王 琨,張 濤,許亞改,武治云
(1.石家莊市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河北石家莊 050030;2.石家莊市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊(duì),河北石家莊 050030)
豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒(PVC)引起的豬的一種多系統(tǒng)功能障礙性疾病。該病對(duì)豬的感染率較高,傳播廣泛,常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬細(xì)小病毒等混合感染,嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展。我們于2019年對(duì)我省豬圓環(huán)病毒病及其相關(guān)疾病混合感染情況進(jìn)行了抽樣調(diào)查,調(diào)查情況如下:
2.1 樣品采集
2019年,采集河北省石家莊等9個(gè)地市的11個(gè)屠宰場(chǎng)、7個(gè)無(wú)害化處理場(chǎng)、16個(gè)門診部和10個(gè)規(guī)?;i場(chǎng)169頭豬組織樣品。組織樣品包括扁桃體、淋巴結(jié)、肺臟、腎臟、小腸等。
2.2 樣品處理
每份樣品中將不同組織按1∶1的體積比例剪取后放入2ml離心管中,加入適量生理鹽水,在高通量組織研磨儀中研磨后-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
2.3 儀器與耗材
移液器(德國(guó)Eppendorf);實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀(西安天隆科技有限公司);全自動(dòng)核酸提取儀(西安天隆科技有限公司);高通量組織研磨儀(德國(guó) QIGEN);無(wú)酶Tip頭及PCR管(美國(guó)Axygen)
2.4 試劑
豬圓環(huán)病毒2型實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Nsp2 1594~680變異株)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬細(xì)小病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒、豬流行性腹瀉病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒(北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司);圓環(huán)病毒3型實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒(北京和創(chuàng)牧原科技發(fā)展有限公司)。
2.5 檢測(cè)方法
具體操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
3.1 圓環(huán)病毒整體感染情況
經(jīng)過(guò)對(duì)169份組織樣品進(jìn)行病毒核酸檢測(cè),顯示豬圓環(huán)病毒2型和圓環(huán)病毒3型感檢出陽(yáng)性率為79.88%和11.24%。具體如表1所示。
表1 總體疾病感染情況
3.2 混合感染情況
通過(guò)病原學(xué)檢測(cè),圓環(huán)病毒2型單一病原感染有56份樣品。多病原混合感染有79份,以圓環(huán)病毒2型、細(xì)小病毒、圓環(huán)病毒3型和豬流行性腹瀉的雙重和三重感染為主。見(jiàn)表2和圖1。
表2 與圓環(huán)病毒2型混合感染情況
圖1 與圓環(huán)病毒2型混合感染情況圖
4.1 我省豬群中豬圓環(huán)病毒2型病毒普遍存在,檢出率為79.88%。
4.2 在感染圓環(huán)病毒2型的豬群中,有58.52%的為混合感染,其中與細(xì)小病毒病的雙重感染情況較為普遍,與圓環(huán)病毒3型、豬流行性腹瀉、豬高致病性藍(lán)耳病的多重感染也存在。
4.3 近些年發(fā)現(xiàn)的圓環(huán)病毒3型在豬群中的檢出率也較高,且與圓環(huán)病毒2型混合感染時(shí)臨床癥狀難以區(qū)分,需要進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè),因此圓環(huán)病毒3型也不容忽視。