亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        24個(gè)古藺牛皮茶新品系生化成分及遺傳多樣性分析

        2021-06-09 06:57:56李慧麗劉雙紅楊雪梅黃嘉誠(chéng)文衛(wèi)旗陳紅旭高憲云
        茶葉通訊 2021年2期

        李慧麗,劉雙紅,楊雪梅,黃嘉誠(chéng),文衛(wèi)旗,陳紅旭,高憲云,唐 茜,3*

        1. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院,四川 成都 611130;2. 四川省名山茶樹良種繁育場(chǎng),四川 雅安 625100;3.精制川茶四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 成都 611130

        四川茶樹品種資源豐富。李建華等[1]和王小萍等[2]研究發(fā)現(xiàn),四川茶樹種質(zhì)資源具有較高的遺傳多樣性與育種潛力,其中以滎經(jīng)枇杷茶、崇州枇杷茶、南江大葉茶、古藺牛皮茶這 4個(gè)地方資源尤為突出。唐建敏等[3-4]、黃福濤等[5]與李慧[6]分別研究了前三者的表型性狀和遺傳多樣性,發(fā)現(xiàn)三個(gè)種群內(nèi)變異及資源多樣性豐富,遺傳背景復(fù)雜,并從中培育出南江1號(hào)、云頂早、川茶5號(hào)等[7-9]茶樹新品種。但關(guān)于古藺牛皮茶的研究主要集中在野生牛皮茶群體上,種植品種均為群體種,性狀混雜,良莠不齊,推廣面積不足67 hm2,因此,開發(fā)利用野生牛皮茶資源,選育特異性狀新品系迫在眉睫。

        1 材料和方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        以取自四川省名山茶樹良種繁育場(chǎng)的 24 個(gè)古藺牛皮茶新品系為研究材料,福鼎大白茶為對(duì)照(CK);所有供試新品系(種)種植于同一塊地,樹齡均為 5 年,長(zhǎng)勢(shì)良好。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 主要生化成分測(cè)定

        參照陳亮等[10]方法分別在春、夏、秋采摘24個(gè)新品系及對(duì)照的第1輪新梢一芽二葉制作生化樣,測(cè)定其茶多酚及兒茶素總量[11]、游離氨基酸總量[12]、咖啡堿[13]、水浸出物[14];氨基酸組分和兒茶素組分送至中國(guó)測(cè)試研究生院生物所(成都)測(cè)試。

        1.2.2 基于SSR標(biāo)記的遺傳多樣性

        春季采摘24個(gè)品系新梢葉片,以錫箔紙包裹,放入液氮速凍,于-80℃ 冰箱中保存;從已發(fā)表的文獻(xiàn)中選取多態(tài)性好、條帶清晰、重復(fù)性高的10對(duì)SSR引物用于本試驗(yàn)[15-17]。樣品DNA提取選用植物基因組提取試劑盒(TIANGEN DP305)。擴(kuò)增結(jié)果中清晰條帶賦值為1,同一位置無帶或難以分辨的弱帶賦值為0,建立原始數(shù)據(jù)矩陣。在同一擴(kuò)增位點(diǎn),若有至少一個(gè)材料在該擴(kuò)增位點(diǎn)計(jì)數(shù)為“1”,則該擴(kuò)增位點(diǎn)為多態(tài)性條帶,每條多態(tài)性帶可視為一個(gè)等位基因。

        1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

        數(shù)據(jù)整理采用Excel 2013,基本數(shù)據(jù)分析及聚類分析采用SPSS 22.0進(jìn)行;聚類分析采用離差平方和法(Ward’s method),遺傳距離為平均歐氏距離[18];遺傳多樣性分析和聚類用 POWERMARKER V3.25 進(jìn)行,計(jì)算供試材料的等位基因數(shù)(NA)、等位基因頻率(NE)、基因多樣性指數(shù)(I)、多態(tài)信息含量(PIC)等參數(shù)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 主要生化成分含量

        2.1.1 春夏梢主要生化成分含量

        24個(gè)古藺牛皮茶新品系的春、夏梢水浸出物、游離氨基酸等主要生化成分分析結(jié)果表明(表1), 12個(gè)新品系生化指標(biāo)的變異系數(shù)在3.63% ~ 27.88%,平均變異系數(shù)為11.54%,其中最大的為酚氨比(夏梢),最小的為水浸出物含量(春梢)。各品系間生化成分含量存在較大差異,表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性。

        表1 24個(gè)古藺牛皮茶新品系主要生化成分統(tǒng)計(jì)分析Table 1 Statistical analysis of main biochemical components of 24 new strains of Gulin Niupi tea

        續(xù)表

        24個(gè)新品系春、夏梢水浸出物含量較高,普遍高于對(duì)照(春梢15號(hào)、夏梢9號(hào)除外);氨基酸總量方面,春梢中發(fā)現(xiàn)三個(gè)品系(6號(hào)、4號(hào)、1號(hào))高于對(duì)照10%以上,而夏梢則普遍低于對(duì)照,其中5號(hào)、9號(hào)、14號(hào)顯著低于對(duì)照;茶多酚及兒茶素含量方面,春梢普遍高于對(duì)照,茶多酚總量有兩個(gè)品系高于對(duì)照34%以上,兒茶素含量則有三個(gè)品系高于對(duì)照44%以上;夏梢僅8號(hào)、23號(hào)的茶多酚含量略低于對(duì)照,其余品系茶多酚及兒茶素均高于對(duì)照,且茶多酚總量有三個(gè)品系高于對(duì)照 22%以上,兒茶素含量則有四個(gè)品系高于對(duì)照 20%以上;咖啡堿方面,春、夏梢咖啡堿含量變幅接近,均在3.10 ~ 4.50,春梢中有5個(gè)品系咖啡堿含量高于對(duì)照20%以上,而夏梢中高咖啡堿含量特征并不明顯,除17號(hào)、12號(hào)、8號(hào)以外均低于對(duì)照。

        依上分析可知,24個(gè)牛皮茶新品系具選育高水浸出物、高EGCG和高咖啡堿等特色品種的潛力。

        2.1.2 春夏梢酚氨比

        24 個(gè)新品系春梢的酚氨比在 6.36 ~ 11.79,變異系數(shù)為14.39%;夏梢的酚氨比在9.04 ~ 25.26,變異系數(shù)為27.88%。一般認(rèn)為酚氨比小于8適制綠茶,大于15適制紅茶[19],由此初步鑒定,牛皮茶1號(hào)、4號(hào)、6號(hào)、7號(hào)、10號(hào)、13號(hào)、14號(hào)、15號(hào)、16號(hào)、20號(hào)、22號(hào)和23號(hào)的春梢適制綠茶,牛皮茶9號(hào)、11號(hào)、14號(hào)、17號(hào)、18號(hào)和19號(hào)的夏梢適制紅茶。陳正武等根據(jù)前人研究和綜合實(shí)際分析認(rèn)為將酚氨比小于4.5和大于6.5分別作為判定適制綠茶和適制紅茶的標(biāo)準(zhǔn)更為科學(xué)[20],如按照該標(biāo)準(zhǔn), 則24個(gè)牛皮茶新品系中除了牛皮茶15號(hào)的春梢(酚氨比6.36±0.75)外,其他資源的春、夏梢均適制紅茶。

        2.1.3 部分新品系春梢氨基酸組分

        從24個(gè)新品系中選取春梢氨基酸含量較高(36.18 mg/g ~ 43.19 mg/g)的 6 個(gè)新品系進(jìn)行氨基酸組分測(cè)定(表2)。由表可知,牛皮茶6號(hào)的21種氨基酸總量最高,其次是牛皮茶4號(hào)和1號(hào),分別比對(duì)照高21.42%、17.23%和16.11%;氨基酸組分中,天冬氨酸、谷氨酸、茶氨酸和精氨酸是構(gòu)成茶湯鮮味的重要成分[21],8個(gè)新品系的四者總量為:牛皮茶6號(hào)(38.98 mg/g)> 1 號(hào)(37.57 mg/g)> 4 號(hào)(37.26 mg/g)> 13 號(hào)(34.04 mg/g)> 15 號(hào)(34.02 mg/g)> 10 號(hào)(32.97 mg/g)> CK(31.74 mg/g)。與滋味的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.9223[22]的茶氨酸含量高低順序?yàn)榕Fげ?號(hào)> 4號(hào)> 1號(hào)>13號(hào)>15號(hào)>10號(hào)> CK,其中前三者分別比CK高22.17%、16.91%和16.07%。由此可以看出,牛皮茶1號(hào)、4號(hào)、6號(hào)具有加工綠茶滋味鮮爽的物質(zhì)基礎(chǔ)。

        表2 部分牛皮茶新品系春梢氨基酸組分分析Table 2 Analysis of amino acid composition in spring shoots of some new strains of Niupi tea

        2.1.4 部分新品系春夏梢兒茶素組分

        從24個(gè)供試新品系中選取春梢茶多酚和兒茶素含量較高的7個(gè)新品系進(jìn)行兒茶素組分測(cè)定(表3)。由于牛皮茶5號(hào)、12號(hào)、17號(hào)春、夏梢兒茶素總量均位居前三,因此進(jìn)一步測(cè)定此三者夏梢兒茶素組分。酯型兒茶素含量:牛皮茶 5 號(hào) > 12 號(hào) > 17 號(hào) > 8 號(hào) > 2 號(hào) > 19 號(hào) > 18號(hào),顯著高于對(duì)照;進(jìn)一步關(guān)注酯型兒茶素的核心成分EGCG,發(fā)現(xiàn)其中牛皮茶5號(hào)、12號(hào)、17號(hào)的EGCG含量分別比對(duì)照高66.29%、61.03%和56.60%,同時(shí)這三個(gè)新品系的夏梢含量分別比對(duì)照高38.42%、30.16%和40.02%。

        表3 部分新品系春夏梢的兒茶素組分分析Table 3 Analysis of catechin components in spring and summer shoots of some new strains of Niupi tea

        2.2 遺傳多樣性

        2.2.1 24份材料SSR擴(kuò)增結(jié)果

        本試驗(yàn)中24份材料提取的DNA OD260/OD280 比值均在 1.71 ~ 1.87(標(biāo)準(zhǔn)為 1.7 ~ 1.9),DNA濃度均在232.1 ~ 485.2,提取的DNA質(zhì)量較好。用10對(duì)引物對(duì)24個(gè)古藺牛皮茶新品系進(jìn)行SSR-PCR擴(kuò)增,結(jié)果表明,10對(duì)SSR引物擴(kuò)增效果良好,能夠得到清晰、易統(tǒng)計(jì)的條帶。

        10個(gè)標(biāo)記共計(jì)240個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn),其中8個(gè)位點(diǎn)基因型缺失,可能的原因是PCR擴(kuò)增失敗或存在少數(shù)純和無效的等位基因[23]。10對(duì)引物共檢測(cè)到40個(gè)等位基因,平均每對(duì)引物檢測(cè)到等位基因數(shù)4個(gè),其中最多的為6個(gè)(A18、CS1058), 最 少 的 為 3個(gè)(TM209、A114、TM237、TM052、TM169);共檢測(cè)到69個(gè)基因型,平均每對(duì)引物檢測(cè)到6.9個(gè)基因型,其中最多的為14個(gè)(CS1058),最少為4個(gè)(A114)。群體內(nèi)遺傳多樣性分析結(jié)果等位基因頻率在0.354~0.870變動(dòng),平均值為0.541;期望雜合度(He)在0.130 ~ 0.917浮動(dòng),平均值為0.540,多態(tài)信息含量(PIC)在0.2272 ~ 0.7527變動(dòng),平均值為0.5259;基因多樣性指數(shù)(H)在0.2372 ~ 0.7821變動(dòng),平均值為0.5753(表4),結(jié)果表明24份古藺牛皮茶資源有較高的遺傳多樣性。

        表4 24份牛皮茶資源遺傳多樣性分析Table 4 Analysis of genetic diversity of the 24 Niupi tea resources

        2.2.2 基于SSR標(biāo)記的聚類分析

        依據(jù)10對(duì)引物的擴(kuò)增數(shù)據(jù),用Power Marker V3.25 計(jì)算24個(gè)牛皮茶新品系間的Nei遺傳距離,結(jié)果顯示:24個(gè)牛皮茶新品系的遺傳距離變化范圍在0.0800 ~ 1.7984,其中遺傳距離最小的是牛皮茶20號(hào)和21號(hào),遺傳距離最大的是牛皮茶6號(hào)和牛皮茶16號(hào)?;诟髌废甸g的遺傳距離,采用UPGMA法構(gòu)建聚類圖(圖2),遺傳距離為0.43時(shí),可將24個(gè)牛皮茶新品系分為3個(gè)類群。類群Ⅰ包括牛皮茶6號(hào)和7號(hào),牛皮茶18號(hào)單獨(dú)聚于類群Ⅱ,類群Ⅲ則包括其他21個(gè)新品系。

        圖1 基于SSR分子標(biāo)記的聚類圖Figure 1 Cluster diagram based on SSR molecular markers

        3 結(jié)論與討論

        3.1 24個(gè)牛皮茶新品系生化成分多樣性

        24個(gè)新品系的春、夏梢的游離氨基酸、咖啡堿、水浸出物、茶多酚、兒茶素總量 分 別 為 1.26%±0.04% ~ 4.46%±0.07%、3.11%±0.01% ~ 4.49%±0.03%、35.03%±0.20% ~ 47.81%±0.07%、27.24%±0.18% ~ 37.52%± 0.85%、17.13%±0.89% ~ 27.09%±0.61%,酚氨比在6.36 ~ 25.26。從水浸出物含量來看,有13個(gè)新品系春梢的水浸出物含量高于40%,所有品系夏梢全高于40%;表明這些新品系的內(nèi)含物豐富,所制成茶口感飽滿。除此之外,茶多酚和兒茶素總量含量較高,可從中篩選高茶多酚和高兒茶素的新品系。

        24個(gè)牛皮茶新品系新梢生化成分含量變異較豐富,變異系數(shù)在3.63% ~ 27.88%,平均變異系數(shù)為11.54%,低于貴州28份茶樹種質(zhì)資源的變異系數(shù)(25.45%)和朱明珠等研究的栽培于四川省內(nèi)的60個(gè)茶樹品種間的變異系數(shù)(30.20%)[24],且低于130個(gè)‘黃山種’自然雜交后代的變異系數(shù)(30.5%),推測(cè)是因?yàn)檫@些茶樹資源來源于不同的祖先和不同的地區(qū),而古藺牛皮茶群體種生長(zhǎng)區(qū)域相對(duì)集中,分化程度不高。

        3.2 24個(gè)牛皮茶新品系遺傳多樣性

        遺傳多樣性可以用于評(píng)價(jià)物種的遺傳潛力。本試驗(yàn)結(jié)果表明,24個(gè)牛皮茶新品系遺傳距離在0.0800 ~ 1.7984,距離最小的為牛皮茶20號(hào)和21號(hào),遺傳距離最大的為牛皮茶6號(hào)和16號(hào),多態(tài)信息含量(PIC)平均值為0.5259,基因多樣性指數(shù)(H)平均值為0.5753,具有較高的遺傳多樣性,育種潛力大。基于各品系間的遺傳距離,可將24個(gè)牛皮茶新品系聚為3個(gè)類群,類群Ⅰ包括牛皮茶6號(hào)和7號(hào),牛皮茶18號(hào)單獨(dú)聚于類群Ⅱ,類群Ⅲ則包括其他21個(gè)新品系。除此之外,在SSR標(biāo)記中聚為一類的新品系生化成分存在一定差異,表明古藺牛皮茶在自然生長(zhǎng)及品種選育過程中受到環(huán)境等因素的影響,發(fā)生了一定的生理生化變異。

        3.3 特異茶樹資源的篩選

        參考 NY/T 2031—2011 《農(nóng)作物優(yōu)異種質(zhì)資源評(píng)價(jià)規(guī)范 茶樹》,以氨基酸總量≥5.0%、茶氨酸≥3.0%、茶多酚總量≥25.0%或≤7.5%、兒茶素類總量≥20.0%為特異性狀初步篩選出一批潛在優(yōu)異種質(zhì),其中牛皮茶5號(hào)、12號(hào)、17號(hào)的茶多酚含量較高,春、夏季新梢茶多酚含量都高于33%,兒茶素總量都高于23%,可作為高茶多酚及高兒茶素育種材料,且此三者春梢的EGCG含量均大于150 mg/g,夏梢的EGCG含量分別比對(duì)照高38.42%、30.16%和40.02%,可作為高EGCG茶樹的育種材料。

        亚洲男人av天堂久久资源| 丝袜欧美视频首页在线| 国产日产亚洲系列av| 亚洲av午夜福利精品一区不卡 | 国产成人一区二区三区在线观看| 亚洲午夜精品久久久久久抢| 中文字幕色婷婷在线视频| 91成人自拍国语对白| 成人免费毛片aaaaaa片| 欧美视频第一页| 日韩人妻av不卡一区二区三区 | 嗯啊哦快使劲呻吟高潮视频| 久久精品熟女不卡av高清| 深夜日韩在线观看视频| 麻豆亚洲av熟女国产一区二| 国产95在线 | 欧美| 国产精品伦人视频免费看| 中文字幕有码在线亚洲| 久久狠狠色噜噜狠狠狠狠97| 最新亚洲人成无码网www电影| 中文字幕亚洲区第一页| 国产高清在线一区二区不卡| 狠狠色狠狠色综合| 精品国产18禁久久久久久久| 国产无套粉嫩白浆内精| 久久成人成狠狠爱综合网| 国产精品免费久久久久软件| 91精品国产闺蜜国产在线| 日本久久精品福利视频| 亚洲av不卡一区二区三区| 国产免费专区| 国产少妇露脸精品自拍网站| 欧美肥婆性猛交xxxx| 日本强好片久久久久久aaa| 日本高清一区二区三区视频| 国产熟女盗摄一区二区警花91| 国产裸拍裸体视频在线观看| 中文字幕久久久久久久系列| 麻豆精品在线视频观看| 啦啦啦www在线观看免费视频| 久久噜噜噜|