張 茉，王增加，張盼陽(yáng)，蘇欣妍，曲 佳

（1.天津市藥品檢驗(yàn)研究院，天津 300070；2.天津市南開(kāi)區(qū)鼓樓街社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，天津 300122；3.天津宏仁堂藥業(yè)有限公司，天津 300385；4.天津達(dá)仁堂京萬(wàn)紅藥業(yè)有限公司，天津 300380）

清熱散結(jié)制劑包含兩種劑型，分別為清熱散結(jié)片和清熱散結(jié)膠囊，二者均屬于中成藥中的處方藥。該藥由單味藥千里光經(jīng)水提醇沉制得浸膏后，加入適當(dāng)輔料，分別制成膠囊和不同規(guī)格的糖衣片、薄膜衣片。該品種具有消炎解毒，散結(jié)止痛的功效。目前在臨床上可用于治療急性結(jié)膜炎、急性咽喉炎、急性菌痢、上呼吸道炎、急性支氣管炎、急性扁桃腺炎、淋巴結(jié)炎、皮炎濕疹、中耳炎等病癥［1］。經(jīng)NMPA數(shù)據(jù)庫(kù)查詢顯示，國(guó)內(nèi)具有生產(chǎn)清熱散結(jié)片資質(zhì)的生產(chǎn)企業(yè)共有6家，藥品批準(zhǔn)文號(hào)6個(gè)；具有生產(chǎn)清熱散結(jié)膠囊資質(zhì)的生產(chǎn)企業(yè)共有2家，藥品批準(zhǔn)文號(hào)2個(gè)。經(jīng)向8家生產(chǎn)企業(yè)發(fā)函、致電調(diào)研后發(fā)現(xiàn)不同廠家的處方及生產(chǎn)工藝存在差異，有些廠家【制法】項(xiàng)下未規(guī)定稠膏密度，有些廠家甚至未列出【制法】項(xiàng)，這就導(dǎo)致清熱散結(jié)制劑質(zhì)量的參差不齊。如何高效、快速、準(zhǔn)確地鑒別和篩查出不同廠家的制劑是我們檢驗(yàn)和研究的方向。近些年來(lái)，隨著近紅外技術(shù)突飛猛進(jìn)的發(fā)展，因其具有高效性和無(wú)損性從而為中藥材及中成藥的快速檢測(cè)提供了技術(shù)條件，故在中藥分析領(lǐng)域應(yīng)用較為廣泛［2］。本文通過(guò)對(duì)8個(gè)不同生產(chǎn)廠家的清熱散結(jié)制劑建立一致性模型，可有效快速篩分各個(gè)廠家的清熱散結(jié)制劑，為中成藥的鑒別提供了新的檢測(cè)方法［3］。

1 材料

1.1 儀器 附帶1.5 m光纖探頭的MPA型近紅外光譜儀（德國(guó)Bruker分析儀器公司）；OPUS 5.5工作站。

1.2 藥品 清熱散結(jié)膠囊收集到2個(gè)不同廠家，共計(jì)54批次樣品，見(jiàn)表1；6個(gè)不同廠家清熱散結(jié)片，共計(jì)103批次樣品，見(jiàn)表2。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣本測(cè)試方法及光譜采集

2.1.1 清熱散結(jié)膠囊 測(cè)樣方式如圖1所示，拇指及中指夾住膠囊，用食指固定囊殼與光纖探頭結(jié)合處，并將探頭緊頂于單層囊殼，穩(wěn)定后，按壓探頭開(kāi)關(guān)，進(jìn)行樣品測(cè)定。光譜掃描范圍4 000～12 000 cm-1，分辨率為8 cm-1，每按壓一次開(kāi)關(guān)，光纖進(jìn)行32次掃描，每批測(cè)量6粒樣品，均為非鋁塑包裝的光譜圖。以每批次樣品采集后的光譜圖作為原始光譜，用于建立模型。見(jiàn)圖2。

圖1 膠囊劑的測(cè)樣手法

圖2 54批次清熱散結(jié)膠囊近紅外光譜疊加圖

2.1.2 清熱散結(jié)片 將本品包衣磨成光滑平面的片，露出片芯，不同廠家片芯見(jiàn)圖3，用光纖探頭輕輕頂住片芯露藥部分（包衣片需磨去包衣，露出與探頭大小相當(dāng)?shù)乃幮荆?，如圖4所示，中指固定光纖探頭，讓其與藥芯部分緊密貼合，防止有縫隙和滑動(dòng)，拇指與食指緊捏住藥片兩側(cè)，穩(wěn)定后，按壓探頭開(kāi)關(guān)，對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)量。光譜掃描范圍4 000～12 000 cm-1，分辨率為8 cm-1，每按壓一次開(kāi)關(guān)，光纖進(jìn)行32次掃描，每批測(cè)量6片樣品，均為非鋁塑包裝的光譜圖。以每批次樣品采集后的光譜圖作為原始光譜，用于建立模型。見(jiàn)圖5。

圖3 不同廠家樣品片芯情況

圖4 片劑的測(cè)樣手法

圖5 不同廠家103批清熱散結(jié)片近紅外原始光譜疊加圖

2.2 近紅外光譜模型的擬合、建立與驗(yàn)證 經(jīng)文獻(xiàn)檢索并利用OPUS 5.0軟件反復(fù)摸索試驗(yàn)，掃描后的樣品通過(guò)在全光譜范圍進(jìn)行優(yōu)化和分析后，選取了最具代表性和專屬性的特征譜段，分別為9 000～7 500 cm-1、6 900～5 600 cm-1及5 000～4 250 cm-1，采用不同數(shù)學(xué)處理方法建立不同廠家一致性模型。

2.2.1 清熱散結(jié)膠囊模型的擬合、建立與驗(yàn)證

2.2.1.1 模型一 對(duì)湖南天濟(jì)草堂的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，平滑點(diǎn)數(shù)為17，當(dāng)將CI值設(shè)為3.9時(shí)，同廠家全部樣品均能識(shí)別準(zhǔn)確，結(jié)果見(jiàn)圖6。同時(shí)，采用20批其他廠家樣品的原始光譜驗(yàn)證，也可較好的區(qū)分與辨別，圖7為驗(yàn)證結(jié)果。

圖6 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖7 不同廠家樣品模型驗(yàn)證

2.2.1.2 模型二 對(duì)江西普正的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，當(dāng)將平滑點(diǎn)數(shù)設(shè)置為17，CI值設(shè)為5.4時(shí)，同廠家全部樣品均能識(shí)別準(zhǔn)確，見(jiàn)圖8。采用34批其他生產(chǎn)企業(yè)樣品的原始光譜驗(yàn)證后，也可較準(zhǔn)確的區(qū)分與辨別，圖9為驗(yàn)證結(jié)果。

圖8 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖9 不同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

2.2.2 清熱散結(jié)片模型建立與驗(yàn)證

2.2.2.1 模型一 對(duì)河南明善堂的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，平滑點(diǎn)數(shù)設(shè)成17，將CI值設(shè)為5.1時(shí)，本廠家全部樣本均能識(shí)別準(zhǔn)確，見(jiàn)圖10。繼而，采用97批不同的5家企業(yè)樣品的原始光譜驗(yàn)證后，均可較準(zhǔn)確的識(shí)別，圖11為驗(yàn)證結(jié)果。

圖10 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖11 不同廠家樣品模型驗(yàn)證

2.2.2.2 模型二 對(duì)廣州白云山奇星的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，當(dāng)將平滑點(diǎn)數(shù)設(shè)置為17，CI值設(shè)為7時(shí)，所有樣本均能準(zhǔn)確識(shí)別，如圖12。同時(shí)，采用88批次其他5家企業(yè)樣品的原始光譜驗(yàn)證后，均能識(shí)別準(zhǔn)確，見(jiàn)圖13。

圖12 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖13 不同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

2.2.2.3 模型三 對(duì)貴陽(yáng)潤(rùn)豐的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，當(dāng)CI值設(shè)為7，平滑點(diǎn)數(shù)為17時(shí)，均能準(zhǔn)確識(shí)別全部樣品，見(jiàn)圖14。采用82批其他5家生產(chǎn)企業(yè)樣品的原始光譜驗(yàn)證后，也都可以準(zhǔn)確識(shí)別，見(jiàn)圖15。

圖14 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖15 不同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

2.2.2.4 模型四 對(duì)貴州漢方的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理，當(dāng)將CI值設(shè)為4.5，平滑點(diǎn)數(shù)為17時(shí)，均能較準(zhǔn)確識(shí)別所有樣品，見(jiàn)圖16。采用79批其他5家生產(chǎn)企業(yè)的原始光譜驗(yàn)證后，亦可較好識(shí)別，見(jiàn)圖17。

圖16 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖17 不同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

2.2.2.5 模型五 對(duì)廣東省惠州市中藥廠的原始光譜，采用一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法進(jìn)行數(shù)學(xué)處理后，當(dāng)CI值設(shè)為5.1，平滑點(diǎn)數(shù)設(shè)為17時(shí)，可準(zhǔn)確識(shí)別所有樣品的光譜，見(jiàn)圖18。采用70批其他5個(gè)廠家樣品的原始光譜驗(yàn)證后，均可較準(zhǔn)確識(shí)別，見(jiàn)圖19。

圖18 同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

圖19 不同企業(yè)樣品模型驗(yàn)證結(jié)果

3 討論

3.1 本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)大量文獻(xiàn)進(jìn)行檢索［4］，考查了各種預(yù)處理方法，最終摸索出最適合建模的兩種數(shù)學(xué)處理模型，分別為一階導(dǎo)數(shù)法及一階導(dǎo)數(shù)加矢量歸一化法，其中湖南天濟(jì)草堂CI值設(shè)為3.9，江西普正CI值設(shè)為5.4時(shí)，均能很好地區(qū)分和鑒別兩家生產(chǎn)企業(yè)的清熱散結(jié)膠囊；此外，河南明善堂CI值設(shè)為5.1，廣州白云山奇星CI值設(shè)為7，貴陽(yáng)潤(rùn)豐CI值設(shè)為7，貴州漢方CI值設(shè)為4.5，廣東省惠州市中藥廠CI值設(shè)為5.1時(shí)，擬合建立的一致性模型可以很好地將上述不同廠家生產(chǎn)的清熱散結(jié)片進(jìn)行區(qū)分與快篩，采用這種快檢方法，不僅可提高檢驗(yàn)效率，也為該品種的分析鑒別提供了新的解決思路與方案，更利于執(zhí)法抽驗(yàn)人員的辨別與篩查工作。

3.2 本次抽樣的六家生產(chǎn)企業(yè)清熱散結(jié)片共計(jì)103批次，其中廣州巨虹藥業(yè)有限公司僅有4批，由于近紅外建模指導(dǎo)原則規(guī)定小于6批次的沒(méi)有建模意義，故對(duì)除廣州巨虹外的5個(gè)廠家均建立一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

3.3 近紅外光譜分析技術(shù)是一種現(xiàn)代化分析檢測(cè)技術(shù)，其具有操作簡(jiǎn)單、綠色環(huán)保、不破壞有效成分、高效便捷、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)［5］。大部分中藥化學(xué)成分的基團(tuán)基頻振動(dòng)的合頻與倍頻吸收都在近紅外區(qū)，因此近紅外光譜技術(shù)在中藥植物藥及復(fù)方制劑有效成分、中藥質(zhì)量一致性控制、中藥材鑒別等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛［6］，此外，目前該技術(shù)也已成為中藥材及中成藥快檢快篩的重要檢測(cè)手段。