梁智欣，王 朗，周麗珊，陳 榕，何 煒，唐安戊（通訊作者）

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)金沙洲醫(yī)院核醫(yī)學(xué)部PET-CT中心 廣東 廣州 510168）

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤類型，其發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì)，同時(shí)晚期甲狀腺癌的死亡率亦呈增高趨勢(shì)，已成為嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病[1]。甲狀腺癌臨床上主要類型為甲狀腺濾泡癌（follicular thyroid cancer, FTC）、乳頭狀癌（papillary thyroid cancer, PTC）及嗜酸細(xì)胞腫瘤（Hürthle cell thyroid tumor），約占全部類型的90%，這三類癌細(xì)胞均有不同程度的分化，故稱為分化型甲狀腺癌（differentiated thyroid cancer, DTC）。分化型甲狀腺癌中絕大多數(shù)患者經(jīng)過(guò)規(guī)范化治療后癌細(xì)胞擴(kuò)散程度減輕，預(yù)后良好，但仍有接近1/4患者出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，這部分患者的癌細(xì)胞形態(tài)和功能都發(fā)生退化，甚至到達(dá)未分化狀態(tài)，此時(shí)細(xì)胞攝碘能力喪失，臨床上I131療法療效甚微，發(fā)展為碘難治性DTC（radioiodine refractorydifferentiated thyroid cancer, RAIR-DTC）[2]，不僅如此，這部分患者平均生存時(shí)間短、死亡率高，對(duì)于傳統(tǒng)療法如手術(shù)或內(nèi)分泌治療也不太敏感，臨床預(yù)后很差，故對(duì)于RAIR-DTC攝碘能力丟失的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行深入探索有助于發(fā)現(xiàn)治療RAIR-DTC的新靶點(diǎn)，對(duì)于提高患者生存、改善患者生存質(zhì)量具有重要意義。

Na+/I轉(zhuǎn)運(yùn)體（NIS）是一種糖蛋白，也被稱為碘泵，位于甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的細(xì)胞膜上。NIS參與碘的吸收過(guò)程，并在碘的運(yùn)輸中起到限速作用。在正常人體內(nèi)，甲狀腺組織中NIS的表達(dá)水平高于其他組織[3]。然而，在部分難治性甲狀腺癌患者中由于NIS基因定位障礙和NIS蛋白表達(dá)水平降低，碘吸收能力減少甚至完全喪失，可能是導(dǎo)致I131治療效果差和預(yù)后不良的主要原因。通過(guò)改善NIS的功能定位和表達(dá)水平，可提高甲狀腺癌組織對(duì)碘的吸收能力[4]。因此，在本研究中，我們旨在探討RAIR-DTC患者甲狀腺癌細(xì)胞中NIS的表達(dá)水平。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年6月—2020年6月就診于我院普通外科，確診為碘難治性分化型甲狀腺癌患者共126例作為研究組，另選取同期碘治療有效分化型甲狀腺癌患者126例作為對(duì)照組。

1.2 納排標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：行甲狀腺全切術(shù)且病理診斷明確分化型甲狀腺癌患者；術(shù)后應(yīng)用I131進(jìn)行治療；臨床資料收集完善。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重心臟、肝臟、腎臟疾病者；合并有其他部位腫瘤患者；基礎(chǔ)狀態(tài)差，不能配合完成相關(guān)資料收集者。（3）碘難治性甲狀腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)碘難治性分化型甲狀腺癌的診治管理共識(shí)（2019年版）[5]：在無(wú)外源性碘負(fù)荷干擾的情況下，促甲狀腺激素（thyroid-stimulating hormone, TSH）刺激狀態(tài)（＞30mIU/L）時(shí)，出現(xiàn)下列情形之一即可界定為RAIR-DTC：①轉(zhuǎn)移灶在清甲成功后的首次I131治療后全身顯像中即表現(xiàn)為不攝碘，致其無(wú)法從后續(xù)的I131治療中獲益；②原本攝碘的功能性轉(zhuǎn)移灶經(jīng)I131治療后逐漸喪失攝碘能力；③部分轉(zhuǎn)移灶攝碘，而部分轉(zhuǎn)移灶不攝碘，且可被18F-FDG PET/CT、CT或MRI等其他影像學(xué)檢查手段所顯示；④攝碘轉(zhuǎn)移灶在經(jīng)過(guò)多次I131治療后雖然保持?jǐn)z碘能力但仍在1年內(nèi)出現(xiàn)病情進(jìn)展，包括病灶逐漸增長(zhǎng)、出現(xiàn)新發(fā)病灶、血清甲狀腺球蛋白（thyrogloblin, Tg）持續(xù)上升等。

1.3 檢查方法

免疫組化檢測(cè)NIS的含量。取患者腫瘤組織制作石蠟切片，觀察腫瘤細(xì)胞形態(tài)（HE染色）。脫蠟，消除 H2O2活性，封閉，一抗孵育，二抗孵育，DAB顯色，復(fù)染，脫水，透明，封片。觀察結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)

NIS在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。表達(dá)水平判斷：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)：比例＞75%為4分，51%～75%為3分，26%～50%為2分，10%～25%為1分，＜10%為0分；染色：深棕或褐色3分，棕黃色2分，淺黃色1分；陽(yáng)性判斷：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)評(píng)分×染色深度評(píng)分，≥3分為陽(yáng)性，＜3分為陰性。比較研究組和對(duì)照組的陽(yáng)性率和陽(yáng)性積分。評(píng)估納入患者SPECT-CT碘131顯像情況，SPECT-CT所用設(shè)備為西門子Intevo Bold。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有值以百分?jǐn)?shù)和平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。數(shù)據(jù)分析使用校正t檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者一般臨床資料

研究組126例患者中男性53例，女性73例，年齡介于38～77歲之間，平均年齡（51.21±3.87）歲；對(duì)照組男性60例，女性66例，年齡介于42～76歲之間；平均年齡（52.01±3.73）歲。兩組患者的一般臨床資料之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可進(jìn)行研究。

2.2 兩組患者NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分比較

NIS全部表達(dá)在甲狀腺濾泡胞漿內(nèi)。如表1所示，研究組NIS陽(yáng)性率為32.54%，對(duì)照組NIS陽(yáng)性率為100%，顯著高于研究組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；對(duì)照組NIS陽(yáng)性積分顯著高于研究組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 兩組NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分

2.3 評(píng)估兩組患者SPECT-CT碘131顯像情況

研究組SPECT-CT碘131顯像顯著低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組SPECT-CT碘131顯像情況

2.4 兩種病理類型的NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分

將研究組進(jìn)一步根據(jù)病理類型分為甲狀腺乳頭狀癌（共88例，男46例，女42例）和甲狀腺濾泡癌（共38例，男21例，女17例），比較兩種病理類型的NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分，兩組NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分均明顯偏低，兩組間統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)差異，見表3。

表3 不同病理類型甲狀腺癌NIS陽(yáng)性率及陽(yáng)性積分

3 討論

NIS是一種糖蛋白，位于上皮細(xì)胞膜上，其基因位于19號(hào)染色體短臂上。NIS通過(guò)鈉-鉀泵將碘帶入細(xì)胞質(zhì)，對(duì)維持甲狀腺對(duì)碘的吸收能力有重要作用，同時(shí)也參與甲狀腺激素的合成。此外，NIS也可能在其他部位表達(dá)，如乳腺和前列腺[6]。目前，甲狀腺癌的綜合治療方法包括手術(shù)輔助內(nèi)分泌治療和放射性I131治療。放射性I131治療對(duì)未分化甲狀腺癌和轉(zhuǎn)移瘤的診斷和治療至關(guān)重要[7]。放射性I131對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用的前提是腫瘤細(xì)胞具有較高的碘吸收能力[8]。既往研究指出，PTEN/PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮作經(jīng)常參與調(diào)節(jié)NIS蛋白質(zhì)合成[9]。PTEN/PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路過(guò)活躍可能影響細(xì)胞中NIS蛋白的位置，NIS對(duì)TPC-1細(xì)胞具有明顯的抑制PI3K/AKT信號(hào)的作用，提示NIS對(duì)TPC-1細(xì)胞的抗癌作用[10]。

本研究結(jié)果顯示，碘難治組NIS陽(yáng)性率低，而對(duì)照組NIS為100%，同時(shí)對(duì)照組NIS 陽(yáng)性積分顯著高于研究組，那么我們有理由認(rèn)為NIS發(fā)揮抗癌作用的機(jī)制很可能與NIS蛋白增加細(xì)胞對(duì)碘的攝取能力，從而提高I131治療的敏感性和療效密切相關(guān)，提高NIS的表達(dá)可能是增敏碘難治性甲狀腺癌I131治療的一個(gè)調(diào)控靶點(diǎn)。