明思彤 劉柳 闞默 王繼鳳 張壯 劉曉冉 楊擎 林嘉楠 李娜 曲曉波

(1長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2吉林省藥品審評中心)

心肌肥厚能夠提高心律失常、心力衰竭(心衰)、心臟猝死的發(fā)生概率，是心血管疾病發(fā)病率和死亡率的預(yù)測指標(biāo)〔1〕。心肌肥厚前期表現(xiàn)為心悸、胸悶，后期常表現(xiàn)呼吸困難、喘息不止等，這在中醫(yī)理論中屬于“胸痹、喘證、水腫”等范疇，目前，中醫(yī)將此病歸于氣陰兩虧型、氣虛血瘀型等證型〔2〕。

傳統(tǒng)復(fù)方生脈飲來源于《醫(yī)學(xué)啟源》，是治療氣陰兩虛證的代表方劑〔3〕。生脈飲(黨參方，SMY)是由傳統(tǒng)人參方衍生而來，由黨參、麥冬、五味子組成，同樣具有益氣復(fù)脈，養(yǎng)陰生津的功效。研究表明〔4〕SMY能增強(qiáng)心肌收縮力，防止心室重構(gòu)，從而保護(hù)心臟，常用于心衰、心肌炎、冠心病等疾病。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是基于系統(tǒng)生物學(xué)、生物信息學(xué)等方面的理論，從整體水平上觀察“藥物-疾病-靶點(diǎn)”的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系模型，從而可以研究中藥作用靶點(diǎn)及作用機(jī)制，其概念與中醫(yī)藥整體觀和辨證論治的原則相貼合〔5〕。為明確SMY治療心肌肥厚的生物學(xué)機(jī)制，本文基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法對SMY治療心肌肥厚的生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)及藥效機(jī)制進(jìn)行預(yù)測，并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，闡明SMY治療心肌肥厚的分子作用機(jī)制。

1 資料及方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)SD大鼠50只，雌雄各半，體重(200±10)g，購于長春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司(動(dòng)物合格證號(hào)：201900030925，倫理號(hào)：20190125)。飼養(yǎng)于長春中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心，溫度20～22℃，相對濕度(50±10)%。

1.2藥物與試劑 SMY(北京同仁堂藥業(yè)，國藥準(zhǔn)字Z11020372)；復(fù)方丹參片(百年六福堂藥業(yè)，國藥準(zhǔn)字Z22022898)；異丙腎上腺素(ISO，Solarbio，貨號(hào)：I8480)；磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抗體(Proteintech，貨號(hào)：60225-1-lg)；蛋白激酶B(AKT)抗體(Proteintech，貨號(hào)：60203-2-lg)；哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶基因(mTOR)抗體(BOSTER，貨號(hào)：BM4182)；P-PI3K抗體(Bioss，貨號(hào)：bs-3332R)；P-AKT抗體(Bioss，貨號(hào)：bs-2720R)；P-mTOR抗體(Bioss，貨號(hào)：bs-3495R)，β-actin抗體(Bioss，貨號(hào)：bs-0061R)。

1.3儀器 蛋白電泳儀(Hoffer)，轉(zhuǎn)膜儀(Bio-Rad)，酶標(biāo)儀(TECAN)。

1.4SMY中藥物化學(xué)成分收集與篩選 采用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫平臺(tái)TCMSP(http：//lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)，以SMY方中“黨參”、“五味子”為關(guān)鍵詞在“Herb name”條目中檢索其化學(xué)成分，根據(jù)TCMSP數(shù)據(jù)庫官方建議的化合物分子ADME參考值，以其參數(shù)中的口服生物利用度(OB)≥20%、類藥性(DL)≥0.1為限制條件進(jìn)行篩選，并以方中“麥冬”為關(guān)鍵詞在TCMID(https：//omictools.com/tcmid-tool)上檢索，獲得有效化學(xué)成分。綜上獲得SMY的有效化學(xué)成分信息，并以此作為SMY的候選活性成分。

1.5SMY活性成分候選靶標(biāo)對應(yīng)基因的收集 在TCMSP平臺(tái)獲得“黨參”，“五味子”的潛在作用靶點(diǎn)蛋白全稱，借助Uniprot數(shù)據(jù)庫(https：//www.uniprot.org/)對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行基因名稱的注釋，并下載由平臺(tái)查詢得到的化合物與在TCMID平臺(tái)查詢到的“麥冬”化合物輸入到SwissTargetPrediction(http：//www.swisstargetprediction.ch/)查詢相應(yīng)靶點(diǎn)，最后將以上數(shù)據(jù)庫查詢結(jié)果整理合并，確保數(shù)據(jù)的完整性。

1.6心肌肥厚相關(guān)靶標(biāo)基因的收集 通過人類基因組注釋(GeneCards)數(shù)據(jù)庫(https：//www.genecards.org/)和《人類孟德爾遺傳》數(shù)據(jù)庫(https：//omim.org/)，以“myocardial hypertrophy”為關(guān)鍵詞，將得到的疾病相關(guān)基因進(jìn)行去重整理作為心肌肥厚疾病相關(guān)基因。將檢索獲得心肌肥厚的基因與SMY主要活性成分所對應(yīng)的候選靶標(biāo)基因取交集，獲取兩者的共有基因作為SMY治療心肌肥厚的潛在作用靶標(biāo)。

1.7“藥物-活性成分-作用靶標(biāo)-疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析 將篩選后的藥物活性成分與治療心肌肥厚的潛在靶標(biāo)構(gòu)建相應(yīng)的數(shù)據(jù)表，以構(gòu)建的關(guān)系數(shù)據(jù)表作為Cytoscape3.7.2的輸入文件構(gòu)建化合物成分及潛在作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，構(gòu)建藥物-活性成分-作用靶標(biāo)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖，展示藥物活性成分與心肌肥厚靶標(biāo)間的作用關(guān)系。

1.8靶蛋白互相作用網(wǎng)絡(luò)圖(PPI)構(gòu)建 將SMY治療心肌肥厚的潛在作用靶標(biāo)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫，限制物種為“Homo sapiens”，設(shè)置節(jié)點(diǎn)combine score≥0.4，同時(shí)去除孤立的靶點(diǎn)蛋白，獲取蛋白互作關(guān)系數(shù)據(jù)。將所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape3.7.2軟件進(jìn)行可視化處理，通過Network Analyzer工具進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析從而獲得Degree值，繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖。

1.9GO富集及KEGG通路分析 將SMY對心肌肥厚的潛在作用靶標(biāo)基因利用R語言Cluster profiler程序進(jìn)行GO基因富集分析和KEGG通路富集分析，設(shè)定P≤0.05得到相應(yīng)的生物過程(BP)、細(xì)胞組成(CC)、分子功能(MF)及KEGG通路，利用R語言pathview可視化前20條生物學(xué)過程及通路氣泡圖。

1.10動(dòng)物分組、給藥及造模 將50只SD大鼠隨機(jī)分為空白組(0.9%生理鹽水)、模型組(ISO劑量遞減20 mg/kg、10 mg/kg和5 mg/kg形式，皮下注射3 d，然后以3 mg/kg的劑量連續(xù)注射4 d)、陽性組(復(fù)方丹參片290 mg/kg+ISO)、SMY低劑量組(SMYL 3.26 g/kg+ISO)、SMY高劑量組(SMYH 13.04 g/kg+ISO)，每組10只。預(yù)先灌胃SMY和復(fù)方丹參片7 d，第8天除空白組外，其他所有組皮下注射ISO 7 d，造模期間繼續(xù)灌胃SMY和復(fù)方丹參片，共灌胃14 d，空白組和模型組給予相同劑量的生理鹽水。

1.11蘇木素-伊紅(HE)、Masson染色觀察大鼠心臟病理情況 按1.10進(jìn)行動(dòng)物分組給藥，將心臟組織置于4%多聚甲醛中固定，進(jìn)行HE、Masson染色，用倒置顯微鏡觀察大鼠心臟病理情況，并拍照記錄。

1.12Western印跡法檢測PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平 按1.10進(jìn)行動(dòng)物分組給藥，將大鼠心臟組織處理后，用考馬斯亮藍(lán)法進(jìn)行蛋白濃度測定。進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，150 V，80 min，100 V轉(zhuǎn)膜70 min，脫脂奶粉封閉2 h，一抗4℃孵育過夜，二抗室溫?fù)u床孵育1 h，洗滌后，用凝膠成像儀進(jìn)行ECL化學(xué)發(fā)光顯色，使用Image J分析軟件測定條帶強(qiáng)度值。各組蛋白表達(dá)的相對強(qiáng)度=磷酸化蛋白條帶的灰度值/非磷酸化條帶的灰度值進(jìn)行定量分析。

1.13統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1SMY候選活性成分及候選靶標(biāo) 通過TCMSP數(shù)據(jù)庫，根據(jù)OB和DL值篩選得到黨參有效活性成分44個(gè)，五味子有效活性成分68個(gè)，然后將對應(yīng)的化合物分子查詢相應(yīng)蛋白，黨參潛在靶點(diǎn)450個(gè)，五味子560個(gè)，將所有蛋白全稱經(jīng)過Uniprot數(shù)據(jù)庫標(biāo)準(zhǔn)化，共計(jì)得到775個(gè)相應(yīng)基因。然后通過TCMID數(shù)據(jù)庫，檢索麥冬有效活性成分55個(gè)，得到麥冬對應(yīng)基因4 910個(gè)，將所有化合物分子靶點(diǎn)合并去除重復(fù)值，共計(jì)得到720個(gè)。

2.2SMY活性成分治療心肌肥厚相關(guān)靶標(biāo) 在GeneCard數(shù)據(jù)庫檢索關(guān)鍵字“Myocardial hypertrophy”，結(jié)果得到相關(guān)基因共2 702個(gè)，設(shè)置Relevance score≥7，剩余542個(gè)相關(guān)基因。在OMIM數(shù)據(jù)庫檢索相同關(guān)鍵字，共得到40個(gè)基因與GeneCard結(jié)果合并，刪除重復(fù)值，得到572個(gè)基因。將572個(gè)疾病相關(guān)基因和720個(gè)藥物潛在靶點(diǎn)進(jìn)行映射，獲取兩者之間的交集基因114個(gè)，構(gòu)建藥物與疾病之間的共有關(guān)系。

2.3“藥物-化合物-疾病-靶標(biāo)”的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 圖1網(wǎng)絡(luò)中化合物與靶點(diǎn)相連的線稱之為自由度(degree)，degree越高表明該節(jié)點(diǎn)(化合物或靶點(diǎn))存在的相互作用關(guān)系越多。其中有32種化合物作用靶點(diǎn)數(shù)量>10，有芹菜素(Apigenin)、木犀草素(Luteolin)、鳶尾黃素(Tectorigenin)、7-甲氧基-2-甲基異黃酮(7-Methoxy-2-methylisoflavone)、2-甲氧基呋喃二烯(2-methoxyfuranodiene)、英西卡林(Encecalin)、灌木遠(yuǎn)志酮A(Frutinone A)、黨參堿(Codonopsine)、腔腸素(Coelogin)、大豆黃素(Glycitein)、豆甾醇(Stigmasterol)、麥冬黃烷酮b(Ophiopogonanone b)、山梨醇(Orchinol)、麥冬皂苷b(Ophiopogonin b)、麥冬皂苷a(Ophiopogonin a)、麥冬黃烷酮e(Ophiopogonanone e)、麥冬黃烷酮a(Ophiopogonanone a)、麥冬黃烷酮c(Ophiopogonanone c)、魯斯可皂苷元(Ruscogenin)、齊墩果酸(Oleanolicacid)、茉莉酮(Jasmololone)、反式阿魏酰酪胺(n-trans-feruloyltyramine)、25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(25(s)-ruscogenin1-o-alpha-l-rhamnopy-ranosyl-(1-2)-beta-d-xylopyranoside)、5-羥基-7,8-二甲氧基-6-甲基-3-(3′,4′-二羥基芐基)-4-色原烷酮(5-hydroxy-7,8-dimethoxy-6-methyl-3-(3′,4′-dihydroxybenzyl)chroman-4-one)、n-〔β-羥基-β-(4-羥基苯基)〕乙基-4-羥基肉桂酰胺(n-〔β-hydroxy-β-(4-hydroxyphenyl)〕ethyl-4-hydroxycinnamide)、5,7-二羥基-6,8-二甲基-3-(4′-羥基-3′-甲氧基芐基)-4-色原烷酮(5,7-dihydroxy-6,8-dimethyl-3-(4′-hydroxy-3′-methoxybenzyl)chroman-4-one)25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(25(s)-ruscogenin1-o-alpha-l-rhamnopy-ranosyl-(1-2)-beta-d-xylopyranoside)、25 (s) -ruscogenin1-o- 〔α-l-吡喃鼠李糖基- (1 → 2)〕〔β-d-吡喃木糖基- (1 → 3)〕 - β-d-吡喃巖藻糖苷(25(s)-ruscogenin1-o-〔α-l-rhamnopyranosyl-(1→2)〕〔β-d-xylopyra-nosyl-(1→3)〕-β-d-fucopyranoside)、n-(反式-對-香豆酰)酪胺(n-(trans-p-coumaroyl)tyramine)、紫草蛋白(Arnebin)7、五味子素R(Gomisin R)，結(jié)果表明SMY可通過多成分、多靶點(diǎn)聯(lián)合調(diào)節(jié)的方式治療心肌肥厚。

2.4PPI 圖2中節(jié)點(diǎn)表示蛋白，邊表示功能相關(guān)性。該網(wǎng)絡(luò)由114個(gè)節(jié)點(diǎn)、1 948條邊組成，各節(jié)點(diǎn)degree平均值為34.18，Closeness平均值為0.58，Betweenness平均值為0.006 9。Degree、Closeness及Betweenness值均超過平均值的靶點(diǎn)有16個(gè)，包括INS、IL6、AKT1、GAPDH、VEGFA、CASP3、MAPK1、TP53、TNF、EGFR、PTGS2、IL1B、SRC、FOS、PPARG、mTOR。預(yù)測這些核心治療靶點(diǎn)在該網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用。

綠色四邊形：黨參活性成分；藍(lán)色菱形：麥冬活性成分；紫色三角形：五味子活性成分；粉色橢圓形：交集靶點(diǎn)；紅色六邊形：心肌肥厚圖1 “藥物-成分-疾病-靶標(biāo)”網(wǎng)絡(luò)圖

圖2 靶蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖

2.5SMY中靶標(biāo)基因GO富集分析 GO分析結(jié)果提示SMY-心肌肥厚-基因的BP顯著富集在脂多糖反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、正調(diào)控蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性等。MF主要富集在細(xì)胞因子受體結(jié)合、蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、生長因子受體結(jié)合等。CC主要富集在細(xì)胞膜筏、細(xì)胞質(zhì)囊泡腔、質(zhì)膜等中。根據(jù)Count值由大到小，同時(shí)滿足P<0.05進(jìn)行排序，分別在BP、MF和CC中選出排名前20的條目，見圖3～5。

圖3 SMY中靶標(biāo)基因GO富集分析中生物過程

2.6SMY治療心肌肥厚關(guān)鍵靶點(diǎn)KEGG通路富集分析 KEGG富集分析得到的通路根據(jù)P<0.05并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)〔6～8〕進(jìn)行篩選。KEGG通路富集分析結(jié)果表明，主要涉及PI3K-Akt信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、FoxO信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路等信號(hào)通路。SMY可能通過作用于這些通路起到防治心肌肥厚的作用。根據(jù)滿足P<0.05，Count值由大到小到進(jìn)行排序，列出前20的信號(hào)通路，見圖6。

圖4 SMY中靶標(biāo)基因GO富集分析中分子功能

圖6 SMY治療心肌肥厚關(guān)鍵靶點(diǎn)的KEGG通路富集分析

2.7SMY對心肌肥厚大鼠生長曲線的影響 空白組進(jìn)食和飲水正常，毛色有光澤，外觀正常，體重增加較快。隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，模型組逐漸出現(xiàn)進(jìn)食量減少，活動(dòng)減少，呼吸急促等現(xiàn)象，體重增加緩慢。陽性組和SMY低、高劑量組體重增加明顯加快。見圖7。

圖7 SMY對心肌肥厚大鼠生長曲線的影響(n=10)

2.8SMY對心肌肥厚大鼠心臟組織HE、Masson染色的影響 空白組心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)規(guī)則，纖維排列緊密。模型組心肌細(xì)胞伴有腫大、壞死及炎性浸潤，且可見大量藍(lán)色片狀膠原纖維，心肌組織纖維化嚴(yán)重，出現(xiàn)纖維排列紊亂等現(xiàn)象。陽性組，SMY低、高劑量組心肌細(xì)胞及纖維結(jié)構(gòu)破壞程度、纖維化面積較模型組明顯改善，表明SMY可改善ISO誘導(dǎo)大鼠心肌肥厚、損傷以及纖維化。見圖8。

圖8 SMY對心肌肥厚大鼠心臟組織HE、Masson染色的影響(×400)

2.9SMY對心肌肥厚大鼠心臟組織中PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響 與空白組相比，模型組PI3K、Akt、mTOR顯著磷酸化(P<0.01，P<0.001)。與模型組相比，SMY可顯著降低Akt、mTOR、PI3K磷酸化水平(P<0.01，P<0.001)。見表1,圖9。

表1 SMY對心肌肥厚大鼠心肌中PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響

1～5:空白組、模型組、陽性組、SMY低劑量組、SMY高劑量組圖9 SMY對心肌肥厚大鼠心肌中PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)有32種化合物是重要的藥效靶點(diǎn)。其中apigenin、luteolin、7-Methoxy-2-methylisoflavone、ophiopogonanone均為黃酮類化合物，具有顯著抗炎和抗血小板聚集等心血管保護(hù)作用〔9〕。來源于黨參成分的luteolin能夠顯著逆轉(zhuǎn)阿霉素?fù)p傷所致的心肌收縮力降低、心肌細(xì)胞凋亡，并能顯著抑制Caspase-3表達(dá)〔10〕。Luteolin、Stigmasterol及麥冬主要成分ophiopogonin可作用于Akt1，通過PI3K/Akt/eNOS途徑增加NO的釋放量來誘導(dǎo)心肌缺血血管的再生〔11〕。構(gòu)建SMY對心肌肥厚114個(gè)潛在靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)，其中IL-6能與83個(gè)蛋白發(fā)生相互作用，degree值跟隨其后的AKT1、Caspase-3、TNF、TP53、mTOR分別能與80、75、71、71、50個(gè)蛋白相互作用。炎癥是心室肥厚的關(guān)鍵標(biāo)志〔12〕。TNF-α心肌細(xì)胞特異性功能增強(qiáng)會(huì)引起心肌肥大和纖維化，導(dǎo)致擴(kuò)張性心肌病，并伴有心臟功能障礙〔13〕。研究表明〔14〕，小鼠體內(nèi)IL-6和IL-6受體的過度表達(dá)誘導(dǎo)心臟肥大、纖維化和舒張功能障礙。參與調(diào)控心肌細(xì)胞凋亡的基因有Bcl-2/Bax、Caspase-3和p53等。李益萍等〔15〕發(fā)現(xiàn)生脈注射液可明顯逆轉(zhuǎn)AngⅡ致心肌細(xì)胞中Caspase-3 mRNA的表達(dá)。TP53(P53)是一種抑癌基因，在細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重要作用。研究表明〔16〕，p53基因通過上調(diào)Bax蛋白和下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)進(jìn)而使細(xì)胞發(fā)生凋亡。

通過KEGG富集分析篩選出的最有意義的信號(hào)通路(P值最小，Count值最大)，即PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路并進(jìn)行相關(guān)蛋白驗(yàn)證。PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路與多種細(xì)胞功能相關(guān)，包括細(xì)胞生長、增殖、分化、存活和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)取?7〕。心肌細(xì)胞中的PI3K激活與控制細(xì)胞生長、存活和代謝的生物學(xué)過程密切相關(guān)；心臟中PI3K激活加劇了心肌肥大和功能障礙，而缺乏PI3K可減弱生理性心肌肥大〔18〕。PI3K激活后的心肌肥大反應(yīng)與PI3K下游的Akt相關(guān)〔19〕，Akt是一種絲氨酸-蘇氨酸激酶，參與代謝、葡萄糖攝取、細(xì)胞增殖和蛋白質(zhì)合成等多種細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)。Akt是引起心肌肥大的關(guān)鍵靶標(biāo)分子，心臟中活性Akt的靶向過度表達(dá)導(dǎo)致心肌細(xì)胞變大和心肌肥厚，增強(qiáng)心臟Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)會(huì)促進(jìn)病理性肥大并逐漸抑制線粒體脂肪酸氧化〔20〕。Akt通過調(diào)節(jié)PI3K-Akt信號(hào)通路來促進(jìn)心肌肥大，真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白(4E-BP)1抑制翻譯的啟動(dòng)并受mTOR負(fù)調(diào)控，mTOR是一種大的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，PI3K-Akt-mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制4E-BP1并促進(jìn)心肌肥大。mTOR由Akt磷酸化TSC2激活，mTOR及其下游靶標(biāo)的激活會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞變大，與心肌肥厚的進(jìn)程有關(guān)〔21〕。

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法闡述了SMY對心肌肥厚大鼠的保護(hù)作用及分子機(jī)制。結(jié)果表明SMY通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路保護(hù)心臟，改善心功能。另外GO和KEGG富集分析還預(yù)測了SMY參與調(diào)控心肌肥厚的血管生成、氧化應(yīng)激、胰島素受體底物結(jié)合等途徑，同時(shí)可能作用于HIF-1信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路等達(dá)到防治心肌肥厚的作用，故可據(jù)此開展進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)探索。