賈 怡，劉相玉，田俊生，向 歡，秦雪梅，陳安平，韓雨梅*

1山西大學體育學院；2山西大學中醫(yī)藥現(xiàn)代研究中心，太原 030006

近年來全民健身熱潮日益高漲，國內(nèi)馬拉松賽事舉辦和參賽人數(shù)均呈井噴態(tài)勢，2019年在全國范圍內(nèi)共舉辦規(guī)模賽事1 828場，較2018年同比增長15.62%；累計參賽人次712.56萬，較2018年同比增長22.22%。馬拉松已經(jīng)發(fā)展成為中國最受歡迎，最具影響力的品牌賽事之一[1]。作為經(jīng)典的有氧耐力運動，長期馬拉松鍛煉能夠降低人體心血管患病風險和死亡率。然而，由于長期大負荷運動，馬拉松運動員也可能會伴隨心臟和腎臟等損傷[2]，其中氧化應激可能是導致其損傷的機制之一。

機體在劇烈運動過程中，體內(nèi)可產(chǎn)生和蓄積大量的活性自由基，當超出機體抗氧化防御系統(tǒng)的清除能力時，即可造成運動氧化應激損傷。中藥紅景天乃景天科紅景屬多年生草本或亞灌木，《神農(nóng)本草經(jīng)》和《月王藥診》中記載景天性平，有輕身、扶正固本、理氣養(yǎng)血、潤肺補腎、健腦益智、滋補強身之功效；紅景天的有效成分為紅景天苷，其具有抗缺氧、抗自由基、抑制細胞內(nèi)Ca2+濃度升高，調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡，加速機體有氧代謝供能，增強心肺功能，改善運動疲勞的積極作用[3]，但其在馬拉松項目中的應用研究卻未見報道。因此，研究紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手運動過程中機體代謝能力的影響及作用機制，對提高其身體機能，降低運動損傷，改善運動疲勞具有重要的現(xiàn)實意義。

代謝組學技術是運動人體科學研究的新興工具，已經(jīng)逐步應用到運動訓練實踐和運動與健康促進的機制研究中[4]，該技術通過研究機體受到外界刺激時所引起的內(nèi)源性代謝物在體內(nèi)的動態(tài)變化，結(jié)合精確的現(xiàn)代分析方法，借助多元統(tǒng)計分析可辯識和解析研究對象的生理、病理狀態(tài)及其環(huán)境等因素與代謝物變化之間的關系，在表型，毒理學，疾病相關生物標志物和分子機制的研究中被廣泛使用，在對中藥的多組分、多靶點整體藥效評價以及機制研究方面具有明顯優(yōu)勢[5]。

本研究旨在明確補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷運動過程中機體氧化應激和心肌損傷的影響，并利用代謝組學技術闡釋其可能的作用機制。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

選取參加5次以上國際馬拉松賽全程組別的男性業(yè)余選手共8名，受試者身體健康，無任何不良的飲食偏好。個人馬拉松平均成績4～5 h，月跑量200～300km，所有受試者均自愿參加并簽署知情同意書?；厩闆r如表1所示。

表1 受試者基本情況Table 1 Basic situation of the = 8)

1.2 研究方法

1.2.1 實驗分組及運動方案

根據(jù)受試者不同階段進行分組，分為安靜組(C組)、定量負荷組(CE組)、服藥后安靜組(MC組)與服藥后定量負荷組(ME組)。受試者統(tǒng)一進行20km的定量負荷運動，場地為標準的400 m跑道，共50圈。通過專業(yè)運動手環(huán)記錄跑步距離，全程平均時間在1.5～2 h，心率150～170 次/min，運動中只允許補充純凈水。

1.2.2 藥物干預

紅景天膠囊(四川省佳匯泰生物科技開發(fā)有限公司，國食健字G20120266)，按照說明書每日1次，每次2粒服用(0.3 g/粒，每100 g含紅景天苷1.26 g)，連續(xù)服用一個月。干預期間沒有服用其他藥物，受試者日常訓練及三餐攝入均不進行干預。

1.2.3 樣品收集與處理

C組與MC組均采集晨尿和安靜時空腹血液，CE組與ME組血液在定量負荷運動后即刻采集，尿液在運動后半小時收集。血液取肘靜脈血5 mL，3 500 rpm離心15 min取血清；尿液用10 mL離心管分裝，離心取上清液。分離的體液于-80 ℃保存待測。采樣前一天要求受試者不能攝入高脂肪、高蛋白食物。

1.2.4 血清心肌酶系與自由基指標的檢測

使用南京建成生物工程研究所相關試劑盒，通過酶標儀(Tecan公司 200 Pro的多功能酶標儀，瑞士公司)對血清心肌酶系指標肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)以及自由基指標超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)和總抗氧化能力(T-AOC)進行測定，測試均嚴格按說明書的步驟進行。

1.2.5 核磁信號采集及數(shù)據(jù)收集

1.2.5.1 尿樣預處理

尿樣解凍后取500 μL轉(zhuǎn)至EP管中，加入200 μL D2O(美國諾德，蘭迪斯維爾，美國)配制的PBS磷酸鹽緩沖溶液(0.2 mol/L Na2HPO4/0.2 mol/L NaH2PO4，81∶19，V/V，pH=7.40)，并加入適量0.15%TSP(三甲基叔丁基酸鈉鹽，美國劍橋同位素實驗室公司)作為化學位移零點的定標，4 ℃，離心20 min(13 000 rpm)，最后移取上清液600 μL，置于內(nèi)徑5 mm的核磁管中待測。

1.2.5.2 NMR(布魯克600 MHz的AVANCEⅢ核磁共振檢測儀，德國布魯克公司)檢測條件

采用NOESY脈沖序列進行樣本測定，參數(shù)設置為譜寬8 kHz，混合時間0.15 s，馳豫延遲320 ms，采樣點數(shù)64 k，累加次數(shù)64。在弛豫延遲期間采用預飽和方式抑制水峰，譜儀偏置設置在水峰位置，自由感應衰減信號經(jīng)過傅里葉變換轉(zhuǎn)換為1H NMR圖譜。

1.2.5.3 NMR圖譜處理

尿液1H NMR圖譜均使用MestReNova(Version8.0.1,Mestrelab Research,Santiago de ComPostella,SPain)進行基線、相位調(diào)整。以TSP的化學位移(δ0.0)為標準，對NMR圖譜進行化學位移校正。以δ0.01為基本單位，對圖譜中δ0.5～9.0的區(qū)域進行分段積分，可以得到與化學位移值段相對應的積分值。為消除水峰、尿素峰對分析結(jié)果的影響，將δ4.6～6.2區(qū)間的譜峰強度設置為零。然后采用歸一化法，消除樣品濃度差異的影響，使數(shù)據(jù)集中在0～1范圍內(nèi)，數(shù)據(jù)歸一化處理后進行多元變量統(tǒng)計分析。

1.2.6 統(tǒng)計分析

2 實驗結(jié)果

2.1 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后血清心肌酶系的影響

如圖1所示，與C組相比，CE組血清CK、LDH與AST活性顯著升高(P<0.01或P<0.05)，CK-MB活性未見統(tǒng)計學差異，MC組僅有AST活性顯著降低(P<0.01)；與CE組相比，ME組CK、AST活性明顯降低(P<0.05)，LDH和CK-MB均無顯著性差異；與MC組相比，ME組CK、LDH和AST活性均顯著性升高(P<0.01或P<0.05)，CK-MB活性無統(tǒng)計學差異。

圖1 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后心肌酶系的影響(n = 8)Fig.1 Effect of Salidroside supplementation on myocardial enzymes after amount-loading of marathon amateurs (n =8 )注：與C組相比，*P<0.05；**P<0.01；與CE組相比，#P<0.05；##P<0.01；與MC組相比，▲P<0.05；▲▲ P<0.01。 Note:Compared with C,*P<0.05; **P<0.01;Compared with CE,#P<0.05;##P<0.01;Compared with MC,▲P<0.05;▲▲P<0.01.

2.2 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后血清自由基指標的影響

如圖2所示，與C組相比，CE組血清MDA含量、SOD活性均明顯升高(P<0.05)，MC組MDA，SOD、T-AOC與GSH-PX活性均無統(tǒng)計學差異；與CE組相比，ME組中MDA含量明顯降低(P<0.05)，SOD、T-AOC與GSH-PX活性無明顯變化；與MC組相比，ME組中SOD、T-AOC與GSH-PX活性顯著上升(P<0.01或P<0.05)，MDA含量有上升趨勢但無統(tǒng)計學意義。

圖2 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后血液自由基指標的影響(n = 8)Fig.2 Effect of Salidroside supplementation on blood free radicals index of amateur athletes after marathon (n =8 )注：與C組相比，*P<0.05；**P<0.01；與CE組相比，#P<0.05；##P<0.01；與MC組相比，▲P<0.05；▲▲P<0.01。Note:Compared with C,*P<0.05;**P<0.01;Compared with CE,#P<0.05;##P<0.01;Compared with MC,▲P<0.05;▲▲P<0.01.

2.3 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后尿液代謝物的影響

2.3.1 圖譜指認與分析

馬拉松業(yè)余選手尿液1H NMR典型圖譜見圖3。圖譜處理后，通過分析每個化合物對應的化學位移、偶合常數(shù)及峰形等信息，結(jié)合文獻報道并使用Chenomx NMR Suite 軟件(Version 7.5，Chenomx IncInc，Edmonton，AB，Canada)以及HMDB(http://www.hmdb.ca/)數(shù)據(jù)庫對圖譜中的主要化學成分進行指認，得到馬拉松業(yè)余選手定量負荷前后δ1.0～8.5的1H NMR尿液代謝圖譜，共指認出28種內(nèi)源性代謝物，主要涉及氨基酸代謝和脂質(zhì)代謝，其化學位移及譜峰歸屬見表2。

圖3 馬拉松業(yè)余選手尿液 1H NMR圖譜(n = 8)Fig.3 Marathon amateur urine 1H NMR map (n =8 )

表2 馬拉松業(yè)余選手尿液1H NMR 圖譜中主要代謝物指認結(jié)果(n = 8)Table 2 Identification results of major metabolites in urine 1H NMR map of marathon amateurs (n = 8)

2.3.2 多元統(tǒng)計分析

采用有監(jiān)督的PLS-DA(偏最小二乘法判別分析)對尿樣進行1H NMR代謝輪廓分析，結(jié)果如圖4所示，C組與CE組、ME組均沿t[2]軸明顯分開，CE組與ME組各自聚集且沿t[1]軸明顯分開(圖a)。進一步對PLS-DA進行模型驗證(圖b)，累積的R2和Q2都低于原始值(R2= 0.825，Q2= 0.578)，且Q2在縱軸上的截距為負值，表明本實驗所建立的模型未發(fā)生過擬合，PLS-DA模型驗證成立。

圖4 馬拉松業(yè)余選手C、CE、ME組的PCA散點圖(a)、PLS-DA得分圖(b)和模型驗證圖(c)(n = 6)Fig.4 PCA score plot (a),PLS-DA scores (b) and model validation (c) of the marathon amateur C,CE,and ME groups (n = 6)

2.3.3 補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后尿液潛在生物標志物的影響

為了明確補充紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后尿液潛在生物標志物的影響，分別對C組、CE組和ME組尿液1H NMR數(shù)據(jù)進行PLS-DA分析(圖5)。對C組和CE組的代謝物峰面積進行獨立樣本t檢驗，篩選VIP > 1且P<0.05的代謝物作為定量負荷前后的潛在生物標志物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)(表3)：與C組相比，CE組共發(fā)現(xiàn)纈氨酸、乳酸、2-羥基異丁酸等15個潛在生物標志物，其中纈氨酸、乳酸、2-羥基異丁酸、丙酮酸、3-羥基丁酸、賴氨酸、丙氨酸、異亮氨酸、丙酮和琥珀酸這10種潛在生物標志物顯著增加，甜菜堿、甘油、谷氨酰胺、絲氨酸和肌氨酸這5種潛在生物標志物顯著下降。在紅景天苷干預一個月后，與CE組相比，ME組尿液中上述15種潛在生物標志物有11種向C組狀態(tài)顯著回調(diào)，表明紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷后的尿液潛在生物標志物有顯著的干預調(diào)節(jié)作用。采用熱圖分析可以更加直觀地展示紅景天苷干預作用下的11種尿液潛在生物標志物在各組中的變化趨勢(圖6)，顏色越深表明在尿液中含量越高，相反，則含量越低。

圖5 馬拉松業(yè)余選手尿液PLS-DA得分圖和模型驗證圖(n = 6)Fig.5 Marathon amateur urine PLS-DA score map and model validation map (n = 6)注：a圖和b圖：C vs CE；c圖和d圖：CE vs ME。Note:Fig.a and b:C vs CE;Fig.c and d:CE vs ME.

表3 尿液1H NMR圖譜中代謝物的相對峰面積(n = 6)Table 3 Relative peak area of differential metabolites in urine 1H NMR spectra (n = 6)

圖6 紅景天苷干預下尿液中11種潛在生物標志物的熱圖(n = 6)Fig.6 Heat map of 11 differential metabolites in urine under the intervention of salidroside (n = 6)

2.4 代謝通路分析

為了探尋紅景天苷干預馬拉松業(yè)余選手定量負荷運動后潛在生物標志物所涉及的代謝途徑，對紅景天苷干預后11個顯著回調(diào)的潛在生物標志物進行MetPA通路富集分析。將其導入MetPA(MetaboAnalyst 4.0，https://www.metaboanalyst.ca/)進行整合，篩選出紅景天苷干預下明顯改變的代謝途徑，結(jié)果如圖7所示。其中橫坐標Pathway Impact表示其代謝通路的重要性值，縱坐標-logP表示代謝通路富集分析的顯著性水平。本次分析中設定代謝通路的閾值為0.1，當代謝通路影響值高于0.1時，該通路可被視為潛在的靶標代謝路徑。分析結(jié)果表明紅景天苷干預下馬拉松業(yè)余選手體內(nèi)潛在生物標志物的變化主要與以下代謝通路相關性最高(impact>0.1)：(1)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝；(2)甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝；(3)氨?；?tRNA生物合成；(4)甘油脂代謝。

圖7 MetPA通路分析(n = 6)Fig.7 Summary diagram of Pathway analysis with MetPA (n = 6)注：1：甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝；2：甘油脂代謝；3：氨?；?tRNA的生物合成；4：丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝。Note:1:Glycine,serine and threonine metabolism;2:Glycerolipid metabolism;3:Aminoacyl-tRNA biosynthesis;4:Alanine,aspartate and glutamate metabolism.

3 討論

3.1 紅景天苷能夠改善馬拉松業(yè)余選手定量負荷后機體氧化應激和心肌損傷

研究表明，長期的馬拉松運動影響機體抗氧化能力，運動導致的肌肉疲勞和延遲性肌肉酸痛(DOMS)等負面效應大多是由于組織細胞過度的氧化應激所致[6]。而紅景天苷作為一味傳統(tǒng)中藥，具有抗氧化，抗病毒，抗腫瘤等多種藥理作用。本研究測定了服用紅景天苷前后不同狀態(tài)下馬拉松業(yè)余選手血清中抗氧化酶SOD、T-AOC和GSH-PX活性以及MDA含量的變化，其中MDA作為細胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，大量積聚會導致細胞裂解和死亡，是機體氧化應激的生物標志物之一[7]。與C組相比，CE組MDA含量顯著升高，表明長時間定量負荷運動造成了馬拉松業(yè)余選手體內(nèi)脂質(zhì)過氧化水平升高，SOD活性顯著增加可能是機體自我調(diào)節(jié)所致。與CE組相比，ME組血清MDA含量顯著降低，說明紅景天苷可以有效改善馬拉松業(yè)余選手定量負荷后機體氧化應激損傷，而抗氧化酶類活性增加無顯著性可能與服藥時間長短有關，另一方面也可能與非酶促抗氧化劑的積極作用有關。ME組相對于MC組，血清MDA含量無顯著改變，而SOD、T-AOC和GSH-PX活性均顯著增加，提示補充紅景天苷一段時間后再進行相同定量負荷運動，可以有效提高機體抗氧化酶活性，降低氧化應激水平。

馬拉松作為一項長時間大負荷的耐力運動，其能夠防治心血管相關疾病的積極作用已被大眾廣泛認可，然而越來越多的研究表明，長期馬拉松運動使心臟負荷過大，易導致心肌纖維撕裂，造成微損傷，加之運動過程中自由基產(chǎn)生增多，機體氧化損傷加劇，抗氧化能力降低，兩方面因素結(jié)合可能誘發(fā)和增加炎癥反應從而造成不利的心肌重塑，進而誘發(fā)心源性猝死[8]。紅景天苷對缺氧/復氧大鼠原代心肌細胞有保護作用,其機制可能與改善受損心肌細胞線粒體功能障礙、穩(wěn)定線粒體動力學平衡有關[9]。本研究選取能夠診斷心肌損傷的參考指標心肌酶系，包括AST、LDH和CK-MB來觀察服用紅景天苷對馬拉松業(yè)余選手定量負荷前后心肌損傷的影響。研究發(fā)現(xiàn)CE組血清CK、LDH和AST活性較C組均顯著性升高，提示馬拉松業(yè)余選手定量負荷后心肌可能出現(xiàn)一定程度的損傷。補充紅景天苷一個月后進行相同負荷的定量運動，與CE組相比，ME組CK、AST活性顯著降低。已知CK是參與ATP-CP供能系統(tǒng)的關鍵酶之一，是評估肌肉損傷的敏感指標。AST活性測定有助于對心臟病變的診斷，正常情況下AST存在于組織細胞中，心肌細胞中含量最高，血清中含量極少，心肌梗塞時血清中AST活性上升[10]。ME組CK和AST活性顯著降低表明紅景天苷能夠減輕馬拉松業(yè)余選手定量負荷運動后的肌肉損傷，并具有保護心臟的積極作用。

3.2 紅景天苷可以調(diào)控馬拉松業(yè)余選手定量負荷后尿液代謝組學特征

本研究采用PLS-DA和多元統(tǒng)計分析方法對馬拉松業(yè)余選手定量負荷前后的尿樣進行代謝輪廓分析，發(fā)現(xiàn)纈氨酸、乳酸、2-羥基異丁酸等15種代謝物可被辨識為CE組尿液內(nèi)源性差異代謝物。補充紅景天苷一個月后，ME組尿液中上述11種潛在生物標志物發(fā)生明顯回調(diào)，說明紅景天苷補充對馬拉松業(yè)余選手定量負荷過程中的機體代謝有積極的調(diào)節(jié)作用。

3.2.1 能量代謝

核磁代謝組學結(jié)果揭示了馬拉松業(yè)余選手在定量負荷運動中三大供能物質(zhì)(碳水化合物，脂質(zhì)和蛋白質(zhì)途徑)的代謝變化規(guī)律。結(jié)果顯示，CE組尿液乳酸水平比C組顯著上升，表明長時間耐力運動過程中機體糖酵解供能增加，尿液中乳酸代謝物增加是機體消除乳酸的途徑之一。研究表明，長時間耐力運動中不僅糖代謝十分活躍，同時氨基酸分解代謝加強，特別是纈氨酸、異亮氨酸等支鏈氨基酸的氧化加強[11]。CE組尿液中纈氨酸、異亮氨酸、丙氨酸，琥珀酸，賴氨酸水平升高提示長時間耐力運動中機體蛋白質(zhì)水解增加提高能量補充以維持血糖穩(wěn)定。丙氨酸上調(diào)，表明定量負荷運動可能促進了丙氨酸-葡萄糖循環(huán)以加速肝臟糖異生[12]。另外，我們還發(fā)現(xiàn)定量負荷運動后馬拉松業(yè)余選手脂質(zhì)代謝發(fā)生顯著改變。CE組尿液甘油含量顯著下降，3-羥基丁酸和丙酮明顯增加，表明定量負荷運動過程中甘油糖異生增加，脂代謝加強，酮體合成增加。

3.2.2 氨基酸代謝

肌氨酸，是一種非蛋白氨基酸，可以在肝臟中由甜菜堿代謝生成，研究表明補充甜菜堿可降低肥胖，并增強肌肉耐力和力量[13]。本研究CE組尿液中肌氨酸與甜菜堿水平均顯著下降，表明馬拉松業(yè)余選手在長時間運動后耐力水平下降，機體產(chǎn)生一定程度的疲勞。絲氨酸屬于營養(yǎng)非必需氨基酸，對神經(jīng)酰胺，鞘脂和磷脂酰絲氨酸前體的生物合成至關重要，補充磷脂酰絲氨酸有助于預防肌肉酸痛，在自行車，舉重和耐力跑方面均能夠提高機體能力[14]。據(jù)報道血漿絲氨酸水平與其他多種氨基酸水平降低是耐力運動的急性反應[15]，本研究CE組尿液中的絲氨酸水平明顯降低，這可能是機體疲勞的表現(xiàn)之一。谷氨酰胺是骨骼肌和血漿中最豐富的氨基酸，它在調(diào)節(jié)體內(nèi)代謝平衡以及增強免疫系統(tǒng)功能方面具有重要意義[16]。研究表明，血漿谷氨酰胺降低與過度訓練綜合征的免疫抑制有關[17]。本研究CE組尿液谷氨酰胺水平的降低可能與長時間耐力運動后機體的免疫功能下降有關。

本研究中補充紅景天苷一個月后，相對于CE組，ME組尿液中11種潛在生物標志物能夠向正常狀態(tài)顯著回調(diào)，表明紅景天苷能夠?qū)︸R拉松業(yè)余選手定量負荷引起的機體代謝變化具有良好的調(diào)節(jié)作用?；贛etaboanalyst在線MetPA通路分析顯示，上述代謝物主要涉及4條代謝通路：丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝，甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝，氨?；?tRNA生物合成和甘油脂代謝。這些代謝通路主要涉及氨基酸代謝和脂代謝。骨骼肌與肝臟之間的丙氨酸—葡萄糖循環(huán)是運動時蛋白質(zhì)參與供能的重要途徑，而天冬氨酸和谷氨酸均可參與細胞內(nèi)三羧酸循環(huán)，是連接糖代謝和氨基酸代謝的紐帶。甘氨酸為生糖氨基酸,可以轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A參與TCA循環(huán)為機體提供能量。研究證實，甘氨酸可由蘇氨酸(蘇氨酸脫氫酶途徑)、膽堿(肌氨酸合成途徑)和絲氨酸(絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶)途徑合成。Heidari 等人發(fā)現(xiàn)適量補充甘氨酸可減輕線粒體腫脹，減少 ROS 和脂質(zhì)過氧化作用，說明甘氨酸可抑制活性氧(ROS)生成，減少氧化應激反應的發(fā)生[18]。葡萄糖衍生的絲氨酸可以代謝為甘氨酸參與合成谷胱甘肽(GSH)，進而有助于維持氧化還原穩(wěn)態(tài)[19]。本研究中ME組MDA含量顯著低于CE組，提示紅景天苷可能通過調(diào)節(jié)甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝通路正向調(diào)節(jié)細胞氧化還原穩(wěn)態(tài)，進而提高了業(yè)余馬拉松選手運動過程中的抗氧化能力。甘油脂代謝是指甘油三酸酯被分解產(chǎn)生甘油和脂肪酸的過程。甘油可以進一步轉(zhuǎn)化為磷酸二羥丙酮參與糖代謝或糖異生，而脂肪酸通過β氧化釋放大量能量供人體活動需要。本研究中CE組較C組甘油含量顯著下降，說明業(yè)余馬拉松選手運動過程中脂肪分解代謝活躍，糖異生作用加強，補充紅景天苷后ME組尿液甘油含量顯著高于CE組，說明機體運動過程中脂肪代謝供能比例增加，產(chǎn)能效率顯著提高。另外，在氨?；?tRNA生物合成代謝通路中，氨酰基-tRNA合成酶是核編碼的酶，該氨?；磻獮榈鞍踪|(zhì)翻譯過程提供了底物，是細胞質(zhì)與線粒體蛋白翻譯的必需物質(zhì)，在蛋白質(zhì)合成和轉(zhuǎn)運過程中發(fā)揮重要作用[20]。本研究中，紅景天苷干預后ME組纈氨酸等多種氨基酸代謝產(chǎn)物均發(fā)生回調(diào)，提示可能存在蛋白質(zhì)翻譯過程的變化，進而對機體蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生影響。綜上所述，本研究結(jié)果提示：紅景天苷改善馬拉松業(yè)余選手氧化應激損傷并不是單一的靶點，可能與機體內(nèi)多條生理通路有關。紅景天苷在馬拉松業(yè)余選手定量負荷過程中可能通過促進相關氨基酸和脂質(zhì)代謝，增加脂肪利用率，節(jié)約蛋白質(zhì)，進而改善氧化應激和心肌損傷。

未來工作中可以進一步采用其他代謝組學方法如質(zhì)譜、色譜及色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術展開研究；也可以整合轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學和代謝組學進行深入研究，從而系統(tǒng)全面地闡釋中藥紅景天苷在改善馬拉松業(yè)余選手氧化應激損傷中的代謝調(diào)控機制。

4 結(jié)論

補充紅景天苷能夠增強馬拉松業(yè)余選手定量負荷運動后機體的抗氧化能力，改善心肌損傷，其機制可能主要是通過促進氨?；?tRNA及其他氨基酸的合成和利用而發(fā)揮作用。