楊瑞東，田鳳霞

（河北省灤州市人民醫(yī)院，河北 灤州）

0 引言

胃癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，同其他腫瘤一樣，胃癌的發(fā)生發(fā)展受細胞內DNA的控制。全自動DNA圖像分析可以監(jiān)測細胞內DNA含量的變化，發(fā)現癌變細胞，目前已廣泛應用于腫瘤的診斷和鑒別診斷，以及治療方案的確定和腫瘤患者預后的觀察[1-2]。應用全自動DNA圖像分析測定胃黏膜組織細胞的相關報道國內少見[3-4]。為了探討其在胃癌診斷及鑒別診斷中的價值及臨床作用，本文對內鏡下活檢胃黏膜組織進行了全自動DNA圖像分析分析，并分析了其與胃癌的分化程度及淋巴結轉移的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2018年1 月至2019年6月在灤縣人民醫(yī)院行胃鏡檢查的162例患者，其中男性110例，女性52例，年齡39～83歲，平均60.5歲。經病理診斷確診的淺表性胃炎37例、慢性萎縮性胃炎38例、疣狀胃炎18例、胃癌69例。在69例胃癌中，高分化17例，中低分化52例，有淋巴結轉移的47例，無淋巴結轉移的22例。

1.2 檢查方法

1.2.1 病理標本的采集

由本院經驗豐富的醫(yī)師負責，采用進口Olympusv70胃鏡，受檢者左側臥位，胃鏡下觀察并用活檢鉗鉗取病變部位5～10塊。然后1%福爾馬林液固定、脫水、石蠟包埋、切片、蘇木精-伊紅（HE）染色等步驟后，鏡下觀察其病理結果。所有標本均由2名以上高年資病理醫(yī)師依據WHO診斷標準確定診斷。

1.2.2 全自動DNA圖像分析分析

受檢者取左側臥位，醫(yī)師在胃鏡直視下手持特制細胞刷，用刷頭中央較長的刷絲刷取病變部位黏膜面，順時針或逆時針旋轉3～5圈，取出細胞刷，拔下刷頭，浸泡在樣本收集管中，送DNA試驗室制片，用Feulgen染色。采用加拿大BC腫瘤研究所提供的全自動細胞圖像分析系統(tǒng)（AICM）對染色片中的每一個細胞核進行掃描分析，根據每個細胞核的123個核特征參數值，自動進行分類和計數，自動打印DNA倍體分析直方圖和細胞點陣圖。

1.3 結果判斷標準

以測定細胞核IOD來判斷DNA含量。以DNA指數（DNA index）來表示DNA的含量。DNA指數=被測細胞DNA IOD值/正常細胞（G0/G1）DNA IOD平均值DNA定量細胞學常用C(content)作為單位來衡量DNA含量。（1）正常2倍體（DNA定量為2C）細胞為主，未見異倍體細胞及異倍體細胞峰。（2）當4C細胞數大于被測細胞總數的5%，但未見異倍體細胞，診斷為增生。（1）和（2）診斷為陰性。（3）出現3個或3個以上＞5C的細胞或出現異倍體細胞峰，診斷為陽性。

1.4 統(tǒng)計學分析

數據采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數據進行分析，全自動DNA圖像分析的差異比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 全自動DNA圖像分析分析

37例淺表性胃炎粘膜中全自動DNA圖像分析的陽性率為16.22%，38例慢性萎縮性胃炎粘膜中全自動DNA圖像分析的陽性率為23.68%，18例疣狀胃炎粘膜中全自動DNA圖像分析的陽性率為22.22%，69例胃癌粘膜中全自動DNA圖像分析的陽性率為95.65%。胃癌中全自動DNA圖像分析陽性率明顯高于淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、疣狀胃炎的陽性率，組間差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），以上結果見表1。

表1 全自動DNA圖像分析比較（n, %）

2.2 胃癌的分化程度與全自動DNA圖像分析的關系

在17例高分化的胃癌組織中全自動DNA圖像分析的陽性率為64.71%，在52例中低分化的胃癌組織中全自動DNA圖像分析的陽性率為96.15%，全自動DNA圖像分析在中低分化胃癌組織中的陽性率高于高分化的胃癌組織的陽性率，差異比較具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

2.3 淋巴結轉移與全自動DNA圖像分析的關系

在47例有淋巴結轉移的胃癌組織中全自動DNA圖像分析的陽性率為97.87%，在22例無淋巴結轉移的胃癌組織中全自動DNA圖像分析的陽性率為63.64%，蘭丁細胞在有淋巴結轉移的胃癌組織中的陽性率高于無淋巴結轉移的胃癌組織的陽性率，差異比較具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 淋巴結轉移與全自動DNA圖像分析的關系（n, %）

3 討論

人類正常體細胞具有較恒定的DNA二倍體含量（除肝臟、心肌、男性生殖細胞外），當人體細胞發(fā)生癌變時，其細胞核內的DNA結構和含量都會發(fā)生異常變化，DNA含量增多，DNA倍體狀況發(fā)生改變[5-6]，出現DNA倍體異常細胞。近年來，國內、外研究證明，如果DNA含量發(fā)生微小的異常變化，就有可能導致惡性腫瘤；特別是腫瘤細胞DNA非整倍體是惡性腫瘤的特征性標志之一，測量和分析細胞DNA含量與倍體對惡性腫瘤的診斷具有重要價值。

3.1 全自動DNA圖像分析分析

許多研究證實，DNA倍體變化與腫瘤的生物學行為密切相關。本中心從2009年起應用目前國際上先進的全自動DNA圖像分析在消化系統(tǒng)疾病的診斷中，作為胃癌的早期篩查方法。本研究表明全自動DNA圖像分析在胃癌組織中的陽性率明顯高于其淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、疣狀胃炎、陽性率差異比較均具有統(tǒng)計學意義。全自動DNA圖像分析分析，具有客觀性強、準確度高、敏感性強的特點。因此可以將全自動DNA圖像分析診斷方法作為一種常規(guī)的臨床檢測方法，采用全自動DNA圖像分析結合病理活檢方法來診斷胃癌[7-8]。

3.2 全自動DNA圖像分析與胃癌分化程度及淋巴結轉移的關系

有研究表明，腫瘤細胞DNA含量與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移密切相關。有學者研究發(fā)現，異倍體胃癌淋巴結轉移率明顯高于二倍體胃癌，且在異倍體胃癌，淋巴結轉移的個數較多，轉移的距離亦較遠。我們分析了全自動DNA圖像分析在69例胃癌患者中高分化及中低分化者的陽性率，結果高分化者全自動DNA圖像分析的陽性率低于中低分化者的陽性率，比較有非常顯著性差異（P＜0.05）。該結果提示全自動DNA圖像分析陽性的腫瘤可能具有較低的分化程度。因此DNA含量測定有助于認識腫瘤的生物學行為。

綜上所述，本研究為細全自動DNA圖像分析在胃癌的診斷提供新的臨床資料床資料，并證實全自動DNA圖像分析分析對于胃部腫瘤具有較高的敏感性，同時也為病理的診斷及鑒別診斷提供參考依據。