周光廷，張波克

(1.亳州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 亳州 236800； 2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，合肥 230000)

肺癌是臨床上常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，因早期常無(wú)特殊癥狀及體征，致使80%以上的患者就診時(shí)已發(fā)展為中晚期[1]，而中晚期肺癌患者的5年生存率不足10%[2]。因此，肺癌患者早期明確診斷并予以有效的干預(yù)措施對(duì)提高患者生命質(zhì)量及生存率具有重要意義。目前臨床診斷肺癌的方法主要有腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、CT、支氣管鏡下組織病理學(xué)及細(xì)胞學(xué)檢查等[3-4]，與CT、組織病理學(xué)檢查等方法相比，腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)因具有操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉等特點(diǎn)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值較高[5]，但傳統(tǒng)常采用的癌胚抗原、糖類抗原125等標(biāo)志物，特別是這些標(biāo)志物的單獨(dú)檢測(cè)在肺癌早期診斷中的靈敏度和特異度較低，無(wú)法滿足臨床需求[6]。隨著肺癌相關(guān)臨床基礎(chǔ)研究的不斷深入，部分學(xué)者提出細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment，CYFRA211)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)、胸苷激酶1(thymidine kinase 1，TK1)、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(squamous cell carcinoma-related antigen，SCC)與肺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[7-9]。鑒于此，本研究主要分析血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平在早期肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年8月至2020年8月亳州市人民醫(yī)院收治的75例早期肺癌患者作為肺癌組，選擇同期70例肺部良性病變患者作為肺良性病變組。肺癌組男41例、女34例，年齡29～78歲，平均(55±11)歲；癌癥分期：Ⅰ期44例、Ⅱ期31例；癌癥類型：腺癌33例、鱗癌29例、腺鱗癌13例；癌癥分化程度：低分化39例、中分化20例、高分化16例。肺良性病變組男39例、女31例，年齡31～76歲，平均(54±13)歲；疾病類型：肺炎23例、支氣管炎20例、慢性阻塞性肺疾病12例、肺炎性假瘤8例、肺結(jié)核3例、塵肺4例。兩組患者性別及年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)組織病理學(xué)檢查符合早期肺癌以及肺部良性病變的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；②早期肺癌患者確診后尚未進(jìn)行放化療等治療；③患者均未合并其他類型良惡性腫瘤；④患者均簽署了知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有嚴(yán)重心、肝、腎等器官功能障礙；②合并有嚴(yán)重局部或全身性感染；③肺癌患者肺部存在多個(gè)原發(fā)性病灶；④處于哺乳期或妊娠期的女性。本研究經(jīng)亳州市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3方法 抽取患者晨起空腹外周靜脈血5～10 mL，常溫放至血液自然凝結(jié)并持續(xù)20～25 min，繼而在4 ℃環(huán)境下使用Allegra 21R型高速離心機(jī)(美國(guó)Beckman公司生產(chǎn))離心(CYFRA211：離心半徑為10 cm，3 000 r/min離心15 min；NSE：離心半徑為10 cm，3 500 r/min離心15 min；TK1：離心半徑為10 cm，3 500 r/min離心10 min；SCC：離心半徑為15 cm，3 200 r/min離心30 min)，取上層血清，應(yīng)用CL-2000i型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn))，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)CYFRA211、NSE、SCC水平(CYFRA211、NSE檢測(cè)試劑盒購(gòu)自瑞士Roche公司，批號(hào)分別為17121647、17112450；SCC檢測(cè)試劑盒購(gòu)自深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，批號(hào)：17101546)，采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)TK1水平(TK1檢測(cè)試劑盒購(gòu)自深圳市安群生物工程有限公司，批號(hào)：17120876)。正常臨界值參考范圍：CYFRA211 0～3.30 μg/L、NSE 0～16.50 μg/L、TK1 0～2 pmol/L、SCC 0～2.70 μg/L。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較 肺癌組患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平均明顯高于肺良性病變組(P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較

2.2不同病理類型肺癌患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較 不同病理類型肺癌患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同病理類型肺癌患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較

2.3血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平在早期肺癌診斷中的ROC曲線分析 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清CYFRA211臨界值為3.87 μg/L的靈敏度和特異度分別為70.12%、72.51%，NSE臨界值為17.35 μg/L的靈敏度和特異度分別為66.23%、74.82%，TK1臨界值為3.14 pmol/L的靈敏度和特異度分別為81.34%、85.47%，SCC臨界值為1.72 μg/L的靈敏度和特異度分別為62.55%、73.62%，四者聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為93.94%、特異度為91.83%，見(jiàn)表3、圖1。

表3 血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平在早期肺癌診斷中的ROC曲線分析

CYFRA211：細(xì)胞角蛋白19片段；NSE：神經(jīng)元特異性烯醇化酶；TK1：胸苷激酶1；SCC：鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原；ROC：受試者工作特征曲線

3 討 論

肺癌是臨床較為常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，且隨著人們飲食習(xí)慣、生態(tài)環(huán)境的不斷改變，其發(fā)病率也呈逐年上升和年輕化趨勢(shì)。然而，因肺癌早期臨床表現(xiàn)不典型，極易被忽視而導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)時(shí)已有50%的患者失去手術(shù)切除的最佳時(shí)機(jī)[11]。流行病學(xué)研究資料顯示，我國(guó)肺癌整體存活率不足20%，肺癌所致死亡占所有惡性腫瘤的22.9%，其造成的死亡率已連續(xù)多年超過(guò)前列腺癌、乳腺癌及結(jié)直腸癌病死亡率之和[12]。目前，外科手術(shù)仍是肺癌的主要治療手段，但確診時(shí)間越晚，患者的預(yù)后越差，故能否在肺癌早期給予患者進(jìn)行診斷，對(duì)提高患者預(yù)后具有重要意義。腫瘤標(biāo)志物是在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中產(chǎn)生并釋放的活性物質(zhì)，可提示腫瘤的發(fā)生及生長(zhǎng)狀態(tài)，能夠?qū)δ[瘤進(jìn)行輔助診斷，且其操作簡(jiǎn)便，易于臨床廣泛推廣。隨著生物信息學(xué)相關(guān)理念、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)以及高通量新型技術(shù)的不斷發(fā)展，大量新型腫瘤標(biāo)志物不斷涌現(xiàn)。近年來(lái)，隨著肺癌相關(guān)研究的不斷深入，部分研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)CYFRA211、NSE、TK1及SCC與肺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[13-14]。

CYFRA211為細(xì)胞角蛋白家族中的重要成員之一，由CK19型角蛋白的可溶性片段組成，是一種可溶性酸性多肽，主要存在于單層及復(fù)層的上皮腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中，腫瘤細(xì)胞溶解及死亡時(shí)，大量的蛋白酶被激活，繼而導(dǎo)致CK19型角蛋白被大量降解而釋放CYFRA211進(jìn)入血液循環(huán)，故血清CYFRA211水平能夠有效提示腫瘤的發(fā)生發(fā)展?fàn)顟B(tài)[15]。NSE是神經(jīng)來(lái)源細(xì)胞與神經(jīng)元所特有的酸性蛋白酶，可參與體內(nèi)糖原的酵解，隨著神經(jīng)源性惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，其表達(dá)水平不斷升高，并與惡性腫瘤病變程度顯著相關(guān)[16]。由于肺癌是起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的惡性腫瘤[17]，檢測(cè)血清NSE水平對(duì)早期診斷肺癌具有重要意義。SCC是鱗狀上皮細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白抗原，為腫瘤相關(guān)抗原TA-4的一種亞型，主要表達(dá)于鱗狀上皮細(xì)胞癌的細(xì)胞質(zhì)，在多種鱗癌的判斷中具有重要意義[18]。TK1為胸腺嘧啶核苷激酶同工酶中的一種類型，存在于胞質(zhì)內(nèi)，是DNA合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶之一，正常情況下，TK1在細(xì)胞分裂前降解，進(jìn)入血液中的含量較低，而惡性腫瘤患者由于腫瘤細(xì)胞增殖較為活躍，DNA合成旺盛，致使大量TK1在未能及時(shí)降解前就被釋放進(jìn)入血液循環(huán)，明顯增加了其在血液中的含量[19]。多項(xiàng)研究表明，TK1水平與乳腺癌、結(jié)直腸癌、慢性淋巴細(xì)胞白血病等惡性腫瘤密切相關(guān)，且在腫瘤發(fā)生早期即出現(xiàn)明顯增高[20-22]。

本研究結(jié)果顯示，肺癌組患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平均明顯高于肺良性病變組(P<0.01)，對(duì)早期肺癌診斷具有重要意義。吳偉晴等[23]的研究顯示，肺癌組患者血清TK1、癌胚抗原、CYFRA21-1、NSE、SCC水平明顯高于良性對(duì)照組(P<0.05)，本研究結(jié)果與上述研究一致。多項(xiàng)研究顯示，不同病理類型肺癌患者的CYFRA211、NSE及SCC水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[24-25]。本研究中不同病理類型肺癌患者血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，分析其原因可能與本研究樣本量較小有關(guān)，有待進(jìn)一步深入研究驗(yàn)證。另外，本研究進(jìn)一步分析血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC水平對(duì)早期肺癌的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示，血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為93.94%、特異度為91.83%，明顯高于各項(xiàng)指標(biāo)的單獨(dú)檢測(cè)，在早期肺癌診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，與吳偉晴等[23]研究顯示的TK1與癌胚抗原、CYFRA21-1、NSE、SCC聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌具有較高的靈敏度和特異度的結(jié)果基本一致。

綜上所述，血清CYFRA211、NSE、TK1及SCC在肺部良性病變及惡性腫瘤患者中表達(dá)水平差異顯著，其聯(lián)合檢測(cè)在早期肺癌診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，靈敏度和特異度均顯著高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)，能夠?yàn)樵缙诜伟┑脑\斷提供更為可靠的科學(xué)依據(jù)。