黎純敏，江 蕾

(西昌市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 西昌 615000)

0 引言

禽流感(Avian influenza，AI)是由正黏病毒科A型流感病毒屬病毒引起的一種禽類感染綜合征，從無(wú)臨床癥狀感染到死亡率接近100%的嚴(yán)重全身性疾病不等。根據(jù)其致病性的高低將其分為高致病性禽流感(HPAI)和中低致病性禽流感(MPAI)。迄今為止，高致病性禽流感病毒(AIV)都是H5和H7血清亞型。世界衛(wèi)生組織(OIE)將高致病性禽流感列為A類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物傳染病，并實(shí)行強(qiáng)制免疫政策。為了解西昌市2020年秋季禽流感強(qiáng)制免疫疫苗重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株)的免疫效果，西昌市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室對(duì)全市抽檢的164份免疫家禽血清進(jìn)行了禽流感H5-Re11株、H5-Re12株和H7-Re2株抗體檢測(cè)，為西昌市禽流感的有效防控提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料

1.1 儀器設(shè)備

37℃恒溫培養(yǎng)箱、單道微量移液器、8道微量移液器、96孔v型反應(yīng)板、微量震蕩器、錐形瓶等。

1.2 檢測(cè)試劑

1.2.1 抗原

1)禽流感病毒H5亞型(Re-11株)血凝抑制試驗(yàn)抗原，生產(chǎn)批號(hào)：2019007，生產(chǎn)日期：20190824，有效期：20210823，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司。

2)禽流感病毒H5亞型(Re-12株)血凝抑制試驗(yàn)抗原，生產(chǎn)批號(hào)：2019007，生產(chǎn)日期：20190828，有效期：20210827，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司。

3)禽流感病毒H7亞型(H7-Re2株)血凝抑制試驗(yàn)抗原，生產(chǎn)批號(hào)：2019007，生產(chǎn)日期：20190916，有效期：20210915，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司。

1.2.2 陰性血清

通用型，生產(chǎn)批號(hào)：20191210，生產(chǎn)日期：20191210，有效期：20211209，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱國(guó)生生物技術(shù)有限公司。

1.2.3 陽(yáng)性血清

1)禽流感病毒H5亞型(Re-11株)陽(yáng)性血清(雞)：生產(chǎn)批號(hào)：2019005，生產(chǎn)日期：20190814，有效期：20210813，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司。

2)禽流感病毒H5亞型(Re-12株)陽(yáng)性血清(雞)：生產(chǎn)批號(hào)：2019004，生產(chǎn)日期：20190806，有效期：20210805，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司。

3)禽流感病毒 H7亞型(H7-Re2株)陽(yáng)性血清(雞)：生產(chǎn)批號(hào)：2019005，生產(chǎn)日期：20190912，有效期：20210911，規(guī)格：2 mL，生產(chǎn)廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司。

2 方法

2.1 樣品采集

免疫家禽血清樣品隨機(jī)采自西昌市7個(gè)片區(qū)10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，涵蓋西昌市境內(nèi)的家禽養(yǎng)殖散戶與規(guī)模場(chǎng)。2020年秋季共抽檢雞全血95份，鴨全血69份，共計(jì)164份，全血采集后分離血清進(jìn)行抗體檢測(cè)。

2.2 檢測(cè)方法

禽流感病毒H5和H7抗體檢測(cè)操作步驟和結(jié)果判定均按照國(guó)標(biāo)GB/T18936-2003進(jìn)行。對(duì)采集的所有的雞、鴨血清進(jìn)行禽流感病毒H5-Re11株、H5-Re12株和H7-Re2株抗體檢測(cè)。

3 結(jié)果

3.1 禽流感病毒H5-Re11株

共檢測(cè)雞、鴨免疫血清164份，合格159份，總合格率 96.95%。如表1所示，全市10個(gè)被抽檢的鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道辦雞、鴨免疫禽流感病毒H5-Re11株疫苗，抗體合格率最低為75%，最高達(dá)100%。

表1 2020年西昌市秋季禽流感病毒H5-Re11株免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3.2 禽流感病毒H5-Re12株

共檢測(cè)雞和鴨免疫血清164份，合格159份，總合格率96.95%。如表2所示，全市10個(gè)被抽檢鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道辦雞、鴨免疫禽流感病毒H5-Re12株疫苗，抗體合格率最低75%，最高達(dá)100%。

表2 2020年西昌市秋季禽流感病毒H5-Re12株免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3.3 禽流感病毒H7-Re2株

共檢測(cè)雞和鴨免疫血清164份，合格156份，總合格率95.12%。如表3所示，全市共有10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道辦抽檢雞、鴨免疫了禽流感病毒H7-Re2株疫苗，抗體合格率最低78.26%，最高達(dá)100%。

表3 2020年西昌市秋季禽流感病毒H7-Re2株免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

4 討論

2020年秋季西昌市被抽檢的10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的重組禽流感病毒(H5+H7)三價(jià)滅活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株)強(qiáng)制免疫疫苗產(chǎn)生的免疫抗體交叉保護(hù)力群體合格率均達(dá)到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上的要求。該檢測(cè)結(jié)果表明：①西昌市境內(nèi)家禽禽流感病毒強(qiáng)制免疫產(chǎn)生的抗體交叉保護(hù)力取得了較好的群體免疫效果，能抵抗相應(yīng)禽流感病毒毒株引起的疫病大流行。②西昌市境內(nèi)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)應(yīng)注意及時(shí)加強(qiáng)免疫并進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，根據(jù)抗體檢測(cè)情況及時(shí)調(diào)整免疫程序，保證家禽維持有效抗體保護(hù)水平。