陸牡龍，黃恩媛，陶秋妍，何曉芳

(金陵科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 211169)

過去，畜禽養(yǎng)殖長期使用抗生素，導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)抗生素殘留，嚴(yán)重影響人類的食品安全。近年來，中草藥作為天然藥物，憑借其無污染、無殘留、無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，引起養(yǎng)殖業(yè)的廣泛關(guān)注[1]。中草藥作為飼料添加劑有著悠久的歷史，從公元前三世紀(jì)的《神農(nóng)本草經(jīng)》到后來的《淮南萬畢術(shù)》《齊民要術(shù)》《農(nóng)政全書》等書，都有將中草藥用作飼料添加劑的記載。明朝李時(shí)珍所著《本草綱目》記載了16種可作飼料、令家畜肥壯的藥物，包括菊粉(inulin)、魚腥草、薄荷等[2]。由于飼料中禁止添加促生長類抗生素，研究人員將中草藥作為天然的抗生素替代品對肉雞生產(chǎn)性能及生產(chǎn)力的影響進(jìn)行了評估。這些天然的抗生素替代品，一般以芳香植物精油、益生菌、植物素或益生元的形式存在[3]。

菊粉，又名菊糖，是植物中儲(chǔ)備性生物多糖之一，呈白色粉狀，微甜，溶于水，有黏性[4]。大量研究表明，菊粉作為一種天然飼料添加劑，有改善畜禽腸道環(huán)境、促進(jìn)腸道蠕動(dòng)、平衡腸道微生物、調(diào)控機(jī)體脂質(zhì)代謝、提高機(jī)體免疫力的作用[5]。菊粉還可以促進(jìn)礦物質(zhì)的吸收和維生素的合成，大大提高鈣、鎂、鋅、銅、鐵等礦物質(zhì)的吸收，促進(jìn)B族維生素及葉酸的合成，提高動(dòng)物機(jī)體的新陳代謝速率，增強(qiáng)免疫力和抵抗力[6]。菊粉在動(dòng)物小腸中不易消化，對腸道菌群的調(diào)節(jié)起著重要作用，能特異性促進(jìn)益生菌在結(jié)腸定植，進(jìn)而改善腸道健康[7]。研究表明，含有低聚果糖、菊粉和菊粉型果聚糖的不可消化碳水化合物可以對動(dòng)物腸道菌群進(jìn)行調(diào)節(jié)，可被腸道微生物發(fā)酵，能緩解非酒精性脂肪性肝病[8]。有關(guān)研究表明，菊粉可刺激動(dòng)物腸道中有益菌的生長，提高其活性，阻止病原菌繁殖。此外，將菊粉和低聚果糖混合飼喂肉雞可改善腸黏膜結(jié)構(gòu)，促進(jìn)養(yǎng)分的吸收利用[9]。向岑等[10]在小鼠飼料中加入不同劑量的菊粉來研究菊粉對小鼠腸道微生物的影響，結(jié)果顯示，添加中等劑量菊粉(10%添加量)最有利于保持個(gè)體腸道菌群的多樣性。對小鼠腸道菌群研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，菊粉可提高小鼠腸道內(nèi)有益菌的比例，幫助菌群恢復(fù)，緩解小鼠的菌群失調(diào)[11]。在無特定病原體雞上的研究表明，添加菊粉可以提高其腸道免疫力，且菊粉對腸道免疫功能的影響呈劑量依賴性[12]。有研究報(bào)道，在日糧中添加5 g/kg～10 g/kg的菊粉可以增強(qiáng)未完全發(fā)育的腸道的免疫功能，同時(shí)隨著菊粉添加量的加大，回腸組織中CD4＋T淋巴細(xì)胞的比例和CD4＋/CD8＋比值呈線性增加[13]。有研究報(bào)道，添加0.2%的菊粉可促進(jìn)肉雞生長、提高肉雞免疫力[14]。此外，日糧中添加0.3%、0.4%和0.5%魚腥草可以改善肉雞的脂類代謝[15]。

魚腥草最早以岑草出現(xiàn)在《吳越春秋》中，因其葉有腥氣，被李時(shí)珍在《本草綱目》中稱為魚腥草[16]。魚腥草含有多種黃酮類、揮發(fā)性物質(zhì)、有機(jī)酸、生物堿及維生素等成分[17]，有研究指出，通過水或有機(jī)溶劑從魚腥草中提取的成分對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用[18]。魚腥草可以增加產(chǎn)蛋母雞腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌的含量，這些有益菌分泌出的短鏈脂肪酸，既可以為腸絨毛細(xì)胞提供能量，又可增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量，減少腸內(nèi)炎癥反應(yīng)[19]。如魚腥草煎劑可顯著降低雛雞體內(nèi)的大腸桿菌數(shù)量，提高雛雞免疫器官指數(shù)，促進(jìn)雛雞免疫器官發(fā)育[20]。有研究表明，以大葉青葉、連翹、黃芩、魚腥草和金銀花為配方的中草藥能顯著抑制新城疫病毒的細(xì)胞侵染能力，可作為抵抗新城疫病毒的潛在治療藥物[21]。鮮魚腥草提取物可減輕脂多糖誘導(dǎo)的小鼠肺部炎癥，減少炎癥細(xì)胞的浸潤[22]。

中草藥添加劑兼有營養(yǎng)和治療作用，具有無抗藥性、無殘留、無毒副作用的優(yōu)點(diǎn)[23]，本研究在日糧中添加菊粉和魚腥草兩種中藥添加劑，探析其對肉雞生長性能、關(guān)鍵器官指數(shù)及腸道發(fā)育的影響，旨在為探究菊粉和魚腥草作為一種綠色飼料添加劑提供一定的理論根據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 日糧制備

A組肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧，B組肉雞喂給由基礎(chǔ)日糧＋1%菊粉組成的飼料，C組肉雞采用由基礎(chǔ)日糧＋1%菊粉和0.4%魚腥草組成的飼料?；A(chǔ)日糧組成及其營養(yǎng)成分見表1[參照NRC(1994)《家禽的營養(yǎng)需要量》]。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

試驗(yàn)動(dòng)物預(yù)飼14 d后進(jìn)行試驗(yàn)。將108羽14日齡黃羽肉雞隨機(jī)分成3組(A組、B組和C組)，即3個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6羽雞，籠養(yǎng)，自由飲水和采食，保持舍內(nèi)空氣新鮮、光照持續(xù)。舍內(nèi)溫度保持22 ℃～24 ℃，濕度保持50%～70%。A組采用基礎(chǔ)日糧，B組使用在基礎(chǔ)日糧中添加1%菊粉后組成的飼料，C組采用在基礎(chǔ)日糧中添加1%菊粉和0.4%魚腥草后配制成的飼料，連續(xù)飼喂14 d后測定各項(xiàng)指標(biāo)。

1.1.3 試驗(yàn)藥品

菊粉購自西安圣青生物科技有限公司，純度90%；魚腥草提取物由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院贈(zèng)送，純度100%。

1.2 測定項(xiàng)目和方法

1.2.1 生產(chǎn)性能測定

以每個(gè)重復(fù)為單位，每天記錄試驗(yàn)肉雞的采食量，統(tǒng)計(jì)飼料消耗數(shù)據(jù)，計(jì)算平均日采食量(Average Daily Feed Intake，ADFI)。于試驗(yàn)第14天稱取每個(gè)重復(fù)中的個(gè)體重量，計(jì)算各處理平均日增重(Average Daily Gain,ADG)。

1.2.2 器官指數(shù)計(jì)算

試驗(yàn)第14天，每個(gè)處理各取12羽雞(每個(gè)重復(fù)籠取2羽平均體重接近的雞)，頸動(dòng)脈放血屠宰后立刻剝離腺胃、肌胃、胰腺、脾臟、胸腺、法氏囊、心臟、肝臟，分別稱重記錄，計(jì)算器官相對重量(g/kg)。

1.2.3 腸道生長發(fā)育指標(biāo)

試驗(yàn)期第14天，每個(gè)處理各取12羽雞(每個(gè)重復(fù)籠取2羽平均體重接近的雞)，屠宰后及時(shí)分離出十二指腸、空腸、回腸、盲腸，剔除脂肪后稱重，計(jì)算器官絕對重量/活重(g/kg)。用皮尺分別測量十二指腸、空腸、回腸的自然長度，以絕對長度/活體重計(jì)算各腸段相對長度(cm/kg)。

取1 cm左右十二指腸、空腸末端腸段和回腸中部腸段，制成石蠟切片標(biāo)本，用蘇木素-伊紅染色法染色，生物顯微鏡下觀察腸道形態(tài)變化，選取3處完整且走向平直的絨毛，利用Image-Pro Plus 6.0軟件測定絨毛高度(Viluss High，VH)和隱窩深度(Crypt Deph，CD)，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(VH/CD)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用Excel軟件整理所得數(shù)據(jù)，用SPSS 25軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析方法進(jìn)行組間兩兩比較，當(dāng)P＜0.05時(shí)，認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；差異顯著時(shí)采用Turkey法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 菊粉和魚腥草對肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可看出，A組、B組與C組的ADFI、ADG和料肉比差異不顯著。

2.2 菊粉和魚腥草對肉雞器官指數(shù)的影響

由表3可看出，A組、B組及C組肉雞各器官指數(shù)之間差異不明顯，但B組和C組肉雞的胰腺器官指數(shù)較A組肉雞的提高了7.6%和2.6%，脾臟器官指數(shù)較A組肉雞的提高了12.3%和31.0%，胸腺器官指數(shù)較A組肉雞的提高了13.0%和12.6%，肝臟器官指數(shù)較A組肉雞的提高了9.5%和6.6%。

2.3 菊粉和魚腥草對肉雞腸道生長發(fā)育及形態(tài)的影響

由表4可看出，B組、C組肉雞的回腸相對長度和相對重量較A組肉雞的顯著提高 (P＜0.05)，C組肉雞盲腸的相對重量較A組肉雞的顯著增加(P＜0.05)。

由表5可知，和A組肉雞相比，B組、C組肉雞在十二指腸的VH/CD和絨毛高度，以及空腸的VH/CD上均顯著增加(P＜0.05)。

3 討論

腸道是肉雞消化吸收的主要器官。各腸段的長度及重量反映了腸段的生長發(fā)育程度，而發(fā)育程度又能反映消化吸收的功能。腸道絨毛高度、隱窩深度和VH/CD是衡量腸道消化吸收能力的重要指標(biāo)之一[24]。肝臟是動(dòng)物重要的代謝器官，腺胃、胰腺是分泌消化液的重要器官。這些器官的優(yōu)先發(fā)育使家禽可充分吸收營養(yǎng)物質(zhì)，加速體重增長，與此同時(shí)內(nèi)臟器官又得以充分發(fā)育，因此內(nèi)臟器官的發(fā)育與體重的增長相互依存，內(nèi)臟器官發(fā)育的好壞決定著動(dòng)物生長的快慢，是動(dòng)物生命的基礎(chǔ)“設(shè)施”，是動(dòng)物生理功能的載體[25]。由此可見胃腸道及其他內(nèi)臟器官的生長發(fā)育直接影響肉雞的生長性能。

從本試驗(yàn)的結(jié)果可以看出，飼料中同時(shí)添加菊粉和魚腥草顯著提高了肉雞回腸的相對長度和相對重量。小腸長度、采食量和增重間有一定的聯(lián)系，即隨著消化器官發(fā)育成熟，仔雞才能消化更多的養(yǎng)分來滿足快速生長的需求[26]?；啬c的生理功能是消化和吸收食物，主要吸收維生素B12和膽鹽，并推動(dòng)食糜向后移動(dòng)。日糧中添加菊粉和魚腥草，增加了回腸長度，延長了日糧在消化道中停留的時(shí)間，提高了雛雞對日糧的利用率，使日糧中營養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的吸收更充分，從而加快雛雞的生長發(fā)育。

盲腸作為家禽消化粗纖維的主要場所，可同其內(nèi)部的細(xì)菌一起消化粗糙的植物纖維[27]。研究表明，在盲腸消化纖維過程中，大部分食物中的單糖與可溶性物質(zhì)因無法被小腸吸收而進(jìn)入盲腸，且盲腸可以根據(jù)蛋雞所攝入的食物類型改變其大小[28]。在本試驗(yàn)中，采食添加了菊粉和魚腥草日糧的C組肉雞盲腸器官指數(shù)較A組顯著提高(P＜0.05)，該結(jié)果與朱云芬的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加菊粉和魚腥草增加了盲腸的相對重量，但日糧中僅添加菊粉對肉雞盲腸器官指數(shù)影響不明顯。

VH/CD能反映動(dòng)物腸道健康和生長性能，腸道絨毛的邊緣能夠分泌多種對消化吸收有利的酶，所以絨毛發(fā)育好的動(dòng)物分泌酶的能力會(huì)增強(qiáng)，從而增強(qiáng)動(dòng)物的消化吸收能力。而隱窩的深度能夠反映細(xì)胞生成率，與腸絨毛有絲分裂生成上皮細(xì)胞的速度密切相關(guān)。隱窩淺，意味著細(xì)胞的成熟率上升，上皮細(xì)胞不斷從隱窩基部向絨毛端遷移、分化，形成新的具有吸收能力的絨毛細(xì)胞；隱窩淺也意味著腸道的分泌功能增強(qiáng)。當(dāng)VH/CD下降時(shí)，表明黏膜已經(jīng)受損，腸道的消化吸收能力下降，常出現(xiàn)腹瀉、生長受阻等現(xiàn)象。VH/CD上升表明腸道的消化吸收能力提高，腸道上皮細(xì)胞數(shù)量增加，腸道吸收營養(yǎng)物質(zhì)的面積增大，營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率提高，功能物質(zhì)的合成增加。本研究數(shù)據(jù)顯示，與僅飼喂基礎(chǔ)日糧的A組肉雞相比飼喂添加了菊粉或菊粉與魚腥草的日糧的肉雞，它們的VH/CD均提高，這表明菊粉和魚腥草促進(jìn)了肉雞腸道的生長發(fā)育，增大了肉雞腸道吸收營養(yǎng)物質(zhì)的面積，提高了腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。日糧中添加菊粉和魚腥草加快了肉雞后期體重的增長，但是可能因?yàn)轱曃箷r(shí)間較短或菊粉添加量低，十二指腸、空腸和回腸絨毛高度/隱窩深度比值提高不顯著。

雞的中樞免疫器官由胸腺和法氏囊組成，它對外周淋巴器官的發(fā)育起支配和決定作用。脾臟為其外周免疫器官，其內(nèi)的免疫細(xì)胞具有很強(qiáng)的吞噬和過濾作用。雛雞的胰腺、脾臟、胸腺的發(fā)育情況及其機(jī)能狀況的強(qiáng)弱對免疫力起決定性作用。免疫器官指數(shù)是衡量動(dòng)物機(jī)體免疫水平的重要指標(biāo)，一般認(rèn)為免疫器官質(zhì)量降低為免疫抑制所致，免疫器官質(zhì)量增加為免疫增強(qiáng)的結(jié)果[29]。肝臟的發(fā)育狀況與機(jī)體的代謝功能密切相關(guān)，肝臟的器官指數(shù)提高表明機(jī)體的代謝功能有所上升。在本試驗(yàn)中，由于飼喂時(shí)間較短或菊粉添加量低，飼喂添加菊粉的B組和添加菊粉與魚腥草的C組肉雞部分免疫器官，如胰腺、脾臟、胸腺及肝臟的器官指數(shù)較A組肉雞的有提高，但不顯著，對機(jī)體免疫效果不明顯。故菊粉與魚腥草對肉雞器官指數(shù)的作用還有待進(jìn)一步研究。

由于魚腥草含有酚類、生物堿和總黃酮等活性成分，魚腥草能降低肉雞腸道微生物所產(chǎn)毒素的濃度。在肉雞的飼料中添加魚腥草能使肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率和成活率有所提高，且對肉雞的生長性能有不同程度的促進(jìn)作用。周業(yè)飛在肉雞飼料中以0.1%、0.2%和0.4%的水平添加魚腥草，試驗(yàn)組肉雞的平均增重均顯著優(yōu)于對照組肉雞的，且添加0.2%魚腥草的試驗(yàn)組肉雞的料肉比顯著低于對照組肉雞的[14]。顧憲紅等研究表明，添加不同劑量的菊粉對動(dòng)物生長性能的影響效果不同。添加適當(dāng)?shù)木辗勰芴岣咦胸i的平均日采食量、平均日增重和飼料報(bào)酬，但是當(dāng)菊粉添加過量時(shí)則有相反作用[30]。王中華等分別給斷奶仔豬飼喂含0、1%、1.5%、2%菊粉的日糧，試驗(yàn)結(jié)果表明飼料中添加菊粉能提高斷奶仔豬的生長性能，且飼料中添加1.5%的菊粉效果最好[31]。然而Ortiz等[32]研究表明，與日糧添加抗生素或不添加抗生素的陽性對照組或陰性對照組的肉雞相比，不同水平的菊粉對肉雞生長性能無明顯影響。在本試驗(yàn)中，B組肉雞的料肉比較A組肉雞的有所提高，而C組肉雞的料肉比卻比A組肉雞的低。這表明在飼料中添加1%的菊粉降低了雛雞的生長性能，該結(jié)果與王中華等試驗(yàn)結(jié)果有出入，究其原因可能是本試驗(yàn)雛雞飼喂時(shí)間較短，菊粉對雛雞生長性能的作用還沒有顯現(xiàn)出來。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，同時(shí)添加1%菊粉和0.4%魚腥草可提高雛雞的生長性能。菊粉和魚腥草作為天然的中草藥添加劑，可共同調(diào)節(jié)雛雞腸道健康，促進(jìn)雛雞生長發(fā)育。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加菊粉和魚腥草可以促進(jìn)黃羽肉雞腸道的發(fā)育，減小VH/CD，提高營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。同時(shí)，添加菊粉和魚腥草能夠提高肉雞的免疫器官指數(shù)但不顯著，此外，菊粉和魚腥草可顯著提高盲腸器官指數(shù)。