25 mL 棕色量瓶中，加入甲醇稀釋至刻度，得含3 種成分質(zhì)量濃度分別為260.0、84.0、102.0 μg/mL 的混合對(duì)照品溶液。

2.1.4 辛弗林對(duì)照品溶液 精密稱取干燥至恒定質(zhì)量的辛弗林對(duì)照品10.2 mg，置于10 mL 量瓶中，50%甲醇水溶液稀釋至刻度，得質(zhì)量濃度為1.02 mg/mL 辛弗林對(duì)照品溶液。

2.2 納濾分離

根據(jù)圖1 所示，組裝納濾分離設(shè)備，采用管路依次連接儲(chǔ)液罐、中壓泵、壓力表、納濾膜、截留閥，以及進(jìn)液、截留液、納濾液。供試品溶液置于儲(chǔ)液罐中，分離過程中通過中壓泵轉(zhuǎn)速以及截留閥調(diào)節(jié)分離壓力，進(jìn)行納濾分離，待儲(chǔ)液罐中溶質(zhì)質(zhì)量濃度趨于平穩(wěn)后，取樣平衡液，檢測(cè)納濾膜通量（Jv，m/s），進(jìn)而收集納濾液，高效液相檢測(cè)平衡液、納濾液中溶質(zhì)質(zhì)量濃度，計(jì)算截留率（R）。

C1、C2分別為溶質(zhì)在平衡液、納濾液中的質(zhì)量濃度

圖1 納濾分離設(shè)備Fig.1 Nanofiltration separation equipment

2.3 納濾傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型

前期研究發(fā)現(xiàn)[9-10]，中藥成分的納濾傳質(zhì)系數(shù)（k）與成分質(zhì)量濃度呈冪值相關(guān)，調(diào)節(jié)溶液環(huán)境以保障單體成分溶液中分子態(tài)與離子態(tài)比例與復(fù)雜溶液的一致性?；凇皞髻|(zhì)系數(shù)可以表征成分通過納濾膜孔的難易程度，且是多種存在狀態(tài)的綜合分離的表現(xiàn)”理論，擬合單體目標(biāo)成分傳質(zhì)系數(shù)，計(jì)算復(fù)雜溶液中目標(biāo)成分在達(dá)到相同傳質(zhì)系數(shù)時(shí)對(duì)應(yīng)的成分濃度，二者的濃差值，即為除了分子態(tài)、離子態(tài)的其他存在狀態(tài)。

取單體成分供試品溶液，采用純化水稀釋，分別稀釋1.25、2.5、5.0 倍，調(diào)節(jié)溶液pH 值為5.40，將供試品溶液置于納濾儲(chǔ)液罐中，調(diào)節(jié)納濾分離壓力分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 MPa，收集系列質(zhì)量濃度單體溶液不同操作壓力下的Jv、R。

根據(jù)式（1）擬合ln[Jv(1－R)/R]與Jv的線性方程，斜率為1/k，截距為ln(DK/δ)；δ為膜厚度（cm）；DK/δ用于表征膜傳質(zhì)性能（cm/s）。根據(jù)線性方程斜率計(jì)算k，通過式（2）計(jì)算k與溶質(zhì)初始質(zhì)量濃度C0的相關(guān)性，其中a為相關(guān)系數(shù)，n為冪值。

根據(jù)單體成分傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型中k與C0的相關(guān)性，進(jìn)行丹參-枳實(shí)復(fù)方溶液納濾分離，采用純化水稀釋分別稀釋1.25、2.5、5.0 倍，調(diào)節(jié)溶液pH 值為5.40，將復(fù)方溶液供試品溶液置于納濾儲(chǔ)液罐中收集系列濃度相應(yīng)條件下的Jv、R，根據(jù)式（1）計(jì)算k，根據(jù)式（2）擬合k與C0的相關(guān)性，方程回歸系數(shù)大于0.98，說明二者相關(guān)性強(qiáng)，傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型成立。基于成分存在狀態(tài)決定納濾傳質(zhì)行為的納濾分離理論，通過復(fù)方溶液中溶質(zhì)k值，計(jì)算單體溶液中C0，進(jìn)而對(duì)比相同溶質(zhì)在復(fù)方溶液和單體溶液中質(zhì)量濃度差異，計(jì)算溶質(zhì)發(fā)生復(fù)合反應(yīng)的比例。

2.4 樣品檢測(cè)

2.4.1 辛弗林 參考文獻(xiàn)中色譜條件[11]，分別精密吸取辛弗林對(duì)照品溶液0.1、0.5、1.0、2.0、5.0 mL置于10 mL 量瓶中，50%甲醇水溶液稀釋至刻度，高效液相色譜儀檢測(cè)，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y1），對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X1），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y1＝1 340.2X1＋26 711，R2＝0.999 3，結(jié)果表明辛弗林在10.2～510.0 μg/mL線性關(guān)系良好。

2.4.2 丹參酚酸 參考文獻(xiàn)中色譜條件[7]，分別精密吸取混合對(duì)照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、1.0 mL置于1 mL 棕色量瓶中，甲醇稀釋至刻度，高效液相色譜儀檢測(cè)，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：原兒茶醛Y＝1 068.8X＋641.53，R2＝0.999 1；迷迭香酸Y＝6 248.2X－8 873.7，R2＝0.999 4；丹酚酸BY＝3 363.1X－9 776.9，R2＝ 0.999 3；結(jié)果表明原兒茶醛在10.2～102.0 μg/mL、迷迭香酸在7.28～72.8 μg/mL、丹酚酸B 在26.0～260.0 μg/mL 線性關(guān)系良好。

精密度RSD 為原兒茶醛0.76%、迷迭香酸0.85%、丹酚酸B 1.13%；重復(fù)性RSD 為原兒茶醛1.12%、迷迭香酸1.40%、丹酚酸B 1.78%；加樣回收率分別為原兒茶醛100.75%、迷迭香酸97.40%、丹酚酸B 102.20%，RSD 分別為1.82%、2.11%、2.32%；該方法精密度、重復(fù)性和加樣回收率均符合要求，供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5 操作壓力與膜通量的相關(guān)性

不同成分在系列操作壓力下的膜通量如圖2 所示，隨著納濾壓力增加，驅(qū)動(dòng)力增加，膜通量呈現(xiàn)出升高趨勢(shì)，其中原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林水溶液的相關(guān)性散點(diǎn)圖分布相對(duì)集中，計(jì)算壓力（P）和膜通量的相關(guān)性，結(jié)果如表1 所示，二者線性關(guān)系良好，4 種成分的線性方程回歸系數(shù)R2均大于0.96。丹參-枳實(shí)復(fù)方溶液出現(xiàn)通量增加進(jìn)而平緩的趨勢(shì)，壓力和膜通量的相關(guān)性方程回歸系數(shù)為0.940 6，提示在復(fù)方溶液納濾分離時(shí)，隨著壓力升高，納濾膜表面因出現(xiàn)濃差極化，膜通量趨于穩(wěn)定。

圖2 壓力對(duì)納濾膜通量的影響Fig.2 Effect of pressure on nanofiltration flux

表1 壓力與納濾膜通量的線性方程Table 1 Linear equation of pressure and nanofiltration flux

2.6 壓力對(duì)成分截留率的影響

2.6.1 單體成分 分析圖3-a 中操作壓力對(duì)成分分離行為的影響，其中隨著壓力升高，成分均呈現(xiàn)出截留率輕微下降的趨勢(shì)，且壓力越高，此趨勢(shì)越明 顯，說明高壓力環(huán)境下的納濾分離過程，出現(xiàn)濃差極化[12]，致使膜表面成分濃度高于溶液環(huán)境，在道南效應(yīng)和溶解-擴(kuò)散效應(yīng)的協(xié)同下[13-14]，成分透過納濾膜。此外，原兒茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B 分離符合孔徑篩分模型，而辛弗林在pH 值為5.4 時(shí)，多以離子態(tài)形式存在，雖相對(duì)分子質(zhì)量與原兒茶醛相近，在道南效應(yīng)作用下，截留率稍高于原兒茶醛。

圖3 壓力對(duì)成分截留率的影響Fig.3 Effect of pressure on component rejection

2.6.2 丹參-枳實(shí)復(fù)方溶液 對(duì)比圖3-a 和圖3-b，相較于單體溶液，復(fù)方溶液中4 種指標(biāo)性成分截留率均明顯升高，結(jié)合成分的物化性質(zhì)，推測(cè)丹參、枳實(shí)提取時(shí)，發(fā)生酸堿復(fù)合反應(yīng)[15]，成分空間尺寸增加，基于納濾孔道位阻效應(yīng)，復(fù)合態(tài)形式存在的成分難以通過納濾膜，出現(xiàn)截留率升高的現(xiàn)象。根據(jù)截留率變化可以初步判斷成分存在狀態(tài)變化規(guī)律，但是對(duì)于闡明存在狀態(tài)比例存在局限性。

2.7 成分存在狀態(tài)擬合

2.7.1 原兒茶醛 對(duì)不同質(zhì)量濃度、溶液條件下的原兒茶醛的ln[Jv(1－Ro)/Ro]和Jv進(jìn)行相關(guān)性擬合，結(jié)果見圖4，根據(jù)相關(guān)性散點(diǎn)分布圖，可以看出， ln[Jv(1－Ro)/Ro]和Jv呈現(xiàn)線性相關(guān)性，對(duì)比原兒茶醛單體溶液和復(fù)方溶液，散點(diǎn)分布存在差異，說明不同溶液環(huán)境影響原兒茶醛的納濾傳質(zhì)行為。進(jìn)而對(duì)傳質(zhì)系數(shù)k與原兒茶醛質(zhì)量濃度C進(jìn)行冪相關(guān)擬合，結(jié)果見圖5，二者呈現(xiàn)較高的冪值相關(guān)，回歸系數(shù)均大于0.99，納濾傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型成立。

圖4 原兒茶醛ln[Jv(1－Ro)/Ro]對(duì)JV 的相關(guān)性Fig.4 Correlation between ln[Jv(1－Ro)/Ro] and Jv of protocatechuic aldehyde

圖5 原兒茶醛納濾傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性曲線Fig.5 Correlation curve between k and C of protocatechuic aldehyde

納濾分離時(shí)溶質(zhì)存在狀態(tài)決定了納濾傳質(zhì)行為，pH 值為5.4 時(shí)，原兒茶醛主要以分子態(tài)形式存在，以原兒茶醛單體溶液為參照，根據(jù)傳質(zhì)系數(shù)與濃度的相關(guān)性方程，計(jì)算復(fù)方提取液中以復(fù)合態(tài)形式存在的原兒茶醛質(zhì)量濃度，結(jié)果見表2，隨著復(fù)方提取液的逐步稀釋，溶液中以原兒茶醛存在狀態(tài)相對(duì)穩(wěn)定，大部分以分子態(tài)形式存在，丹參、枳實(shí)提取液原液中以復(fù)合態(tài)形式存在的比例為26.17%。

表2 復(fù)方溶液中原兒茶醛復(fù)合態(tài)比例Table 2 Composite state proportion of protocatechuic aldehyde in complex solution

2.7.2 迷迭香酸 擬合迷迭香酸ln[Jv(1－Ro)/Ro]和Jv的相關(guān)性，結(jié)果見圖6，ln[Jv(1－Ro)/Ro]與Jv呈現(xiàn)線性相關(guān)性，回歸系數(shù)均大于0.98。根據(jù)線性方程斜率計(jì)算傳質(zhì)系數(shù)，進(jìn)而與質(zhì)量濃度進(jìn)行冪相關(guān)擬合，結(jié)果見圖7，二者呈現(xiàn)良好的冪值相關(guān)，回歸系數(shù)均大于0.99，納濾傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型成立。

圖6 迷迭香酸ln[Jv(1－Ro)/Ro]對(duì)Jv 的相關(guān)性Fig.6 Correlation between ln[Jv(1－Ro)/Ro] and Jv of rosmarinic acid

圖7 迷迭香酸納濾傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性曲線Fig.7 Correlation curve between k and C0 of rosmarinic acid

迷迭香酸解離常數(shù)為4.10，在pH 值為5.4 時(shí)，主要以單分子形式的離子態(tài)存在，根據(jù)迷迭香酸單體成分傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性方程，計(jì)算復(fù)方溶液中相應(yīng)傳質(zhì)系數(shù)下的對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃度，進(jìn)而計(jì)算復(fù)方提取液中迷迭香酸復(fù)合態(tài)存在的比例，結(jié)果見表3，其中復(fù)方提取液中占比為79.87%。同時(shí)，在相同溶質(zhì)質(zhì)量濃度環(huán)境下，復(fù)方提取液中傳質(zhì)系數(shù)同比下降，說明迷迭香酸因酸堿復(fù)合引起的成分存在狀態(tài)變化。同時(shí)，隨著復(fù)方提取液的稀釋，迷迭香酸存在狀態(tài)相對(duì)穩(wěn)定。

表3 復(fù)方溶液中迷迭香酸復(fù)合態(tài)比例Table 3 Composite state proportion of rosmarinic acid in complex solution

2.7.3 丹酚酸B 擬合丹酚酸B ln[Jv(1－Ro)/Ro]和Jv的相關(guān)性，結(jié)果見圖8，ln[Jv(1－Ro)/Ro]與Jv呈現(xiàn)線性相關(guān)性，回歸系數(shù)均大于0.98。進(jìn)而擬合傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性，結(jié)果見圖9，二者呈現(xiàn)良好的冪值相關(guān)，回歸系數(shù)均大于0.99，納濾傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型成立。

圖8 丹酚酸B ln[Jv(1－Ro)/Ro]對(duì)Jv 的相關(guān)性Fig.8 Correlation between ln[Jv(1－Ro)/Ro] and Jv of salvianolic acid B

圖9 丹酚酸B 納濾傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性曲線Fig.9 Correlation curve between k and C of salvianolic acid B

丹酚酸B 解離常數(shù)為2.77，在pH 5.4 時(shí)，主要以離子態(tài)形式存在，其中復(fù)方溶液中丹酚酸B 截留率高于單體溶液，提示復(fù)方提取液中存在復(fù)合反應(yīng)引起成分存在狀態(tài)變化，根據(jù)丹酚酸B 單體成分傳 質(zhì)系數(shù)與濃度的相關(guān)性方程，計(jì)算復(fù)方溶液中相應(yīng)傳質(zhì)系數(shù)下的發(fā)生復(fù)合反應(yīng)的丹酚酸B 質(zhì)量濃度，結(jié)果見表4，復(fù)方提取液中占比為89.15%。結(jié)合表2、3 中數(shù)據(jù)，丹參、枳實(shí)復(fù)方提取過程中，酚酸和 生物堿之間存在復(fù)合反應(yīng)，其中反應(yīng)發(fā)生的程度為丹酚酸B＞迷迭香酸＞原兒茶醛，其中丹酚酸B 和迷迭香酸主要以復(fù)合態(tài)形式存在與復(fù)方提取液中，而原兒茶醛主要以分子態(tài)形式存在。

表4 復(fù)方溶液中丹酚酸B 復(fù)合態(tài)比例Table 4 Composite state proportion of salvianolic acid B in complex solution

2.7.4 辛弗林 從圖10 可知，ln[Jv(1－Ro)/Ro]與Jv呈現(xiàn)線性正相關(guān)，擬合傳質(zhì)系數(shù)與辛弗林濃度的相關(guān)性，結(jié)果見圖11，在單體溶液和提取液中均呈冪值相關(guān)，且回歸系數(shù)大于0.98，納濾傳質(zhì)模型成立。辛弗林解離常數(shù)在8.57 左右，在pH 值為5.4 溶液 環(huán)境下，主要以離子態(tài)形式存在，經(jīng)過擬合計(jì)算辛弗林存在狀態(tài)（表5），復(fù)方提取液中辛弗林以復(fù)合態(tài)形式存在，其傳質(zhì)系數(shù)較單體溶液明顯下降。

圖10 辛弗林ln[Jv(1－Ro)/Ro]對(duì)Jv 的相關(guān)性Fig.10 Correlation between ln[Jv(1－Ro)/Ro] and Jv of synephrine

圖11 辛弗林納濾傳質(zhì)系數(shù)與質(zhì)量濃度的相關(guān)性曲線Fig.11 Correlation curve between k and C of synephrine

表5 復(fù)方溶液中辛弗林復(fù)合態(tài)比例Table 5 Composite state proportion of synephrine in complex solution

綜合對(duì)比表2～5，經(jīng)過丹參、枳實(shí)配伍提取，結(jié)合成分存在狀態(tài)與傳質(zhì)系數(shù)的相關(guān)性，復(fù)方提取液中生物堿主要與迷迭香酸、丹酚酸B 發(fā)生復(fù)合反應(yīng)。相較于單體成分，復(fù)方提取液中原兒茶醛截留率升高5%左右，但仍有26.17%的原兒茶醛與枳實(shí)中生物堿發(fā)生復(fù)合反應(yīng)，改變其納濾傳質(zhì)行為。

3 討論

成分存在狀態(tài)決定了物化性質(zhì)，影響中藥制藥過程中的成分傳遞規(guī)律和制劑質(zhì)量均一性。中藥復(fù)雜溶液體系，成分間作用行為復(fù)雜，難以借助檢測(cè)手段予以表征，目前采用核磁共振、紅外掃描、X衍射技術(shù)需要改變成分所在溶液環(huán)境，或采取固體狀態(tài)進(jìn)行分析，僅能對(duì)可能存在的分子間作用行為進(jìn)行定性評(píng)估，難以定量評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)研究丹參-枳實(shí)復(fù)方，是基于丹參中水溶性酚酸類成分呈現(xiàn)出分子量、解離常數(shù)呈現(xiàn)梯度差異，在考察酸堿復(fù)合反應(yīng)對(duì)納濾分離的影響時(shí)，枳實(shí)中代表性生物堿辛弗林與丹參酚酸類成分發(fā)生酸堿復(fù)合反應(yīng)，引起成分存在狀態(tài)改變和分離行為變化，但分離機(jī)制不清 晰，因此探索復(fù)雜溶液體系中成分存在狀態(tài)定量計(jì)算方法。

基于納濾傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型中成分狀態(tài)與傳質(zhì)行為的相關(guān)性，在相同質(zhì)量濃度、pH 值質(zhì)量條件下，選擇單體成分為參照，擬合濃度與傳質(zhì)系數(shù)的冪值方程，構(gòu)建復(fù)方溶液中成分狀態(tài)解析模式。丹參-枳實(shí)復(fù)方溶液中以復(fù)合態(tài)形式存在的比例為原兒茶醛26.17%，迷迭香酸79.87%，丹酚酸B 89.15%，辛弗林96.92%，成分的納濾分離效果是多種存在狀態(tài)協(xié)同的體現(xiàn)，其中迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林主要以復(fù)合態(tài)形式分離，而原兒茶醛主要以分子態(tài)形式分離。中藥復(fù)方配伍衍生出多成分、多狀態(tài)共存的復(fù)雜溶液環(huán)境，如枳實(shí)理中湯加丹參飲，方中除了丹參、枳實(shí)外還包括干姜、炙甘草、砂仁等中藥，存在酸堿復(fù)合反應(yīng)、皂苷-揮發(fā)油締合反應(yīng)等，通過微濾預(yù)處理降低不溶性微粒引起的膜組件污染，保障膜通量，理論上適用于復(fù)雜溶液中成分存在狀態(tài)解析。

中藥成分結(jié)構(gòu)多樣，分子量分布廣泛，而所構(gòu)建的復(fù)方溶液中成分狀態(tài)解析模式是基于水溶液環(huán)境，同時(shí)納濾膜截留相對(duì)分子質(zhì)量在100～1000，針對(duì)有機(jī)溶液環(huán)境，以及相對(duì)分子質(zhì)量超出納濾分離范圍的中藥成分存在狀態(tài)解析應(yīng)用中存在局限性。因此，圍繞有機(jī)溶液環(huán)境下的納濾分離機(jī)制，超濾傳質(zhì)行為與溶質(zhì)濃度的相關(guān)性研究拓展成分狀態(tài)解析模式應(yīng)用范圍的關(guān)鍵[16-18]。基于傳質(zhì)數(shù)學(xué)模型研究中藥復(fù)方中成分存在狀態(tài)，進(jìn)而闡明納濾分離機(jī)制，對(duì)于指導(dǎo)制藥過程中的成分精制分離、提升納濾技術(shù)的適用性提供了技術(shù)支撐。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突