楊運(yùn)云

(廣東省科學(xué)院測試分析研究所(中國廣州分析測試中心)，廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測技術(shù)重點(diǎn)實驗室，廣東省原位電離質(zhì)譜分析工程技術(shù)中心，廣東 廣州 510070)

1 實驗部分

1.1 儀器與裝置

LTQ-Orbitrap Elite線性離子阱-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜儀：美國Thermo Fisher公司產(chǎn)品；BG12-94-4-N-20納升電噴霧針：美國New objective公司產(chǎn)品；三維移動平臺、254 nm紫外燈：美國Burdick & Jackson公司產(chǎn)品。

1.2 樣品與試劑

甲醇、氯仿：色譜純，美國Burdick & Jackson公司產(chǎn)品；二苯甲酮：美國Sigma-Aldrich公司產(chǎn)品；TAG[18∶3(Δ9,12,15)/18∶3(Δ9,12,15)/18∶3(Δ9,12,15)]：瑞典Larodan AB公司產(chǎn)品；花生油：購自廣州某超市。

1.3 實驗條件

將1 μL花生油溶解于1 mL含有0.4 mg/L二苯甲酮的甲醇-氯仿溶液(9∶1，V/V)中，用納升電噴霧針吸取2 μL樣品溶液，置于254 nm紫外燈下照射1 min，進(jìn)行PB光化學(xué)反應(yīng)。然后，將一根不銹鋼絲插入納升電噴霧針中，保持與樣品溶液接觸，并將不銹鋼絲與納升電噴霧針組裝至三維移動平臺上，使納升電噴霧針的尖端對準(zhǔn)質(zhì)譜入口，距離質(zhì)譜入口約5 mm。隨后，向不銹鋼絲施加+3.0 kV高壓電場，誘導(dǎo)納升電噴霧針內(nèi)部的溶液產(chǎn)生納升電噴霧電離，在常壓敞開條件下直接進(jìn)行質(zhì)譜分析。采用LTQ-Orbitrap-MS全掃描模式獲得質(zhì)譜圖，質(zhì)量掃描范圍m/z100～1 500，質(zhì)量分辨率120 000，CID模式進(jìn)行多級質(zhì)譜分析，Xcalibur 2.2軟件進(jìn)行儀器控制和數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與討論

2.1 PB-nanoESI-MS對甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品的結(jié)構(gòu)鑒定

圖1 PB-nanoESI-MS鑒定不飽和甘油三酯CC雙鍵的過程示意圖 Fig.1 Schematic illustration for the identification of CC locations in unsaturated triglycerides by PB-nanoESI-MS

圖2 TAG標(biāo)樣的nanoESI-MS(a), PB-nanoESI-MS(b)和[M+BP+Na]+離子CID(c)質(zhì)譜圖Fig.2 Mass spectra of nanoESI-MS (a), PB-nanoESI-MS (b) and CID of [M+BP+Na]+ (c) of a TAG standard

2.2 PB-nanoESI-MS對花生油中甘油三酯的結(jié)構(gòu)鑒定

采用所建立的PB-nanoESI-MS方法分析食用花生油，在進(jìn)行PB光化學(xué)反應(yīng)前，先對花生油樣品進(jìn)行nanoESI-MS分析，所得質(zhì)譜圖示于圖3a，在m/z800～1 000質(zhì)量范圍內(nèi)可觀察到一系列豐度較高的TAGs信號。通過高分辨質(zhì)譜的精確質(zhì)量數(shù)測定和脂質(zhì)數(shù)據(jù)庫LIPID MAPS檢索，可推導(dǎo)出這些TAG可能的分子式。例如，強(qiáng)度較高的信號m/z853.724 7、855.740 7、877.726 1、879.741 0、881.756 5、883.772 0、901.725 2、903.741 0、905.755 9、907.771 1、909.787 6和911.802 9經(jīng)LIPID MAPS檢索分別為[TAG(50∶2)+Na]+、[TAG(50∶1)+Na]+、[TAG(52∶4)+Na]+、[TAG(52∶3)+Na]+、[TAG(52∶2)+Na]+、[TAG(52∶1)+Na]+、[TAG(54∶6)+Na]+、[TAG(54∶5)+Na]+、[TAG(54∶4)+Na]+、[TAG(54∶3)+Na]+、[TAG(54∶2)+Na]+和[TAG(54∶1)+Na]+。

圖3 花生油的nanoESI-MS(a), PB-nanoESI-MS(b), m/z 1 063.829 5離子CID(c)質(zhì)譜圖Fig.3 Mass spectra of nanoESI-MS (a), PB-nanoESI-MS (b) and CID of 1 063.829 5 (c) from peanut oil

表1 PB-nanoESI-MS鑒定花生油中不飽和甘油三酯化合物Table 1 Identified unsaturated triacylglycerols from peanut oil by PB-nanoESI-MS

3 結(jié)論