孫永康，趙志堅，趙秀芬，馬 波，唐才喜

肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是全球發(fā)病率和病死率均較高的惡性腫瘤，已成為癌癥相關死亡的第二大原因[1]。近年HCC的診斷和治療取得較大進展，但晚期HCC患者預后仍較差。目前HCC的發(fā)病機制仍未完全闡明，深入分析HCC的發(fā)生、發(fā)展機制，將有助于發(fā)現(xiàn)新的HCC診斷標志物和治療靶點。肺腺癌轉移相關轉錄子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1, MALAT1)是最早發(fā)現(xiàn)在癌癥中起作用的LncRNA，定位于染色體11q13上[2]。近年研究表明，MALAT1在HCC中表達增高，參與HCC的發(fā)生、發(fā)展并調控其多種生物學過程，可作為HCC的診斷和預后標志物[3-4]。在MALAT1參與HCC進展的多種調節(jié)機制中，MALAT1發(fā)揮競爭性內源RNA(competing endogenous RNA, ceRNA)作用，充當miRNA分子海綿調節(jié)下游靶基因或信號通路的機制在HCC發(fā)生、發(fā)展中起關鍵作用[3,5]。因此，理解MALAT1作為ceRNA促進HCC發(fā)生、發(fā)展的機制可能為HCC的診斷和治療提供新線索。

1 MALAT1簡述

長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA, LncRNA)是一類長度大于200個核苷酸的非編碼RNA，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起關鍵作用[6]。MALAT1作為LncRNA家族成員之一，由Ji等于2003年研究早期非小細胞肺癌時被發(fā)現(xiàn)，是最早被確定在腫瘤中起作用的LncRNA，其在哺乳動物中高度保守，長度約8.5 kb，定位于染色體11q13上。近年研究表明[3,5]，MALAT1在HCC中呈高表達，參與HCC發(fā)生、發(fā)展中的多種調控通路及生物學過程；其中，MALAT1參與ceRNA調控網絡，調節(jié)miRNA下游靶基因或信號通路的機制成為HCC的主要特征[7]。越來越多的證據(jù)表明[3-4]，MALAT1有望成為HCC的分子診斷及預后標志物和潛在治療靶點。

2 MALAT1作為ceRNA在HCC中的作用

近年ceRNA調控網絡備受學術界關注，研究表明致癌或抑癌的LncRNA可以作為ceRNA，海綿miRNA調節(jié)其靶基因[8]。其概念是指一種RNA能夠通過miRNA反應元件(miRNA response element, MRE)競爭性結合相同MRE的miRNA，從而減弱miRNA對另一種靶RNA的抑制作用，此亦稱為“海綿作用”[9]。當LncRNA高表達時，通過MRE橋梁與更多的miRNA結合，間接地調控靶RNA的表達水平，從而調控細胞功能。因此，相比傳統(tǒng)的miRNA-mRNA調控模式，LncRNA-miRNA-mRNA是一種新的基因表達調控模式[8]。越來越多的研究表明[7,10-12]，LncRNA MALAT1作為ceRNA表現(xiàn)出致癌特性，間接性減弱miRNA對下游靶基因或通路的抑制，從而通過干細胞更新、血管生成、增殖、侵襲、轉移、凋亡、自噬、上皮-間充質轉化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)以及化療耐藥等生物學功能促進HCC的進展。本文歸納并總結了MALAT介導的ceRNA調控網絡在HCC中的功能(表1)。

表1 肝細胞癌中MALAT1介導的ceRNA調控網絡

2.1 HCC干細胞HCC干細胞具有高增殖、自我更新、高致瘤性、耐化療等特點，其豐度同HCC惡性程度呈正相關。研究HCC干細胞的調控機制有助于理解HCC的發(fā)病機制和尋找新的治療策略。有證據(jù)表明，LncRNA MALAT1通過充當miRNA的ceRNA啟動HCC的發(fā)展，從而有助于維持癌癥干細胞的特性。He等[7]發(fā)現(xiàn)乙肝病毒X(HBx)蛋白通過依賴PI3K/Akt信號通路，能誘導HCC促進HCC干細胞的產生，其具體機制是MALAT1通過ceRNA作用，充當miR-124海綿激活PI3K/Akt信號通路，從而增強HBx蛋白誘導的腫瘤干細胞特性，最終促進HBV相關性HCC的發(fā)展。此外，有研究表明，LncRNA-MALAT1反向剪切而產生的circ-MALAT1可以作為miR-6887-3p的海綿增強JAK2的磷酸化水平，從而激活JAK2/STAT3信號通路并促進HCC干細胞的自我更新[13]。因此，MALAT1介導的ceRNA調控網絡可能成為HCC干細胞潛在的治療靶點。

2.2 HCC血管生成血管生成與HCC的生長、增殖、侵襲和轉移密切相關[14]。HCC血管生成的機制復雜，探討調控HCC血管生成的因素對提高抗血管生成治療水平具有重要意義。新的證據(jù)表明，MALAT1作為ceRNA與HCC血管生成密切相關。在HCC患者、異種小鼠模型和HCC細胞系的研究中發(fā)現(xiàn)，miR-3064-5p通過抑制FOXA1/CD24/Src通路發(fā)揮抗血管生成作用，然而MALAT1可通過海綿吸附miR-3064-5p發(fā)揮ceRNA作用，減輕對FOXA1通路的抑制作用，從而促成HCC血管生成[10]。此外，Hou等[14]發(fā)現(xiàn)miR-140是MALAT1的重要下游靶點，miR-140能靶向抑制VEGFA和M2巨噬細胞極化的表達，從而抑制血管生成、減弱免疫抑制特性，然而MALAT1可作為miR-140分子海綿，抑制miR-140的調控作用，促進HCC細胞的血管生成和免疫抑制。因此，MALAT1介導的ceRNA調控網絡可能是HCC抗血管生成治療的靶點。

2.3 HCC增殖、凋亡、自噬、侵襲、轉移和EMTMALAT1作為ceRNA調控miRNA下游的靶基因和信號通路，從而調節(jié)HCC細胞的增殖、凋亡、自噬、侵襲、轉移和EMT。近年的兩項研究發(fā)現(xiàn)，MALAT1介導的ceRNA調控網絡通過調控miRNA下游信號通路發(fā)揮其生物學功能。Peng等[12]發(fā)現(xiàn)MALAT1可通過海綿吸附miR-146a來調控HCC細胞的增殖、凋亡和自噬，而miR-146a下調能靶向上調PI3K，繼而影響下游Akt和mTOR的磷酸化，從而通過靶向PI3K/Akt/mTOR信號軸抑制HCC細胞的凋亡和自噬；Liu等[15]研究結果表明，MALAT1充當分子海綿吸收miR-195，使miR-195不能抑制下游靶點EGFR，EGFR過表達激活PI3K/Akt和JAK/STAT通路，促進HCC細胞的生長活性。此外，眾多研究發(fā)現(xiàn)，MALAT1介導的ceRNA調控網絡可以通過調節(jié)miRNA的靶基因發(fā)揮生物學功能。Yu等[3]發(fā)現(xiàn)MALAT1作為miR-142-3p的ceRNA，減弱對靶基因SMAD5的抑制作用，從而抑制細胞凋亡、促進HCC細胞的增殖和侵襲；Chen等[16]研究發(fā)現(xiàn)MALAT1可通過海綿化miR-143-3p調節(jié)ZEB1的表達，促進HCC細胞的增殖和侵襲；Liu等[17]研究結果顯示，致瘤轉錄因子FOXM1是miR-125a-3p的靶點，miR-125a-3p可抑制其在HCC中的表達，進一步發(fā)現(xiàn)MALAT1可作為miR-125a-3p的分子海綿，正向調控FOXM1表達，促進HCC的侵襲和轉移；Cui等[18]在體外HCC細胞試驗中發(fā)現(xiàn)，miR-124-3p上調能抑制下游靶點Slug的mRNA和蛋白的表達，從而抑制HCC的侵襲和轉移，而MALAT1作為內源性海綿抑制miR-124-3p與其靶基因Slug的結合，從而增加Slug的表達，促進HCC的侵襲和轉移；Li等[11]研究結果表明miR-146b-5p通過靶向TRAF6介導的Akt磷酸化抑制HCC的生長和轉移，MALAT1作為miR-146b-5p的分子海綿下調其在HCC中的表達，從而促進HCC的生長和轉移；Hou等[19]研究發(fā)現(xiàn)MALAT1通過競爭性結合miR-204，減少其對SIRT1的抑制作用，促進SIRT1對HCC的侵襲和轉移過程。少數(shù)研究發(fā)現(xiàn)，EMT、缺氧機制以及調控下游蛋白能促進HCC發(fā)生、發(fā)展。SNAI1作為EMT中的關鍵轉錄因子，也是miR-22的直接靶點，MALAT1能海綿吸附miR-22，并能促進EZH2在miR-22啟動子區(qū)域富集而抑制miR-22的轉錄，正向調節(jié)SNAI1的表達，從而促成HCC細胞通過EMT獲得間充質特性發(fā)生侵襲和遠處轉移[20]；Pan等[21]研究結果表明，MALAT1可以作為ceRNA競爭性結合miR-30a-5p，從而調節(jié)下游vimentin的表達，促進HCC的侵襲和轉移；Zhao等[1]證實miR-200a能抑制HCC細胞增殖，但在缺氧條件下的體外HCC細胞中發(fā)現(xiàn)，MALAT1通過“海綿”作用負向調控miR-200a表達促進HCC細胞增殖，但參與其調控的潛在分子機制待進一步研究。因此，結合上述研究結果，MALAT1介導的ceRNA調控網絡有望成為HCC的潛在治療靶點，但靶向治療在HCC臨床應用中的適用性和表觀遺傳學調節(jié)仍需進行更多的研究。

2.4 HCC耐藥放化療能延長HCC患者生存時間，但遠期療效不佳，臨床若出現(xiàn)耐藥，腫瘤更易發(fā)生復發(fā)和轉移。近年有實驗證明，MALAT1作為ceRNA在介導HCC耐藥中發(fā)揮著重要作用。Fan等[22]研究發(fā)現(xiàn)miR-140-5p/Aurora-A信號軸參與了索拉非尼耐藥，MALAT1通過競爭性結合miR-140-5p上調Aurora-A的表達，從而促進HCC細胞對索拉非尼的耐藥性；Yuan等[23]研究發(fā)現(xiàn)HCC細胞在缺氧狀態(tài)下，HIF-2α的上調能誘導MALAT1表達，MALAT1通過ceRNA作用下調miR-216b增強自噬，故通過HIF-2α-MALAT1-miR-216b軸調節(jié)自噬而產生多重耐藥。因此，MALAT1介導的ceRNA調控網絡可能為克服HCC耐藥提供新線索，但未來仍需進一步深入探究其耐藥機制，將有助于提高HCC治療水平。

3 結語

MALTA1介導的ceRNA調控網絡提供了一種新的調控模式，不僅在HCC的發(fā)生、發(fā)展中起關鍵作用，而且為HCC的診斷和治療提供參考。雖然近年MALAT1作為ceRNA調控HCC的報道越來越多，但是ceRNA調控網絡的詳細機制以及MALAT1和HCC關系的深入研究仍處于初步階段。因此，未來仍需要深入探究大量的分子機制，以探索HCC中特異性MALAT1介導的ceRNA軸，這將為識別新的HCC診斷和預后標志物以及為HCC患者治療提供有希望的靶點。