文/張展青，黃育濤，陳曉榆，蔡幸生，朱勇斌

地中海貧血簡稱地貧，主要分為α地中海貧血（α-thalassemia，α-TT）及β-地中海貧血（β-thalassemia，β-TT）是一組由于珠蛋白基因的缺失或者缺陷導(dǎo)致血紅蛋白中一種或多種珠蛋白肽鏈合成障礙，以致紅細胞內(nèi)血紅蛋白含量減少并伴有貧血的常染色體隱性遺傳性溶血性疾病。地貧的基因類型及出現(xiàn)率有較大的地域及民族差異。地中海貧血多見于地中海及東南亞地區(qū)，在我國南方廣東、廣西、海南、貴州、云南、四川等省較為多發(fā)[1]。目前，地貧尚未有特效方式治療[2]，對重型地貧只能通過終生輸血維持生命，所以阻斷地中海貧血患兒的出生尤為重要和迫切。為了解廣東揭陽地區(qū)兒童地中海貧血發(fā)病率和基因型，本研究回顧分析2017年1月至2021年3月揭陽市人民醫(yī)院兒科門診及兒科住院部收治的小紅細胞貧血患兒地中海貧血基因檢測結(jié)果，并將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2017年1月-2021年3兒科門診以及兒科住院部收治的籍貫為廣東揭陽地區(qū)兒童409例，其中男237例，女172例，年齡在0-14歲之間。

1.2 納入和排除標準納入標準

納入標準：紅細胞平均血紅蛋白在27pg以下；紅細胞平均體積在82fl以下。排除標準：非廣東揭陽籍貫；合并血液系統(tǒng)疾??；合并免疫系統(tǒng)疾病。

1.3 研究方法

1.3.1 主要儀器和試劑

使用希森美康全自動血液分析儀及配套試劑、基因擴增儀、恒溫雜交儀（YN-H16）和深圳亞能生物地中海貧血基因檢測試劑盒等。

1.3.2 篩查方法

采用希森美康全自動血液分析儀對外周血中平均血紅蛋白體積(MCV)、平均血紅蛋白(MCH)、Hb進行測定，初步排除其他因素引發(fā)的貧血。以平均紅細胞體積MCV＜82fl和(或)平均血紅蛋白含量MCH＜27pg為地貧血常規(guī)篩查陽性指標[3]。篩查陽性標本進行地貧基因檢測。

1.3.3 基因診斷

抽取小紅細胞貧血兒童的2ml外周靜脈血，EDTA-2K抗凝，應(yīng)用地中海貧血基因診斷試劑盒提取DNA，在基因擴增儀上擴增，在恒溫雜交儀（YN-H16）應(yīng)用PCR方向點雜交法進行雜交，經(jīng)洗膜顯色，再根據(jù)膜條上的探針排列順序進行結(jié)果判讀。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

本文統(tǒng)計分析資料選擇Excel系統(tǒng)軟件進行。

2 結(jié)果

（1）廣東揭陽地區(qū)409例小紅細胞貧血兒童地中海貧血基因篩查結(jié)果分析，正常183例，地貧226例，地貧檢出率55.26%；其中α地中海貧血135例，β地中海貧血87例，α復(fù)合β地中海貧血4例，檢出率分別為33.01%、21.27%及0.98%。見表l。

（2）409例小紅細胞貧血兒童不同性別地中海貧血檢出情況比較，男童251例，其中α地中海貧血75例檢出率29.88%，β地中海貧血52例檢出率20.72%，α復(fù)合β地中海貧血3例檢出率1.20%；女童158例，其中α地中海貧血60例檢出率37.97%，β地中海貧血35例檢出率22.15%，α、β復(fù)合地中海貧血1例檢出率0.63%；女童α地中海貧血檢出率比男童高，β地中海貧血男女童檢出率較為接近。見表2。

表2 不同性別不同類型地中海貧血檢出情況比較

（3）226例地貧兒童地貧基因型情況分析，α地中海貧血中以--SEA/αα基因型構(gòu)成比最高，其余依次為-α3.7/αα、-α4.2/αα、--SEA/-α3.7、ααCS/αα、--SEA/-α4.2、ααQS/αα和--SEA/αCSα等基因型；β地中海貧血中以IVS-2-654/N、CD41-42/N、CD17/N、IVS-2-654/CD41-42和-28/N基因型構(gòu)成比排前五位，其余八種基因型較為少見；α復(fù)合β地中海貧血總共4例，分別為不同基因型。見表3。

表3 226例地貧基因型分布

（4）409例小紅細胞貧血患兒地貧等位基因攜帶率及構(gòu)成比分析，α地貧等位基因--SEA、-α3.7和-α4.2最為常見；β地貧等位基因CD41-42/N、IVS-2-654/N和CD17/N最為常見。見表4。

表4 409例小紅細胞貧血患兒地貧等位基因攜帶率及構(gòu)成比

3 討論

地中海貧血是一種常見的常染色體隱性遺傳性，珠蛋白基因發(fā)生突變、缺失等缺陷導(dǎo)致的珠蛋白合成減少，致使血紅蛋白合成減少，血紅蛋白病,重型地中海貧血致死性非常高［4-6］。地貧基因檢查為地貧診斷金標準［7-8］。由于高發(fā)于地中海地區(qū)，所以命名為地中海貧血。除地中海地區(qū)以外，其他地區(qū)包括我國南方地區(qū)和少數(shù)民族也有發(fā)病［9］，尤其廣西、廣東、海南、四川等省多發(fā)。依據(jù)患者珠蛋白基因缺陷不同，地中海貧血可以分為不同類型，以α地貧和β地貧最為常見。根據(jù)α珠蛋白基因缺陷的不同，可以分為α缺失型和α非缺失型地中海貧血，目前，全世界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了至少35種α缺失型地中海貧血［10-11］。人類β珠蛋白基因，總長約849個堿基對，位于11號染色體的長臂末端，β珠蛋白鏈一條來自父方，一條來自母方，多數(shù)β基因型為點突變所致地中海貧血，少數(shù)為基因缺失所致地中海貧血。目前，全世界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)200多種β基因型突變的地中海貧血［12-14］。隨著我國經(jīng)濟的迅速發(fā)展，尤其作為經(jīng)濟發(fā)展較好的廣東省珠三角地區(qū)，吸引大量全國各地人群（包括廣東揭陽地區(qū)）前來工作經(jīng)商，在無形中形成了不同地區(qū)人群的交往，也增多了廣東揭陽地區(qū)人與全國不同地區(qū)人的婚姻嫁娶事宜，導(dǎo)致地貧基因類型也越來越復(fù)雜。因此，掌握兒童地中海貧血的狀況及基因突變類型資料，有利于完善廣東揭陽地區(qū)地中海貧血基因類型庫，對未來本地區(qū)地貧的防治具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，廣東揭陽地區(qū)小紅細胞貧血兒童地中海貧血檢出率高達55.26%；其中α地中海貧、β地中海貧血及α、β復(fù)合地中海貧血檢出率分別為33.01%、21.27%及0.98%。α地中海貧血以--SEA/αα基因型構(gòu)成比最高為77.78%，其余依次為-α3.7/αα、-α4.2/αα、--SEA/-α3.7、ααCS/αα、--SEA/-α4.2、ααQS/αα和--SEA/αCSα等基因型；廣東揭陽地區(qū)α地貧基因型與福建、深圳、貴陽、廣西、江西地區(qū)較為一致，等位基因以--SEA、-α3.7和-α4.2最為常見。β地中海貧血中，發(fā)現(xiàn)7種等位基因，CD41-42/N、IVS-2-654/N、CD17/N、-28/N、βE/、CAP位點突變和IVS-I-1/N，以前三者最為常見，構(gòu)成比分別為36.89%、35.92%和12.62%；與國內(nèi)其他地區(qū)相關(guān)報道不盡相同。α復(fù)合β地中海貧血同基因型較為少見。

綜上所述，廣東揭陽地區(qū)小紅細胞貧血兒童地中海貧血檢出率高，基因類型復(fù)雜，各級醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)該加大對當?shù)赜g人群關(guān)于地貧的宣傳教育及遺傳咨詢和地貧篩查及基因診斷工作力度,以達到預(yù)防地中海貧血的目的，尤其是遏制中重地貧兒的出生。