雷 杰 吳 玲 王 楠 鄧 麗 謝 貝 牛 群 楊 瑜 劉志輝 孟繁榮

廣州市胸科醫(yī)院 廣東廣州 510095

非結(jié)核分枝桿菌(Non-tuberculous mycobacteria， NTM)是指除外結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、麻風(fēng)分枝桿菌的分枝桿菌，廣泛存在于自然的各種環(huán)境中，是人類條件致病菌種，已成為威脅人類健康的重要公共衛(wèi)生問題之一[1-4]。目前NTM感染在發(fā)達(dá)國家呈不斷上升趨勢，在發(fā)展中國家或落后國家則因總體檢測能力有限而對其了解不太清楚，我國也缺乏流行病學(xué)大樣本或全人群的研究報道[5-6]。為了解廣州地區(qū)NTM菌種分布及其在人群中的流行特征，我們對廣東省分枝桿菌菌株庫中資料齊備的NTM臨床分離株的相關(guān)情況進(jìn)行了分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2016—2019年廣東省分枝桿菌菌株庫中所有年齡、性別、住址等資料齊全的患者NTM分離菌株。

1.2 實(shí)驗方法

應(yīng)用BD公司BACTEC MGIT960系統(tǒng)進(jìn)行分枝桿菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基使用儀器系統(tǒng)配套試劑，應(yīng)用杭州創(chuàng)新生物檢控技術(shù)有限公司生產(chǎn)的“結(jié)核分枝桿菌抗原檢測試劑盒”進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌復(fù)群和NTM分群，應(yīng)用成都博奧晶芯生物科技有限公司生產(chǎn)的分枝桿菌菌種鑒定試劑盒(DNA 微陣列芯片法)進(jìn)行NTM菌種鑒定，具體實(shí)驗操作嚴(yán)格按儀器與試劑說明書進(jìn)行。

1.3 NTM分離患者年齡、地域分組

將NTM菌株來源患者分為 <45歲、45～60歲、>60歲3個年齡組，按中心城區(qū)、城郊結(jié)合部與郊區(qū)分為3個地域，其中中心城區(qū)包括越秀區(qū)、海珠區(qū)、荔灣區(qū)、天河區(qū)4個行政區(qū)劃，城郊結(jié)合部(中心城區(qū)之外且其外圍還有其它行政區(qū)劃者)包括白云區(qū)、番禺區(qū)、黃埔區(qū)3個行政區(qū)劃，郊區(qū)(指城郊結(jié)合部之外行政區(qū)劃)包括南沙區(qū)、花都區(qū)、從化區(qū)、蘿崗區(qū)4個行政區(qū)劃。

1.4 患者資料查詢

在廣東省分枝桿菌菌株庫信息庫中搜尋所有NTM菌株信息，將信息導(dǎo)入EXCEL 2007表格；將年齡、性別、住址等患者資料齊全的NTM菌株資料進(jìn)行整理，分析其流行病學(xué)的三間分布。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用EXCEL 2007表格收集、整理、統(tǒng)計分析資料，利用頻數(shù)分布計算百分構(gòu)成(%)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)描述。

2 結(jié)果

2.1 NTM菌株菌種分布特征及2016—2019年的年度變化趨勢 552株NTM臨床患者分離株納入分析，菌種包括鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群、堪薩斯分枝桿菌、龜-膿腫分枝桿菌復(fù)合群、戈登分枝桿菌、偶然分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌、瑪爾摩分枝桿菌、草分枝桿菌、蟾蜍分枝桿菌、恥垢分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌等11種NTM，其中：鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群、堪薩斯分枝桿菌、龜-膿腫分枝桿菌復(fù)合群、戈登分枝桿菌、偶然分枝桿菌等百分構(gòu)成順位前5位菌種分別占61.41%、17.03%、10.07%、5.98%和3.26%。就此前5位菌種年間變異趨勢看，鳥-胞內(nèi)分枝桿菌呈現(xiàn)明顯上升趨勢，其百分構(gòu)成由2016年的45.21%上升到2019年的74.24%，龜-膿腫、戈登、偶然與呈逐年下降趨勢，堪薩斯則在小范圍內(nèi)波動。具體情況見表1和圖1。

表1 552株非結(jié)核分枝桿菌菌種鑒定結(jié)果

圖1 頻數(shù)前5位非結(jié)核分枝桿菌株年度變異趨勢

2.2 552株NTM對應(yīng)患者的人口學(xué)特征

在552株NTM分離患者中，男292例、女260例，男女性別構(gòu)成分別為52.90%、47.10%。在<45歲、45～60歲和 >60歲3個患者群中，其百分構(gòu)成在男女性別中均隨年齡的增大而升高，詳見表2。

表2 552株非結(jié)核分枝桿菌對應(yīng)患者的人口學(xué)特征 (n)

2.3 552株NTM對應(yīng)患者的地域分布

在552株NTM分離患者中，中心城區(qū)、城郊結(jié)合部、城市郊區(qū)患者數(shù)分別335例、137例和80例，分別占60.69%、24.82%和14.49%(具體情況見表3)。

表3 552株非結(jié)核分枝桿菌對應(yīng)患者的地域分布

4 討論

自報道NTM以來，迄今為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)超過180種，而且隨著時間推移發(fā)現(xiàn)種類還在不斷增加，雖然僅有少量菌種會引起人類疾病[7]，但是全球NTM感染性疾病呈現(xiàn)不斷上升趨勢，無論是發(fā)達(dá)國家還是發(fā)展中國家或落后國家[8]。對于我國NTM疾病的流行情況，Liu等[9]的研究顯示在分枝桿菌培養(yǎng)樣本中我國的NTM分離率為6.4%(317/4 917)，也有研究表明在我國結(jié)核可疑癥狀者中NTM分離率由2004—2009年的1.6%上升到2012—2017年的3.13%[10]，2010年全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查則報告NTM分離率為22.9% (83/363)[11]，遠(yuǎn)高于臨床實(shí)驗室的相關(guān)報道。我院作為華南地區(qū)規(guī)模最大的結(jié)核病專科醫(yī)院，則有廣州地區(qū)1994—2003、2004—2009、2012—2016年的相關(guān)數(shù)據(jù)報道，實(shí)驗室NTM分離率分別為6.28%、19.3%和4.18%的[12-14]。這些數(shù)據(jù)無不表明我國和廣州地區(qū)屬NTM感染高發(fā)區(qū)，值得我們高度重視。

從菌種分布來看，本研究顯示廣州地區(qū)NTM分離率由高到低的前5順位為鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群、堪薩斯分枝桿菌、龜-膿腫分枝桿菌復(fù)合群、戈登分枝桿菌、偶然分枝桿菌，與我院以前的報道[12-15]及國內(nèi)外文獻(xiàn)報道大體一致[9-10,16]，充分說明NTM雖然種類繁多，但引起人類感染與致病者則為少數(shù)菌種，且病原譜較為固定，這是人們深入研究NTM感染性疾病的有利條件。從感染人群來看，本研究結(jié)果顯示，NTM分離率男性略高于女性，但在男、女性別中均隨年齡的增大其NTM分離率呈較大輻度的上升，與我院近期的報道相一致[14]，似乎提示：從近階段看，廣州地區(qū)NTM感染流行具有較為穩(wěn)定的人群特點(diǎn)。這一特點(diǎn)為深入研究NTM感染流行病學(xué)提供了便利，但目前這方面的系統(tǒng)性研究不多，我們必須努力而為之。至于NTM感染率隨年齡的增加而增高，則可能與老年人的免疫功能普遍相對低下有關(guān)，因為目前一般認(rèn)為免疫功能低下為NTM致病的重要影響因素[8]，但如何相關(guān)目前尚不清晰，值得人們重視。從NTM分離患者的地域分布看，在表3中我們看到臨海的黃埔區(qū)和南沙區(qū)患者具有較低的NTM分離率，似乎與人們目前的認(rèn)知似乎不太一致。那么，本文所呈現(xiàn)的NTM分離率中心城區(qū)高于城郊結(jié)合部、城郊結(jié)合部高于城市郊區(qū)的研究結(jié)果，究竟是環(huán)境因素所致還是人口基數(shù)產(chǎn)生的重要影響，目前不得而知，需要進(jìn)行流行病學(xué)抽樣研究方能得到較為科學(xué)的結(jié)論。

總之，NTM疾病作為一般癥狀不太典型的慢性疾病，嚴(yán)重影響患者的身體健康和生活質(zhì)量，人類NTM感染問題是衛(wèi)生健康領(lǐng)域的重要問題，引起必須高度關(guān)注。本文作為回顧性分析，雖然為NTM疾病的防治提供了較為重要的醫(yī)學(xué)循證依據(jù)，但是不可避免地存在各種分析偏倚而影響結(jié)果的精準(zhǔn)性，如約10%信息不全病例未納入本研究將會對結(jié)果產(chǎn)生何種影響等等，如何嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)地設(shè)計進(jìn)行隊列研究或流行病病學(xué)調(diào)查研究將是我們以后的努力方向。