劉玲佩 李小兵 陳躍華 賴盼建

[摘要] 目的 探討微生態(tài)制劑對(duì)過(guò)敏性紫癜患兒腸道菌群狀態(tài)的影響。 方法 選取2017年6月至2019年6月我院收治的80例過(guò)敏性紫癜患兒，隨機(jī)數(shù)表法分為兩組，對(duì)照組40例利用常規(guī)藥物治療，試驗(yàn)組40例在此基礎(chǔ)上加用微生態(tài)制劑治療。比較兩組的臨床療效，治療前后免疫學(xué)及尿蛋白指標(biāo)水平、腸道菌群水平和治療6個(gè)月內(nèi)的復(fù)發(fā)情況。 結(jié)果 治療結(jié)束后，試驗(yàn)組治療有效率（95.00%）高于對(duì)照組（77.50%）（P<0.05）;兩組治療后血清球蛋白A（IgA）、補(bǔ)體C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）水平均低于治療前;治療后，試驗(yàn)組血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于對(duì)照組（P<0.05）;兩組治療后大腸桿菌水平低于治療前，雙歧桿菌和B/E值高于治療前;治療后，試驗(yàn)組的大腸桿菌水平均低于對(duì)照組，雙歧桿菌和B/E值高于對(duì)照組（P<0.05）;對(duì)兩組患兒隨訪6個(gè)月，試驗(yàn)組復(fù)發(fā)率為10.00%，低于對(duì)照組的27.50%（P<0.05）。 結(jié)論 口服酪酸梭菌活菌散可提高過(guò)敏性紫癜患兒臨床療效，改善腸道菌群失調(diào)狀態(tài)，減少?gòu)?fù)發(fā)率，安全性較高。

[關(guān)鍵詞] 過(guò)敏性紫癜;微生態(tài)制劑;腸道菌群;兒童

[中圖分類號(hào)] R554.6? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2021）13-0005-04

Observation of the effect of microecological preparation on the intestinal flora of children with allergic purpura

LIU Lingpei1? ?LI Xiaobing2? ?CHEN Yuehua1? ?LAI Panjian2

1.Department of General Medicine， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua? ?321000， China; 2.Department of Padiatrics， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua? ?321000， China

[Abstract] Objective To explore the effect of microecological preparation on the state of intestinal flora in children with allergic purpura. Methods Eighty patients with allergic purpura admitted to the hospital from June 2017 to June 2019 were selected. The patients were divided into 2 groups by random number table method. The control group （40 cases） was treated with conventional drugs， and the experimental group（40 cases） was added with microecological preparation based on the above treatment. The clinical efficacy， immunological and urinary protein index levels before and after treatment， intestinal flora levels， and relapse within 6 months of treatment were compared between the two groups. Results After treatment， the effective rate of treatment in the experimental group was 95.00%， higher than that（77.50%） in the control group （P<0.05）. The serum globulin A （IgA）， complement C3， urinary albumin （Alb） and β2-microsphere protein（β2-MG） after treatment in both groups were lower than those before treatment. After treatment， the levels of serum IgA， C3 and urine Alb and β2-MG in the experimental group were lower than those in the control group（P<0.05）. After treatment， the E. coli level in two groups was lower than that before treatment， and the Bifidobacterium and B/E values were higher than those before treatment. After treatment， the E. coli level in the experimental group was lower than that in the control group， and the Bifidobacterium and B/E values in the experimental group were higher than those of the control group（P<0.05）. The two groups of children were followed up for 6 months. The recurrence rate of the experimental group was 10.00%， lower than that 27.50% of the control group（P<0.05）. Conclusion The oral administration of Clostridium butyricum live bacteria powder can improve the clinical efficacy of children with allergic purpura， improve the state of intestinal flora imbalance， reduce the recurrence rate， and has higher safety.

[Key words] Allergic purpura; Microecological preparation; Intestinal flora; Children

過(guò)敏性紫癜是3～10歲兒童高發(fā)的過(guò)敏性疾病之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，亞洲<5歲患兒約占總患病兒童的50%[1]。過(guò)敏性紫癜根據(jù)侵犯部位的不同，分為單純型、腎型、關(guān)節(jié)型、腹型、混合型五種，臨床癥狀各不相同[2-4]。過(guò)敏性紫癜患兒治療周期長(zhǎng)且病情反復(fù)，同時(shí)并發(fā)癥多，給患兒及其家長(zhǎng)帶來(lái)極大的痛苦[5]。既往研究揭示了腸道菌群與過(guò)敏性疾病之間存在密切關(guān)系，兩者可能互為因果，相互影響，一般來(lái)說(shuō)腸道微生態(tài)穩(wěn)定的過(guò)敏性疾病患兒，臨床癥狀會(huì)出現(xiàn)一定程度的緩解，因此腸道微生態(tài)的相關(guān)與過(guò)敏性疾病的防治研究息息相關(guān)，臨床對(duì)于微生態(tài)制劑在過(guò)敏性疾病中的應(yīng)用越發(fā)重視[6-7]。本研究討論了微生態(tài)制劑對(duì)過(guò)敏性紫癜患兒腸道菌群狀態(tài)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年6月至2019年6月我院收治的80例過(guò)敏性紫癜患兒，隨機(jī)數(shù)表法分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組各40例。兩組患兒的性別、年齡、發(fā)病病程、臨床癥狀比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》中過(guò)敏性紫癜的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9];②年齡3～14歲;③腎功能正常;④研究方案報(bào)送醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，每例患者均征求家長(zhǎng)知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腎病綜合征者;②合并心、腦血管、肝、腎、消化道及造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病;③已使用微生態(tài)制劑、抗生素的治療;④合并原發(fā)性免疫缺陷疾病及精神病者;⑤中途退出治療者。

1.3 治療方法

對(duì)照組：采用常規(guī)方式治療，囑咐患兒臥床休息，避免劇烈運(yùn)動(dòng)，嚴(yán)格控制患兒飲食，同時(shí)給予相應(yīng)的抗血小板聚集、抗過(guò)敏及補(bǔ)液等常規(guī)治療，合并感染的患兒給予敏感抗生素使用，伴有嚴(yán)重關(guān)節(jié)腫痛和胃腸道出血的患兒給予靜脈滴注甲基強(qiáng)的松龍（天津藥業(yè)焦作有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20040845）10～80 mg/次，1次/d，治療3 d后改為醋酸潑尼松（天津力生制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H12020123）口服20 mg/次，2次/d，癥狀減輕后逐漸減量，連續(xù)治療2周。試驗(yàn)組：在同對(duì)照組的常規(guī)治療基礎(chǔ)上，加用口服酪酸梭菌活菌散（日本米雅利桑制藥株式會(huì)社，國(guó)藥準(zhǔn)字S2012 0077），1.0 g/次，2次/d，早晚口服，連續(xù)治療2周。

1.4 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

①兩組臨床療效[8]。治療結(jié)束后，對(duì)兩組患兒治療效果進(jìn)行評(píng)估，治愈：腹部或關(guān)節(jié)疼痛消失，皮損消失、幾乎不見(jiàn)色素沉著，無(wú)新皮損出現(xiàn)。顯效：腹部或關(guān)節(jié)疼痛明顯減輕，70%以上的皮損消失，無(wú)或有少量新皮損出現(xiàn)。有效：腹部或關(guān)節(jié)疼痛有一定減輕，30%以上皮損消失，出現(xiàn)新皮損。無(wú)效腹部或關(guān)節(jié)疼痛無(wú)減輕甚至加重，皮損反復(fù)出現(xiàn)。治療有效率=（治愈+有效+顯效）/總例數(shù)×100%;②兩組治療前后免疫學(xué)指標(biāo)比較。血清球蛋白A（IgA）、補(bǔ)體C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）。治療前后抽取空腹患兒靜脈血5 mL，3000 r/min離心15 min，取上層清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)IgA、C3水平，采取上海晶抗生物工程有限公司生產(chǎn)試劑盒;收集患兒尿液樣品，檢測(cè)其中Alb、β2-MG水平;③兩組治療前后腸道菌群水平比較。治療前后，收集兩組患兒糞便樣品，采用16SrDNA熒光定量PCR技術(shù)測(cè)定糞便樣品中大腸桿菌、雙歧桿菌水平，計(jì)算兩者比值B/E，雙歧桿菌引物：上游 5-GAT TCT GGC TCA GGA TGA ACGC -3，下游5-CTG ATA GGA CGC GAC CCA T-3，擴(kuò)增片段為230 bp;大腸桿菌引物：上游5-CAT GCC GCG TGT ATG AAG AA-3;下游5-CGG GTA ACG TCA ATG AGC AAA-3，擴(kuò)增片段為95 bp;熒光染料由東洋坊上海生物科技有限公司提供;④兩組復(fù)發(fā)情況比較。采用門診和電話的方式對(duì)患兒隨訪6個(gè)月，每個(gè)統(tǒng)計(jì)周期均為1個(gè)月，患兒出院后 3 個(gè)月內(nèi)再次出現(xiàn)過(guò)敏性紫癜的特征性皮疹，或伴隨相關(guān)消化道、關(guān)節(jié)、腎臟癥狀等，視為復(fù)發(fā)，1個(gè)統(tǒng)計(jì)周期內(nèi)多次復(fù)發(fā)視為1例。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較

治療結(jié)束后，試驗(yàn)組治療有效率為95.00%，高于對(duì)照組的77.50%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.2 兩組治療前后免疫學(xué)及尿蛋白指標(biāo)比較

兩組治療后血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于治療前（P<0.05）;治療后，試驗(yàn)組血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.3 兩組治療前后腸道菌群水平比較

兩組治療后大腸桿菌水平低于治療前，雙歧桿菌和B/E值高于治療前（P<0.05）;治療后，試驗(yàn)組的大腸桿菌水平均低于對(duì)照組，雙歧桿菌和B/E值高于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表4。

2.4 兩組復(fù)發(fā)情況比較

對(duì)兩組患兒隨訪6個(gè)月，試驗(yàn)組復(fù)發(fā)率為10.00%，低于對(duì)照組的27.50%（P<0.05）。見(jiàn)表5。

表5? ?兩組復(fù)發(fā)情況比較

3 討論

過(guò)敏性紫癜的病因暫未明確，對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究集中于免疫學(xué)、凝血機(jī)制和遺傳因素三個(gè)方面，近年來(lái)由于免疫技術(shù)的發(fā)展，證實(shí)了腸道菌群與免疫之間存在密切聯(lián)系，即腸道細(xì)菌能通過(guò)黏膜屏障與免疫細(xì)胞接觸[10]。過(guò)敏性疾病患者由于腸黏膜屏障功能受損誘發(fā)胃腸道反應(yīng)，腸道菌群失調(diào)會(huì)影響其發(fā)病和轉(zhuǎn)歸，如過(guò)敏性紫癜患兒的乳酸桿菌、雙歧桿菌含量明顯低于健康兒童，伴有消化道癥狀的過(guò)敏性紫癜患兒陽(yáng)性率更高[11]。陳鵬德等[12]通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)過(guò)敏性紫癜患兒腸道糞便和黏膜菌群結(jié)構(gòu)及多樣性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)過(guò)敏性紫癜患兒糞便菌群病原菌增多而有益菌較少，且糞便菌群和結(jié)腸黏膜菌群結(jié)構(gòu)和多樣性存在差異。因此，本研究中加用微生態(tài)制劑治療過(guò)敏性紫癜患兒，研究其對(duì)腸道菌群的影響。

本研究中，試驗(yàn)組治療有效率高達(dá)95.00%，高于對(duì)照組，說(shuō)明與常規(guī)治療相比，聯(lián)用酪酸梭菌活菌散治療過(guò)敏性紫癜患兒可提高治療有效率，推測(cè)是酪酸梭菌活菌散可以定植于腸道黏膜并進(jìn)行繁殖，直接提升腸道雙歧桿菌數(shù)量，抵抗致病菌的入侵，加快腸道內(nèi)益生菌的繁殖，改善腸道微環(huán)境，恢復(fù)腸道微生態(tài)的平衡，讓整體的治療效果得到提升。同時(shí)，經(jīng)16SrDNA熒光定量PCR技術(shù)測(cè)定，治療后試驗(yàn)組患兒糞便中的大腸桿菌水平均低于對(duì)照組，雙歧桿菌和B/E值高于對(duì)照組，證明了酪酸梭菌活菌散對(duì)增加腸道雙歧桿菌數(shù)量、改善腸道微環(huán)境的作用。與張靜等[13]研究結(jié)果相似。

在許多感染疾病中均有l(wèi)gA和補(bǔ)體C3的參與，兩者形成的抗原抗體復(fù)合物會(huì)增加毛細(xì)血管的通透性，由此激活免疫系統(tǒng)，以致大量炎性因子和過(guò)敏介質(zhì)釋放，從而產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)并累及皮膚、腎臟、關(guān)節(jié)和消化道等器官，甚至內(nèi)臟出血[14-19]。劉娜娜等[20]研究提示過(guò)敏性紫癜患兒的總IgE、IgA和補(bǔ)體C3對(duì)疾病的預(yù)后具有預(yù)測(cè)價(jià)值。除此之外，尿液中的Alb、β2-MG指標(biāo)可以直觀的反映腎小球基底膜通透性的變化以及腎小管功能的異常，因此對(duì)用藥時(shí)間具有一定的指導(dǎo)性[21]。本研究中，治療后試驗(yàn)組血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于對(duì)照組（P<0.05），提示加用酪酸梭菌活菌散治療可以改善過(guò)敏性紫癜患兒血清免疫學(xué)及尿蛋白指標(biāo)。推測(cè)與酪酸梭菌活菌散加快腸道內(nèi)益生菌的繁殖，改善腸道微環(huán)境，恢復(fù)腸道微生態(tài)的平衡作用有關(guān)。對(duì)兩組患兒隨訪6個(gè)月，試驗(yàn)組復(fù)發(fā)率為10.00%，低于對(duì)照組的27.50%，提示聯(lián)合酪酸梭菌活菌散治療對(duì)改善過(guò)敏性紫癜患兒的預(yù)后有一定療效，推測(cè)酪酸梭菌活菌散與其減輕腸黏膜損傷，保護(hù)腸黏膜屏障功能的作用有關(guān)。不過(guò)，本研究納入樣本較少，隨訪時(shí)間較短，不能完全掌握不同程度過(guò)敏性紫癜患兒的生存預(yù)后情況，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本和隨訪時(shí)間。

綜上所述，酪酸梭菌活菌散可改善過(guò)敏性紫癜患兒腸道菌群失調(diào)狀態(tài)，降低血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平，減少?gòu)?fù)發(fā)率，治療有效率顯著提高。

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（收稿日期：2020-11-12）