韋愛菊，周 波，畢桂真

（菏澤市水文中心，山東菏澤 27400）

1 方法驗證目的與依據(jù)

1.1 目的

確保檢測人員能夠正確按照標準方法T/CHES 14—2017《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》對地表水、地下水、海水、飲用水、生活污水和工業(yè)污水中亞硝酸鹽氮的測定，結(jié)果真實可靠。

1.2 依據(jù)

GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》；SL 219—2013《水環(huán)境監(jiān)測規(guī)范》；HJ 168—2010《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導則》；T/CHES 14—2017《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》。

2 方法驗證

2.1 人員

進行方法驗證人員具有較熟練的亞硝酸鹽氮操作技術(shù)，經(jīng)過對本方法的學習和培訓，熟悉方法原理、掌握方法操作步驟，均能獨立完成整個檢測過程。

2.2 儀器設(shè)備

檢測方法所用主要儀器為氣相分子吸收光譜儀。檢測方法所用主要玻璃量器均為鑒定機構(gòu)檢定合格產(chǎn)品

2.3 試劑

2.3.1 標準試劑

方法驗證使用標準溶液為水利部水環(huán)境監(jiān)測評價中心生產(chǎn)的有證標準溶液，能夠溯源到國家基準。

2.3.2 標準樣品/標準物質(zhì)

方法驗證使用水利部水環(huán)境監(jiān)測評價研究中心、生態(tài)環(huán)境部標準樣品研究所生產(chǎn)的有證標準溶液/標準物質(zhì)，經(jīng)確認能夠滿足使用要求。相關(guān)信息見表1。

表1 標準物質(zhì)信息表

2.3.3 一般試劑

檸檬酸、無水乙醇。

2.4 樣品制備

2.4.1 樣品固定與保存方法

水樣的采集執(zhí)行GB3838、SL219、HJ/T91 以及 HJ/T 164 的相關(guān)規(guī)定。根據(jù)不同的水體，水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶中，并應充滿樣品瓶。采集的水樣應在24h內(nèi)盡快測定。如無法及時測定，應于4℃下保存，但不得超過2d。

2.4.2 干擾和消除

在鹽酸介質(zhì)中，能與NO2-發(fā)生氧化、還原反應的物質(zhì)易干擾測定。S2-含量高時，在吸光管前串接內(nèi)裝乙酸鉛脫脂棉的除硫管給予消除；存在產(chǎn)生吸收的揮發(fā)性有機物時，在待測水樣中加入活性炭攪拌吸附，30min后取樣測定。

2.5 檢測方法

《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》（T/CHES 14-2017）為現(xiàn)行有效版本，受控標準文本

2.5.1 方法原理

水樣在3mol/L的鹽酸介質(zhì)中，加入無水乙醇做催化劑，將亞硝酸鹽瞬間轉(zhuǎn)化成二氧化氮（NO2），用載氣載入氣相分子吸收光譜儀的吸光管中，測得的吸光度與亞硝酸鹽氮濃度遵守朗伯比爾定律。

2.5.2 適用范圍

本標準適用于地表水、地下水、海水、飲用水、生活污水和工業(yè)污水中亞硝酸鹽氮的測定。方法檢出限為0.003mg/L，測定下限為0.012mg/L。

2.5.3 檢測步驟

2.5.3 .1 儀器參考條件

光源：氘燈光源；工作條件：工作波長214.7nm；測定方式：峰高或峰面積；載氣：空氣或氮氣；載氣流量：0.l~0.5L/min；燈電流：200~300mA。

2.5.3 .2 校準

按照儀器操作規(guī)程正確連接帶自動進樣器和自動樣品稀釋功能的氣相分子吸收光譜儀的管路和線路，設(shè)置樣品檢測參數(shù)；清洗設(shè)備管路2~3次，待吸光度基線穩(wěn)定（1min內(nèi)基線漂移不超過士0.0005Abs）后，進行測試。

2.5.3 .3 校準曲線的繪制

按0.00mg/L，0.05mg/L，0.10mg/L，0.20mg/L，0.40mg/L，1.00mg/L及2.00mg/L 的順序設(shè)置系列標準使用液。設(shè)置好標樣測試參數(shù)后，啟動測試。以吸光度為縱坐標，相對應的亞硝酸鹽氮濃度為橫坐標，繪制出校準曲線。

2.5.3 .4 樣品的測定

按照與繪制校準曲線相同的條件，進行試樣的測定。若試樣亞硝酸鹽氮含量超出校準曲線檢測范圍40倍，應取適量試樣稀釋后上機測定。

2.5.3 .5 空白試驗

用同批次試驗用水代替試樣，按照2.4.3.4步驟進行空白試驗。

2.6 驗證結(jié)果

2.6.1 標準曲線

根據(jù)標準方法T/CHES 14-2017《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》，標準曲線含7個校準標準濃度點，分別 為0.00mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L、1.00mg/L 和2.00mg/L。在波長213.9nm 處，以超純水作參比，測定吸光度。以濃度為橫坐標，以相應的吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。標準曲線數(shù)據(jù)及檢驗結(jié)果見表2。

表2 標準曲線檢驗結(jié)果表

2.6.2 方法檢出限和測定下限

按照樣品分析的全部步驟，重復n（n≥7）次空白試驗，將各測定結(jié)果換算為樣品中的濃度或含量，計算n次平行測定的標準偏差，按公式（A.1）計算方法檢出限。

式中：MDL–方法檢出限；n–樣品的平行測定次數(shù)；t–自由度為n-1，置信度為99%時的t分布（單側(cè)）；S–n次平行測定的標準偏差。

平行7次空白試驗，測定及統(tǒng)計結(jié)果見表3，驗證結(jié)果見表4。

表3 方法檢出限、測定下限測試數(shù)據(jù)表

表4 方法檢出限、測定下限驗證結(jié)果表

2.6.3 精密度

配制亞硝酸鹽氮濃度分別為0.10mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L和0.90mg/L（包含0.1C標準溶液、0.9C標準溶液以及標準方法中測試的濃度值）的統(tǒng)一樣品，按全程序每個樣品平行測定不少于6次。計算其平均值、標準偏差和相對標準偏差，測定精密度結(jié)果滿足要求。

2.6.4 準確度

2.6.4 .1 標準樣品/標準物質(zhì)的測定

對濃度為66.8±3.4ug/L、145.7±7.3ug/L的標準樣品/標準物質(zhì)平行測定不少于6次，計算其平均值，結(jié)果判斷合格。

2.6.4 .2 加標回收率的測定

選擇一種實際樣品的地表水，在樣品中分別加入濃度為10mg/L的標準溶液10.00mL、5.00mL、2.00mL（包含測試范圍的高、中、低以及方法中測試的濃度值），平行測定不少于6次，計算其加標回收率，測定及判定結(jié)果合格，完全在范圍內(nèi)。

3 方法驗證結(jié)論

本機構(gòu)依據(jù)GB/T 27417-2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》、SL 219-2013《水環(huán)境監(jiān)測規(guī)范》和HJ 168-2010《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導則》，對T/CHES 14-2017《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》進行了方法驗證，驗證結(jié)果如下。

1）本實驗室人員、儀器設(shè)備、標準溶液、試劑、耗材等實驗條件均滿足標準方法要求，該標準方法適用于本實驗室。

2）根據(jù)驗證結(jié)果表明：方法檢出限、測定下限、精密度、準確度滿足標準方法要求。

3）標準方法敘述嚴謹、清晰，驗證過程中未出現(xiàn)異常值，不需要對該方法編制《作業(yè)指導書》。

4）驗證結(jié)論：本檢測機構(gòu)有能力滿足開展T/CHES 14-2017《水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定氣相分子吸收光譜法》檢測的各項要求，可以開展此項檢測。