韓志雙 胡鳳

摘 ? 要：本實(shí)驗(yàn)采用API 20E鑒定系統(tǒng)和國標(biāo)生化鑒定方法，分別對(duì)2020年四川省市場(chǎng)監(jiān)督管理局能力驗(yàn)證計(jì)劃提供的樣品中分離得到的沙門氏菌可疑菌落進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果均為沙門氏菌陽性，故可用于對(duì)食品中腸桿菌科致病菌的鑒定，且API 20E鑒定系統(tǒng)更優(yōu)于傳統(tǒng)生化鑒定方法。

關(guān)鍵詞：API 20E ?沙門氏菌 ?鑒定

沙門氏菌是一種食源性致病菌，且大多數(shù)食品在生產(chǎn)過程中易接觸到此類污染物，這也是食品被沙門氏菌污染的重要途徑。其中，畜禽肉類、蛋類、乳制品等食品最易受到該菌的污染，尤其是生鮮[1]類食品。由于沙門氏菌對(duì)人類的健康威脅較大，故世界各國普遍規(guī)定食品中不得檢出該菌。

我國國標(biāo)方法GB 4789.4-2016[2]中規(guī)定了食品中沙門氏菌的檢驗(yàn)方法，如傳統(tǒng)的生化鑒定方法，但該方法所需時(shí)間較長(zhǎng)且工作量較大。目前，由于微生物自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)與常規(guī)鑒定方法相比具有準(zhǔn)確、快速地發(fā)現(xiàn)和鑒定病原體的特點(diǎn)，因此被越來越多地應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、疾病控制等領(lǐng)域[3]。API 20E是梅里埃公司根據(jù)酶促反應(yīng)及代謝產(chǎn)物檢測(cè)而研制的腸桿菌生化鑒定試劑條，API 20E細(xì)菌鑒定系統(tǒng)則為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)，也是腸桿菌科和弧菌的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)。

本研究將API 20E鑒定系統(tǒng)運(yùn)用于食品中沙門氏菌的檢驗(yàn)，并同國標(biāo)中的生化鑒定方法結(jié)果相比較。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備及試劑

1.1.1 國標(biāo)生化鑒定方法

生化試劑盒、陽性對(duì)照乙型副傷寒沙門氏菌，由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司制造提供。

1.1.2 API 20E法

API 20E試劑盒、API LAB軟件，法國生物梅里埃公司制造提供。

1.1.3 供試品來源

奶粉樣品由四川省食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院提供。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 國標(biāo)生化鑒定方法

樣品按GB 4789.4-2016經(jīng)過選擇性瓊脂平板增菌，經(jīng)TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌后，將菌落純化，配制成菌懸液，具體按廠家提供的試劑盒使用說明書執(zhí)行。

1.2.2 API 20E法

樣品按GB 4789.4-2016經(jīng)過選擇性瓊脂平板增菌，經(jīng)TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌后，將菌落純化，配制成菌懸液，接種于試劑條，于36℃培養(yǎng)18～24h，觀察生化反應(yīng)結(jié)果。然后，根據(jù)API LAB軟件得到鑒定結(jié)果。

2 結(jié)果和討論

2.1 結(jié)果

生化鑒定結(jié)果見表1，API 20E鑒定結(jié)果見表2。

2.2討論

綜上所述，API 20E鑒定系統(tǒng)和國標(biāo)生化鑒定方法均適用于沙門氏菌的鑒定。API 20E是腸桿菌科與其它G一桿菌和弧菌的標(biāo)準(zhǔn)鑒定系統(tǒng)，即可以用一種鑒定試劑條來鑒定大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌及副溶血性弧菌等不同的致病菌。針對(duì)國標(biāo)方法，本實(shí)驗(yàn)采用的生化試劑盒只能鑒別一種致病菌，從微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室耗材配備角度來看，API 20E可以降低試驗(yàn)成本，優(yōu)化檢測(cè)程序。

API 20E生化反應(yīng)達(dá)21種，能有效保證該方法鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅集約化了生化試驗(yàn)，也使后續(xù)的血清學(xué)反應(yīng)操作更為簡(jiǎn)便。并且，API 20E僅需試劑條及API LAB軟件，不需要配置其他生化試劑，能滿足基層實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)需求。

參考文獻(xiàn)：

[1] 韓晗，韋曉婷，等.沙門氏菌對(duì)食品的污染及其導(dǎo)致的食源性疾病[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué).2016，44（5）：15-20.

[2] 《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)-沙門氏菌檢驗(yàn)》（GB/T 4789.4-2016）.

[3] 莊華君，金映川，楊旭.API20E、VITEK-32在臨床細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生工程學(xué).2011.8（14）：320-322.