劉彪

山東省單縣中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東單縣274300

上皮性卵巢癌的發(fā)病率和病死率均明顯的上升，流行病學(xué)研究表明[1]，上皮性卵巢癌的發(fā)病率可達(dá)（495～694）/1萬人左右。臨床上上皮性卵巢癌的發(fā)生，能夠?qū)е禄颊?年生存率和無瘤生存時間的縮短，導(dǎo)致患者短期內(nèi)生存預(yù)后的惡化[2]。生物學(xué)實驗研究顯示，上皮性卵巢癌的增殖、凋亡過程與生物因子改變有關(guān)，生物因子通過調(diào)節(jié)腫瘤相關(guān)信號通路，促進(jìn)卵巢癌的病情進(jìn)展和阻斷。果蠅ft同源基因（FAT4）是重要的腫瘤瘤的發(fā)展，提高癌細(xì)胞的mRNA轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而持續(xù)性促進(jìn)上皮性惡性腫瘤的擴增和轉(zhuǎn)錄過程，促使腫瘤細(xì)胞增殖，提高癌細(xì)胞的異變和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的風(fēng)險[3-4]。該文選取2018年2月—2020年2月該院保存的卵巢癌組織標(biāo)本92例，探討了FAT4、YAP1的表達(dá)與上皮性卵巢癌發(fā)展的臨床相關(guān)性及內(nèi)部機制，為臨床上皮性卵巢癌治療提供參考和提示，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院檢驗科室保存的卵巢癌組織標(biāo)本為研究對象，總樣本數(shù)為92例，將其納入觀察組，年齡26～65歲，平均年齡（50.15±9.81）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理學(xué)確診；②術(shù)前未行放化療等抗腫瘤治療；③醫(yī)院倫理會同意，且與家屬簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有其他惡性腫瘤者；②臨床資料不完整。同時選取卵巢良性腫瘤標(biāo)本90例作為對照組，年齡28～68歲，平均年齡（50.10±10.24）歲。兩組瘤患者年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=-1.312，P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

將樣本進(jìn)行石蠟固定，脫水切片，然后脫蠟并在20℃環(huán)境下的H2O2中孵育10 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次。每日用封閉液（8%蛋白粉）進(jìn)行封閉2 h，然后進(jìn)行抗原拮抗（兔來源濃度1:1 000～1 500）；拮抗后用用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次，并在4℃冰箱靜待12 h；取出樣品，并進(jìn)行二次抗原拮抗（鼠來源1:400～500），然后在20℃環(huán)境下孵育20～30 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次；然后，進(jìn)行標(biāo)記物標(biāo)記（辣根酶或堿性磷酸酶），室溫孵育在20℃環(huán)境下孵育10 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次，最后加入著色劑，并進(jìn)行二次復(fù)染，脫水和封片。

1.3 處理結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

FAT4、YAP1陽性表達(dá)主要定位于胞質(zhì)，呈黃色顆粒狀物質(zhì)，每張切片取出>10個視野（隨機且無重復(fù)），每個目鏡下統(tǒng)計>100個腫瘤細(xì)胞，①著色效果評分：陽性細(xì)胞比例＜10%為0分，10%～25%為1分，＞25%～75%為2分，＞75%為3分；②染色強度評分：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩項評分之和，≤3分為陰性表達(dá)，≥3分為陽性表達(dá)。

1.4 觀察指標(biāo)

觀察兩組的FAT4、YAP1陽性率、年齡、腫瘤直徑、FIGO分期、病理分級、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，以及FAT4與YAP1相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計方法

利用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Spearman相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組FAT4、YAP1表達(dá)比較

觀察組的FAT4和YAP1蛋白陽性率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。卵巢癌與卵巢良性腫瘤的免疫組化見圖1。

圖1 卵巢癌與卵巢良性腫瘤的免疫組化組Figure 1 Immunohistochemistry of ovarian cancer and benign ovarian tumors

表1 兩組FAT4、YAP1表達(dá)比較[n(%)]Table 1 Comparison of FAT4 and YAP1 expression between the two groups[n(%)]

2.2 FAT4陽性率與卵巢癌臨床資料關(guān)系

病理分級為低分化的患者中，F(xiàn)AT4蛋白陽性率與高分化+中分化組患者對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 FAT4陽性率與卵巢癌臨床資料關(guān)系[n(%)]Table 2 Relationship between the positive rate of FAT4 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.3 YAP1陽性率與卵巢癌臨床資料關(guān)系

低分化、漿液類型的患者中，YAP1蛋白陽性率與高分化+中分化、黏液類型的患者對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 YAP1陽性率與卵巢癌臨床資料關(guān)系[n(%)]Table 3 Relationship between the positive rate of YAP1 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.4 FAT4與YAP1表達(dá)率的相關(guān)性分析

將卵巢癌患者FAT4與YAP1表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示：FAT4與YAP1表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.479，P<0.05），見表4。

表4 FAT4和YAP1表達(dá)率的相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis of expression rate of FAT4 and YAP1

3 討論

上皮性卵巢癌的病情進(jìn)展率較高，短期內(nèi)可合并有明顯的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或者盆腔腹腔轉(zhuǎn)移，長期的臨床隨訪觀察研究發(fā)現(xiàn)，上皮性卵巢癌的3年生存率不足40%，綜合性治療措施治療后，上皮性卵巢癌患者的無瘤生存時間不足18個月[5-6]。現(xiàn)階段臨床上缺乏上皮性卵巢癌可靠性分子標(biāo)志物，雖然癌胚抗原或者糖鏈抗原125能夠在上皮性卵巢癌的診療過程中發(fā)揮重要的參考作用，但一項囊括了204例樣本量的上皮性卵巢癌分子生物學(xué)相關(guān)研究證實，依靠癌胚抗原或者糖鏈抗原評估卵巢癌發(fā)生風(fēng)險或者臨床預(yù)后靈敏度仍然較低，其對于卵巢癌的標(biāo)志性作用仍然不足。而該次研究中觀察組的FAT4和YAP1蛋白陽性表達(dá)率分別為73.91%和76.09%，明顯高于對照組（P<0.05）,胡紫薇等[7]認(rèn)卵巢癌組中FAT4的陽性表達(dá)率為（72.23±1.22）%，大于70%,YAP1蛋白陽性表達(dá)率為（76.82±0.32）%，大于75%，且YAP1蛋白陽性表達(dá)率大于FAT4的陽性表達(dá)率，與該文研究保持一致，也提示上皮性卵巢中的FAT4、YAP1可以作為臨床上卵巢癌診療提供理論方面的參考。國內(nèi)研究認(rèn)為FAT4是果蠅ft基因家族成員，其能夠通過對于癌細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的磷酸化修飾作用，提高核轉(zhuǎn)錄基因的激活程度，促進(jìn)癌細(xì)胞的變形能力、浸潤能力等能力的改變。FAT4使癌變細(xì)胞周圍組織出現(xiàn)mRNA轉(zhuǎn)錄異常，促進(jìn)癌細(xì)胞對附近正常組織的浸潤，實現(xiàn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[8]；YAP1是yes相關(guān)蛋白，其作為HIPPO信號通路上重要的效應(yīng)分子，能夠通過誘導(dǎo)下游腫瘤相關(guān)蛋白的上調(diào)，促進(jìn)癌細(xì)胞細(xì)胞周期的調(diào)控紊亂，抑制癌細(xì)胞的凋亡[9]。基礎(chǔ)方面的研究也認(rèn)為，YAP1的表達(dá)上升能夠促進(jìn)癌細(xì)胞內(nèi)下游cycclin D1的表達(dá)，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞的分化，導(dǎo)致癌細(xì)胞異型性的顯著改變[10]，上述分析進(jìn)一步驗證該文研究結(jié)果。

國內(nèi)外研究資料顯示[11-13]：FAT4、YAP1參與上皮性卵巢癌的發(fā)展：①FAT4的上升能夠促進(jìn)癌細(xì)胞基因錯配修復(fù)能力的下降，導(dǎo)致癌基因的激活程度的上升，影響到了癌細(xì)胞的正常分化成熟過程；②YAP1陽性率的升高，可以活化HIPPO下游信號通路，增強周圍正常組織的mRNA的異化程度，持續(xù)性促進(jìn)卵巢上皮細(xì)胞的增殖。羅曉等研究者[14]也認(rèn)為，卵巢癌病變組織中，YAP1蛋白的陽性率高于正常組織30%以上，良性病變組織20%以上。部分出現(xiàn)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的合并有盆、腹腔癌的患者，遠(yuǎn)端病變組織中YAP1蛋白的陽性率是原發(fā)病變組織中陽性率的20%，進(jìn)一步說明YAP1蛋白的陽性率與上皮性卵巢癌的增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移有關(guān)。該文的免疫組化染色分析結(jié)果顯示：病變組織中FAT4、YAP1蛋白集中于間質(zhì)，或者細(xì)胞膜，提示FAT4、YAP1參與細(xì)胞間或者癌細(xì)胞內(nèi)信號的傳遞，進(jìn)而影響到卵巢癌的病情進(jìn)展過程。在探討FAT4、YAP1的表達(dá)與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系過程中，可以發(fā)現(xiàn)在臨床病理分級較差的患者中，F(xiàn)AT4蛋白的表達(dá)明顯上升，胡紫薇等[7]認(rèn)為FAT4蛋白的表達(dá)明與病理分級存在正相關(guān)性，與該文相關(guān)研究結(jié)果一致。同時，該文研究結(jié)果也提示了FAT4的表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理特征的關(guān)系，提示FAT4蛋白陽性率參與周圍組織，或者癌變組織mRNA的轉(zhuǎn)錄異化，促進(jìn)周圍細(xì)胞的癌變，或者加劇癌細(xì)胞病理分級的進(jìn)展程度，相關(guān)研究認(rèn)為[15-17]，F(xiàn)AT4參與卵巢癌組織的mRNA轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)細(xì)胞癌變和分級，與該文研究結(jié)果一致；而病理分級為低分化、漿液性癌患者YAP1蛋白陽性表達(dá)率明顯的上升，提示了YAP1蛋白的表達(dá)與卵巢癌患者病情的關(guān)系，提示YAP1蛋白陽性率上述，加速癌細(xì)胞的分化，促使其增殖、惡化，甚至遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移，相關(guān)研究結(jié)果顯示[18-21]，YAP1在卵巢癌分化、轉(zhuǎn)移過程中，呈現(xiàn)陽性表達(dá)，與遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移相關(guān)，與該文研究結(jié)果一致。卵巢癌組織FAT4與YAP1表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.479，P<0.05）可 見，F(xiàn)AT4與YAP1表 達(dá) 呈 正 相 關(guān)，提 示 了FAT4、YAP1在促進(jìn)卵巢癌病情進(jìn)展的過程中可能發(fā)揮了一定的協(xié)同作用，相關(guān)研究結(jié)果顯示[22-24]，F(xiàn)AT4、YAP1與卵巢癌的嚴(yán)重程度存在正相關(guān)性，并參與卵巢癌病情的發(fā)展，與該文相關(guān)研究結(jié)果一致。

綜上所述，上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表達(dá)明顯升高，與患者臨床病理特征有一定關(guān)聯(lián)，值得進(jìn)一步研究。該次研究的局限性在于未能探討FAT4、YAP1的表達(dá)與卵巢癌的生存預(yù)后的關(guān)系。