王可心，李光淳，李靜

（1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春 130000；2.吉林省人民醫(yī)院，吉林 長春 130000）

0 引言

在相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，給予大鼠手術(shù)后容易出現(xiàn)并發(fā)癥，其中認(rèn)知功能障礙是一種常見術(shù)后反應(yīng)癥狀，大鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)會受到影響，形成在接受指令上的不協(xié)調(diào)，容易出現(xiàn)記憶力下降，會表現(xiàn)出精神錯亂，反應(yīng)焦慮等現(xiàn)象[1]。本次實驗選取的麻醉藥物為異氟醚，該藥物屬于臨床常用麻醉型藥物，使用方式是通過吸入麻醉，是吸入麻醉藥物中品質(zhì)較為良好的藥物。通過對大鼠手術(shù)中使用的麻醉藥物進(jìn)行分析，將異氟醚吸人麻醉用在大鼠手術(shù)中，分析手術(shù)后大鼠的認(rèn)知功能影響以及產(chǎn)生的炎癥因子影響情況。

1 資料和方法

1.1 一般資料

清潔級Wista 大鼠模型共計60 只，18～20 周齡，隨機(jī)分為對照組和實驗組，組數(shù)一樣，對照組采用常規(guī)麻醉藥物，實驗組將異氟醚麻醉以吸入的方式應(yīng)用。在大鼠模型室中其濕度控制為60%-70%，室溫控制在（22±1.5）℃，夜間與白天的交替照明時間控制在12 小時:12 小時。

1.2 試劑

在選用實驗的試劑中，美國Baxter 公司的異氟醚麻醉試劑；選取來自美國Sigma 公司的Amil試劑；美國R＆D 公司的神經(jīng)營養(yǎng)因子（NT）-3試劑；選擇自碧云天生物科技公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑，用于檢測白細(xì)胞介素（IL）-6、腫瘤壞死因子（TNF）-α、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）等；上海遠(yuǎn)慕生物科技公司的elisa 試劑盒，遠(yuǎn)慕供應(yīng)兔子白介素1β（IL-1β）ELISA 檢測試劑盒。

1.3 方法

將60 只大鼠以分組方式進(jìn)行藥物吸入，對照組中使用七氟醚組給予2%七氟醚吸入，將大鼠放置在麻醉箱中、以2%的七氟醚維持，載氣為95%氧氣和5%二氧化碳的混合氣體，持續(xù)120min，連續(xù)干預(yù)5d。

實驗組的大鼠通過選用異氟醚麻醉吸入，1.8%異氟醚3 次，2h/次。麻醉的過程需要選用呼吸機(jī)與麻醉箱相連，將螺紋管連通使其麻醉藥物通過吸管進(jìn)入到麻醉箱內(nèi)，再到大鼠體內(nèi),麻醉箱內(nèi)的氣壓要保持適度,調(diào)節(jié)好麻醉機(jī)的輸出劑量，調(diào)配好麻醉濃度，定期維持好麻醉時間，在麻醉吸入中要調(diào)節(jié)好吸入的氧氣，應(yīng)控制在40%的濃度，確保與空氣的混合相容，待大鼠清醒后觀察一周，觀察大鼠認(rèn)知功能與炎癥因子影響數(shù)據(jù)。

1.4 觀察指標(biāo)

數(shù)據(jù)分析中通過Morris 系統(tǒng)實驗進(jìn)行檢測，以直徑1.2m、高0.5m 的圓桶作為水迷宮，將其劃分為4 個象限，加水后按0.5%～1.5%比例加入奶粉，使水池內(nèi)水變?yōu)椴煌该魅榘咨?，在? 象限內(nèi)距池壁邊緣30cm 處固定1 個直徑10cm 的圓柱型平臺，平臺約在水面下1.5cm 處，并控制水溫于22℃～25℃，監(jiān)測并記錄大鼠運(yùn)動情況。對大鼠的干預(yù)前后的逃避潛伏期進(jìn)行定位航行訓(xùn)練,訓(xùn)練時間保持每天1 次,觀察大鼠的空間數(shù)據(jù)，記錄大鼠在60min 內(nèi)的穿越平臺次數(shù)，對其干預(yù)后的第1、4、7 天的評分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計；觀察大鼠在麻醉后的空間記憶能力和對外界事物的認(rèn)知功能影響。

麻醉三周后檢測大鼠的血漿，統(tǒng)計氣血和血糖指標(biāo)的改善，采用高效液相色譜與紫外檢測法進(jìn)行檢測，主要檢測值包含PH 值、PaO2、PaCO2、血糖為主。

觀察大鼠的炎癥因子情況，內(nèi)容有TNF-α、IL-6、IL-Iβ、BDNF、NT-3、Ach，操作中需要選用試劑進(jìn)行堿性羥胺比色法檢測。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

本次使用的系統(tǒng)檢測分析是選取SPSS 23.0軟件，符合正態(tài)的分布，對大鼠的認(rèn)知功能、炎癥因子影響程度等計量的資料選擇均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（）進(jìn)行表示，而相較組間選擇獨(dú)立的樣本，χ2檢驗用于比較計數(shù)的資料，結(jié)果P ＜0.05 就說明具有區(qū)別，研究有意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠認(rèn)知功能

干預(yù)第一天，對照組大鼠逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)與實驗組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P ＜0.05；干預(yù)后第4 天、7 天，兩組逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P ＞0.05，見表1。

表1 大鼠的認(rèn)知功能評分情況（）

表1 大鼠的認(rèn)知功能評分情況（）

2.2 大鼠的血?dú)夂脱侵笜?biāo)

兩組大鼠pH 值比較差異不明顯，P ＞0.05，實驗組大鼠PaO2、PaCO2以及血糖水平明顯比對照組低，組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義，P ＜0.05，見表2。

表2 大鼠血?dú)夂脱侵笜?biāo)情況對比（）

表2 大鼠血?dú)夂脱侵笜?biāo)情況對比（）

2.3 大鼠炎癥因子水平影響情況

對照組麻醉后的炎性因子水平明顯比實驗組高，P ＜0.05，見表3。

表3 大鼠的炎癥因子水平評分情況（）

表3 大鼠的炎癥因子水平評分情況（）

3 討論

根據(jù)醫(yī)學(xué)對動物的研究數(shù)據(jù)表示，在臨床上使用異氟醚麻醉藥物后，動物的認(rèn)知功能以及神經(jīng)系統(tǒng)會受到損傷，在短時間內(nèi)常會表現(xiàn)出記憶能力下降，在通過海馬檢測指標(biāo)分析中，動物的血糖水平會產(chǎn)生變化，影響到組織的機(jī)能運(yùn)行，進(jìn)而造成炎癥因子發(fā)生[2]。在有關(guān)動物研究中，大鼠的認(rèn)知功能是受到異氟醚的氧化應(yīng)激反應(yīng)刺激，進(jìn)而造成大鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)反應(yīng)不正常問題，在刺激中因麻醉的對手術(shù)的不到位，對后期的傷口處理不謹(jǐn)慎，造成大鼠的體內(nèi)的鈣離子失調(diào)，從而使得大鼠出現(xiàn)炎癥反應(yīng)[3]。在臨床上有關(guān)手術(shù)后產(chǎn)生的認(rèn)知功能障礙問題，其病發(fā)機(jī)制因素多種多樣，與不同系統(tǒng)都有相關(guān)性，但是直到現(xiàn)在醫(yī)學(xué)研究中都沒有明確的有關(guān)具體發(fā)病機(jī)制的相關(guān)因素闡述[4]。

總之，對于臨床大鼠實驗中將異氟醚吸入麻醉應(yīng)用在大鼠手術(shù)中，可以觀察到大鼠的認(rèn)知功能和炎癥因子出現(xiàn)問題，但影響的程度不大，后期存在一定的神經(jīng)組織系統(tǒng)保護(hù)作用，從整體上考慮異氟醚麻醉藥物的使用價值可觀。