陸牡龍，黃恩媛，陶秋妍，何曉芳

(金陵科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 211169)

過(guò)去，畜禽養(yǎng)殖長(zhǎng)期使用抗生素，導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)抗生素殘留，嚴(yán)重影響人類的食品安全。近年來(lái)，中草藥作為天然藥物，憑借其無(wú)污染、無(wú)殘留、無(wú)抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，引起養(yǎng)殖業(yè)的廣泛關(guān)注[1]。中草藥作為飼料添加劑有著悠久的歷史，從公元前三世紀(jì)的《神農(nóng)本草經(jīng)》到后來(lái)的《淮南萬(wàn)畢術(shù)》《齊民要術(shù)》《農(nóng)政全書(shū)》等書(shū)，都有將中草藥用作飼料添加劑的記載。明朝李時(shí)珍所著《本草綱目》記載了16種可作飼料、令家畜肥壯的藥物，包括菊粉(inulin)、魚(yú)腥草、薄荷等[2]。由于飼料中禁止添加促生長(zhǎng)類抗生素，研究人員將中草藥作為天然的抗生素替代品對(duì)肉雞生產(chǎn)性能及生產(chǎn)力的影響進(jìn)行了評(píng)估。這些天然的抗生素替代品，一般以芳香植物精油、益生菌、植物素或益生元的形式存在[3]。

菊粉，又名菊糖，是植物中儲(chǔ)備性生物多糖之一，呈白色粉狀，微甜，溶于水，有黏性[4]。大量研究表明，菊粉作為一種天然飼料添加劑，有改善畜禽腸道環(huán)境、促進(jìn)腸道蠕動(dòng)、平衡腸道微生物、調(diào)控機(jī)體脂質(zhì)代謝、提高機(jī)體免疫力的作用[5]。菊粉還可以促進(jìn)礦物質(zhì)的吸收和維生素的合成，大大提高鈣、鎂、鋅、銅、鐵等礦物質(zhì)的吸收，促進(jìn)B族維生素及葉酸的合成，提高動(dòng)物機(jī)體的新陳代謝速率，增強(qiáng)免疫力和抵抗力[6]。菊粉在動(dòng)物小腸中不易消化，對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)起著重要作用，能特異性促進(jìn)益生菌在結(jié)腸定植，進(jìn)而改善腸道健康[7]。研究表明，含有低聚果糖、菊粉和菊粉型果聚糖的不可消化碳水化合物可以對(duì)動(dòng)物腸道菌群進(jìn)行調(diào)節(jié)，可被腸道微生物發(fā)酵，能緩解非酒精性脂肪性肝病[8]。有關(guān)研究表明，菊粉可刺激動(dòng)物腸道中有益菌的生長(zhǎng)，提高其活性，阻止病原菌繁殖。此外，將菊粉和低聚果糖混合飼喂肉雞可改善腸黏膜結(jié)構(gòu)，促進(jìn)養(yǎng)分的吸收利用[9]。向岑等[10]在小鼠飼料中加入不同劑量的菊粉來(lái)研究菊粉對(duì)小鼠腸道微生物的影響，結(jié)果顯示，添加中等劑量菊粉(10%添加量)最有利于保持個(gè)體腸道菌群的多樣性。對(duì)小鼠腸道菌群研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，菊粉可提高小鼠腸道內(nèi)有益菌的比例，幫助菌群恢復(fù)，緩解小鼠的菌群失調(diào)[11]。在無(wú)特定病原體雞上的研究表明，添加菊粉可以提高其腸道免疫力，且菊粉對(duì)腸道免疫功能的影響呈劑量依賴性[12]。有研究報(bào)道，在日糧中添加5 g/kg～10 g/kg的菊粉可以增強(qiáng)未完全發(fā)育的腸道的免疫功能，同時(shí)隨著菊粉添加量的加大，回腸組織中CD4＋T淋巴細(xì)胞的比例和CD4＋/CD8＋比值呈線性增加[13]。有研究報(bào)道，添加0.2%的菊粉可促進(jìn)肉雞生長(zhǎng)、提高肉雞免疫力[14]。此外，日糧中添加0.3%、0.4%和0.5%魚(yú)腥草可以改善肉雞的脂類代謝[15]。

魚(yú)腥草最早以岑草出現(xiàn)在《吳越春秋》中，因其葉有腥氣，被李時(shí)珍在《本草綱目》中稱為魚(yú)腥草[16]。魚(yú)腥草含有多種黃酮類、揮發(fā)性物質(zhì)、有機(jī)酸、生物堿及維生素等成分[17]，有研究指出，通過(guò)水或有機(jī)溶劑從魚(yú)腥草中提取的成分對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用[18]。魚(yú)腥草可以增加產(chǎn)蛋母雞腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌的含量，這些有益菌分泌出的短鏈脂肪酸，既可以為腸絨毛細(xì)胞提供能量，又可增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量，減少腸內(nèi)炎癥反應(yīng)[19]。如魚(yú)腥草煎劑可顯著降低雛雞體內(nèi)的大腸桿菌數(shù)量，提高雛雞免疫器官指數(shù)，促進(jìn)雛雞免疫器官發(fā)育[20]。有研究表明，以大葉青葉、連翹、黃芩、魚(yú)腥草和金銀花為配方的中草藥能顯著抑制新城疫病毒的細(xì)胞侵染能力，可作為抵抗新城疫病毒的潛在治療藥物[21]。鮮魚(yú)腥草提取物可減輕脂多糖誘導(dǎo)的小鼠肺部炎癥，減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)[22]。

中草藥添加劑兼有營(yíng)養(yǎng)和治療作用，具有無(wú)抗藥性、無(wú)殘留、無(wú)毒副作用的優(yōu)點(diǎn)[23]，本研究在日糧中添加菊粉和魚(yú)腥草兩種中藥添加劑，探析其對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、關(guān)鍵器官指數(shù)及腸道發(fā)育的影響，旨在為探究菊粉和魚(yú)腥草作為一種綠色飼料添加劑提供一定的理論根據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 日糧制備

A組肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧，B組肉雞喂給由基礎(chǔ)日糧＋1%菊粉組成的飼料，C組肉雞采用由基礎(chǔ)日糧＋1%菊粉和0.4%魚(yú)腥草組成的飼料?；A(chǔ)日糧組成及其營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1[參照NRC(1994)《家禽的營(yíng)養(yǎng)需要量》]。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

試驗(yàn)動(dòng)物預(yù)飼14 d后進(jìn)行試驗(yàn)。將108羽14日齡黃羽肉雞隨機(jī)分成3組(A組、B組和C組)，即3個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6羽雞，籠養(yǎng)，自由飲水和采食，保持舍內(nèi)空氣新鮮、光照持續(xù)。舍內(nèi)溫度保持22 ℃～24 ℃，濕度保持50%～70%。A組采用基礎(chǔ)日糧，B組使用在基礎(chǔ)日糧中添加1%菊粉后組成的飼料，C組采用在基礎(chǔ)日糧中添加1%菊粉和0.4%魚(yú)腥草后配制成的飼料，連續(xù)飼喂14 d后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。

1.1.3 試驗(yàn)藥品

菊粉購(gòu)自西安圣青生物科技有限公司，純度90%；魚(yú)腥草提取物由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院贈(zèng)送，純度100%。

1.2 測(cè)定項(xiàng)目和方法

1.2.1 生產(chǎn)性能測(cè)定

以每個(gè)重復(fù)為單位，每天記錄試驗(yàn)肉雞的采食量，統(tǒng)計(jì)飼料消耗數(shù)據(jù)，計(jì)算平均日采食量(Average Daily Feed Intake，ADFI)。于試驗(yàn)第14天稱取每個(gè)重復(fù)中的個(gè)體重量，計(jì)算各處理平均日增重(Average Daily Gain,ADG)。

1.2.2 器官指數(shù)計(jì)算

試驗(yàn)第14天，每個(gè)處理各取12羽雞(每個(gè)重復(fù)籠取2羽平均體重接近的雞)，頸動(dòng)脈放血屠宰后立刻剝離腺胃、肌胃、胰腺、脾臟、胸腺、法氏囊、心臟、肝臟，分別稱重記錄，計(jì)算器官相對(duì)重量(g/kg)。

1.2.3 腸道生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)

試驗(yàn)期第14天，每個(gè)處理各取12羽雞(每個(gè)重復(fù)籠取2羽平均體重接近的雞)，屠宰后及時(shí)分離出十二指腸、空腸、回腸、盲腸，剔除脂肪后稱重，計(jì)算器官絕對(duì)重量/活重(g/kg)。用皮尺分別測(cè)量十二指腸、空腸、回腸的自然長(zhǎng)度，以絕對(duì)長(zhǎng)度/活體重計(jì)算各腸段相對(duì)長(zhǎng)度(cm/kg)。

取1 cm左右十二指腸、空腸末端腸段和回腸中部腸段，制成石蠟切片標(biāo)本，用蘇木素-伊紅染色法染色，生物顯微鏡下觀察腸道形態(tài)變化，選取3處完整且走向平直的絨毛，利用Image-Pro Plus 6.0軟件測(cè)定絨毛高度(Viluss High，VH)和隱窩深度(Crypt Deph，CD)，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(VH/CD)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用Excel軟件整理所得數(shù)據(jù)，用SPSS 25軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析方法進(jìn)行組間兩兩比較，當(dāng)P＜0.05時(shí)，認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；差異顯著時(shí)采用Turkey法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 菊粉和魚(yú)腥草對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可看出，A組、B組與C組的ADFI、ADG和料肉比差異不顯著。

2.2 菊粉和魚(yú)腥草對(duì)肉雞器官指數(shù)的影響

由表3可看出，A組、B組及C組肉雞各器官指數(shù)之間差異不明顯，但B組和C組肉雞的胰腺器官指數(shù)較A組肉雞的提高了7.6%和2.6%，脾臟器官指數(shù)較A組肉雞的提高了12.3%和31.0%，胸腺器官指數(shù)較A組肉雞的提高了13.0%和12.6%，肝臟器官指數(shù)較A組肉雞的提高了9.5%和6.6%。

2.3 菊粉和魚(yú)腥草對(duì)肉雞腸道生長(zhǎng)發(fā)育及形態(tài)的影響

由表4可看出，B組、C組肉雞的回腸相對(duì)長(zhǎng)度和相對(duì)重量較A組肉雞的顯著提高 (P＜0.05)，C組肉雞盲腸的相對(duì)重量較A組肉雞的顯著增加(P＜0.05)。

由表5可知，和A組肉雞相比，B組、C組肉雞在十二指腸的VH/CD和絨毛高度，以及空腸的VH/CD上均顯著增加(P＜0.05)。

3 討論

腸道是肉雞消化吸收的主要器官。各腸段的長(zhǎng)度及重量反映了腸段的生長(zhǎng)發(fā)育程度，而發(fā)育程度又能反映消化吸收的功能。腸道絨毛高度、隱窩深度和VH/CD是衡量腸道消化吸收能力的重要指標(biāo)之一[24]。肝臟是動(dòng)物重要的代謝器官，腺胃、胰腺是分泌消化液的重要器官。這些器官的優(yōu)先發(fā)育使家禽可充分吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加速體重增長(zhǎng)，與此同時(shí)內(nèi)臟器官又得以充分發(fā)育，因此內(nèi)臟器官的發(fā)育與體重的增長(zhǎng)相互依存，內(nèi)臟器官發(fā)育的好壞決定著動(dòng)物生長(zhǎng)的快慢，是動(dòng)物生命的基礎(chǔ)“設(shè)施”，是動(dòng)物生理功能的載體[25]。由此可見(jiàn)胃腸道及其他內(nèi)臟器官的生長(zhǎng)發(fā)育直接影響肉雞的生長(zhǎng)性能。

從本試驗(yàn)的結(jié)果可以看出，飼料中同時(shí)添加菊粉和魚(yú)腥草顯著提高了肉雞回腸的相對(duì)長(zhǎng)度和相對(duì)重量。小腸長(zhǎng)度、采食量和增重間有一定的聯(lián)系，即隨著消化器官發(fā)育成熟，仔雞才能消化更多的養(yǎng)分來(lái)滿足快速生長(zhǎng)的需求[26]?；啬c的生理功能是消化和吸收食物，主要吸收維生素B12和膽鹽，并推動(dòng)食糜向后移動(dòng)。日糧中添加菊粉和魚(yú)腥草，增加了回腸長(zhǎng)度，延長(zhǎng)了日糧在消化道中停留的時(shí)間，提高了雛雞對(duì)日糧的利用率，使日糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的吸收更充分，從而加快雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育。

盲腸作為家禽消化粗纖維的主要場(chǎng)所，可同其內(nèi)部的細(xì)菌一起消化粗糙的植物纖維[27]。研究表明，在盲腸消化纖維過(guò)程中，大部分食物中的單糖與可溶性物質(zhì)因無(wú)法被小腸吸收而進(jìn)入盲腸，且盲腸可以根據(jù)蛋雞所攝入的食物類型改變其大小[28]。在本試驗(yàn)中，采食添加了菊粉和魚(yú)腥草日糧的C組肉雞盲腸器官指數(shù)較A組顯著提高(P＜0.05)，該結(jié)果與朱云芬的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加菊粉和魚(yú)腥草增加了盲腸的相對(duì)重量，但日糧中僅添加菊粉對(duì)肉雞盲腸器官指數(shù)影響不明顯。

VH/CD能反映動(dòng)物腸道健康和生長(zhǎng)性能，腸道絨毛的邊緣能夠分泌多種對(duì)消化吸收有利的酶，所以絨毛發(fā)育好的動(dòng)物分泌酶的能力會(huì)增強(qiáng)，從而增強(qiáng)動(dòng)物的消化吸收能力。而隱窩的深度能夠反映細(xì)胞生成率，與腸絨毛有絲分裂生成上皮細(xì)胞的速度密切相關(guān)。隱窩淺，意味著細(xì)胞的成熟率上升，上皮細(xì)胞不斷從隱窩基部向絨毛端遷移、分化，形成新的具有吸收能力的絨毛細(xì)胞；隱窩淺也意味著腸道的分泌功能增強(qiáng)。當(dāng)VH/CD下降時(shí)，表明黏膜已經(jīng)受損，腸道的消化吸收能力下降，常出現(xiàn)腹瀉、生長(zhǎng)受阻等現(xiàn)象。VH/CD上升表明腸道的消化吸收能力提高，腸道上皮細(xì)胞數(shù)量增加，腸道吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的面積增大，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率提高，功能物質(zhì)的合成增加。本研究數(shù)據(jù)顯示，與僅飼喂基礎(chǔ)日糧的A組肉雞相比飼喂添加了菊粉或菊粉與魚(yú)腥草的日糧的肉雞，它們的VH/CD均提高，這表明菊粉和魚(yú)腥草促進(jìn)了肉雞腸道的生長(zhǎng)發(fā)育，增大了肉雞腸道吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的面積，提高了腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。日糧中添加菊粉和魚(yú)腥草加快了肉雞后期體重的增長(zhǎng)，但是可能因?yàn)轱曃箷r(shí)間較短或菊粉添加量低，十二指腸、空腸和回腸絨毛高度/隱窩深度比值提高不顯著。

雞的中樞免疫器官由胸腺和法氏囊組成，它對(duì)外周淋巴器官的發(fā)育起支配和決定作用。脾臟為其外周免疫器官，其內(nèi)的免疫細(xì)胞具有很強(qiáng)的吞噬和過(guò)濾作用。雛雞的胰腺、脾臟、胸腺的發(fā)育情況及其機(jī)能狀況的強(qiáng)弱對(duì)免疫力起決定性作用。免疫器官指數(shù)是衡量動(dòng)物機(jī)體免疫水平的重要指標(biāo)，一般認(rèn)為免疫器官質(zhì)量降低為免疫抑制所致，免疫器官質(zhì)量增加為免疫增強(qiáng)的結(jié)果[29]。肝臟的發(fā)育狀況與機(jī)體的代謝功能密切相關(guān)，肝臟的器官指數(shù)提高表明機(jī)體的代謝功能有所上升。在本試驗(yàn)中，由于飼喂時(shí)間較短或菊粉添加量低，飼喂添加菊粉的B組和添加菊粉與魚(yú)腥草的C組肉雞部分免疫器官，如胰腺、脾臟、胸腺及肝臟的器官指數(shù)較A組肉雞的有提高，但不顯著，對(duì)機(jī)體免疫效果不明顯。故菊粉與魚(yú)腥草對(duì)肉雞器官指數(shù)的作用還有待進(jìn)一步研究。

由于魚(yú)腥草含有酚類、生物堿和總黃酮等活性成分，魚(yú)腥草能降低肉雞腸道微生物所產(chǎn)毒素的濃度。在肉雞的飼料中添加魚(yú)腥草能使肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率和成活率有所提高，且對(duì)肉雞的生長(zhǎng)性能有不同程度的促進(jìn)作用。周業(yè)飛在肉雞飼料中以0.1%、0.2%和0.4%的水平添加魚(yú)腥草，試驗(yàn)組肉雞的平均增重均顯著優(yōu)于對(duì)照組肉雞的，且添加0.2%魚(yú)腥草的試驗(yàn)組肉雞的料肉比顯著低于對(duì)照組肉雞的[14]。顧憲紅等研究表明，添加不同劑量的菊粉對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響效果不同。添加適當(dāng)?shù)木辗勰芴岣咦胸i的平均日采食量、平均日增重和飼料報(bào)酬，但是當(dāng)菊粉添加過(guò)量時(shí)則有相反作用[30]。王中華等分別給斷奶仔豬飼喂含0、1%、1.5%、2%菊粉的日糧，試驗(yàn)結(jié)果表明飼料中添加菊粉能提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，且飼料中添加1.5%的菊粉效果最好[31]。然而Ortiz等[32]研究表明，與日糧添加抗生素或不添加抗生素的陽(yáng)性對(duì)照組或陰性對(duì)照組的肉雞相比，不同水平的菊粉對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能無(wú)明顯影響。在本試驗(yàn)中，B組肉雞的料肉比較A組肉雞的有所提高，而C組肉雞的料肉比卻比A組肉雞的低。這表明在飼料中添加1%的菊粉降低了雛雞的生長(zhǎng)性能，該結(jié)果與王中華等試驗(yàn)結(jié)果有出入，究其原因可能是本試驗(yàn)雛雞飼喂時(shí)間較短，菊粉對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的作用還沒(méi)有顯現(xiàn)出來(lái)。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，同時(shí)添加1%菊粉和0.4%魚(yú)腥草可提高雛雞的生長(zhǎng)性能。菊粉和魚(yú)腥草作為天然的中草藥添加劑，可共同調(diào)節(jié)雛雞腸道健康，促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)發(fā)育。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加菊粉和魚(yú)腥草可以促進(jìn)黃羽肉雞腸道的發(fā)育，減小VH/CD，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。同時(shí)，添加菊粉和魚(yú)腥草能夠提高肉雞的免疫器官指數(shù)但不顯著，此外，菊粉和魚(yú)腥草可顯著提高盲腸器官指數(shù)。