胡曉艷 金一春 曹向英 孫文梅 朱 駿 許 柯

（上海市松江區(qū)食用農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)督檢測中心 上海松江 201611）

副結(jié)核病 （Paratuberculosis），也叫約內(nèi)氏?。↗ohne's Disease，JD），是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）公布的B類疫病，屬我國二類動物疫病。該病是由副結(jié)核分枝桿菌 （Mycobacterium aviumsubspeciesparatuberculosis，MAP）引起的一種牛傳染病，主要經(jīng)口、母嬰感染，染病后形成小腸末端肉芽腫、腸黏膜增厚，使牛只持續(xù)性腹瀉、漸進性消瘦、產(chǎn)乳量和繁殖能力嚴重下降，最后失去生產(chǎn)能力而被淘汰[1]。該病流行廣泛，無明顯季節(jié)性，肉牛業(yè)、乳牛業(yè)發(fā)達國家和地區(qū)受害最嚴重。JD早期診斷、預防較難，臨床病程較復雜，患牛在發(fā)病腹瀉時會將大量MAP排入環(huán)境，威脅易感牛群。同時，該病還可感染其他反芻動物和許多野生動物，有研究表明MAP可能與人克羅恩病及其它免疫缺陷癥有關[2-4]，對人類健康構(gòu)成威脅。

該病于1953年在我國被首次報道，近年來感染率有上升趨勢，給我國養(yǎng)牛業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，如何有效控制該病己經(jīng)成為我們所面臨的重要問題。為了解上海松江地區(qū)是否存在牛副結(jié)核病及其感染情況，筆者于2017-2019年采用ELISA方法對本地規(guī)模牛場MAP抗體進行連續(xù)檢測，指導了牛場疫病綜合防控工作，提高了本地區(qū)規(guī)模牛場疫病防控能力和水平。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 從松江區(qū)2個規(guī)模牛場隨機采血，共采集了1 260份牛血清樣品(見表1)。按常規(guī)方法分離血清，置-20℃冷凍備用。

表1 2017-2019年規(guī)模牛場牛血清樣品采集情況

1.1.2 試劑 本試驗采用IDEXX公司制造的牛副結(jié)核分枝桿菌抗體ELISA檢測試劑盒，供應商為上海賽嘉生物科技有限公司。

1.2 方法 嚴格遵從上述試劑盒說明書進行試驗操作和結(jié)果判定，為減少試驗誤差，對可疑樣品進行重復測定。

2 結(jié) 果

對采集的黃牛540份、乳牛720份血清樣品利用上述方法進行檢測，結(jié)果表明：2017-2019年JD總抗體陽性率為2.1%，2019年陽性率比2017年、2018年高；其中，黃牛陽性率4.6%，乳牛陽性率0.1%（見表2）。

表2 2017-2019年規(guī)模牛場JD抗體檢測結(jié)果

3 討論與分析

此次血清學調(diào)查結(jié)果表明，本地區(qū)規(guī)模牛場2017年和2019年的MAP抗體陽性率分別為1.6%、4.4%，高于2018年（0.1%），通過比對該病的流行病學調(diào)查結(jié)果（2.8%～18%）[5-6]，發(fā)現(xiàn)松江區(qū)由于生物安全管理及消毒工作到位，有效地控制了JD的發(fā)生和傳播。黃牛場陽性率比乳牛場陽性率高，不同牛場MAP感染存在較大差異，應著重加強對黃牛場的疫病控制。值得注意的是，乳牛場出現(xiàn)了一例陽性，發(fā)病后會導致產(chǎn)乳量下降，且作為傳染源可能會使JD在乳牛群中蔓延，應迅速隔離淘汰陽性牛，同時對周圍牛只跟蹤檢測，以防隱性感染。本次調(diào)查采用科學隨機的抽樣方法，雖樣品量不多，但具有本地區(qū)代表性，基本說明了松江區(qū)牛場JD的感染情況。

養(yǎng)牛業(yè)是畜牧業(yè)的重要組成部分，在積極預防控制嚴重影響?zhàn)B牛業(yè)的口蹄疫、牛布魯氏菌病等重大傳染病的同時，加強其它細菌、病毒及寄生蟲類傳染病的防控也愈發(fā)重要。部分地區(qū)由于環(huán)境保護、飼養(yǎng)隔離工作不到位，造成了MAP的高感染率。目前國際上缺少JD特效藥和可用疫苗，各國都采取JD控制方法（檢測、隔離、淘汰）逐步降低感染率[7-8]。在美國農(nóng)場，17.4%的乳牛曾表現(xiàn)出JD臨床癥狀，每年造成2億～2.5億美元的損失[9]。通過此次調(diào)查，可以看出在松江區(qū)規(guī)模牛場已有牛副結(jié)核病感染現(xiàn)象，應予以重視。

從牛副結(jié)核病流行病學特點上看，1歲齡以下的牛最易感染，初期無臨床癥狀，經(jīng)過潛伏期后牛只體內(nèi)抗體增多，原來的陰性個體重新檢測時或許會轉(zhuǎn)為陽性[10]；從病程特點上看，由于其感染前期主要以細胞免疫為主，2歲以前的牛很難利用ELISA方法檢出是否感染MAP[11]，可能因隱性感染而成為長期帶毒者，直到2～5歲才會出現(xiàn)臨床癥狀而成為持續(xù)性的傳染源，容易造成牛場疫病防控上的忽視。因此，不排除抽檢的牛場因牛只的年齡相對較小而出現(xiàn)MAP抗體陽性率很低的結(jié)果。由此說明，加強對該病的持續(xù)性定期監(jiān)測顯得尤為重要。

隨著我國經(jīng)濟社會的發(fā)展，JD的傳染蔓延將威脅到畜牧業(yè)的健康發(fā)展。目前，尚無應對該病的特效藥，應加強牛場飼養(yǎng)管理能力，改善牛舍環(huán)境，保證牛群健康；定期對牛舍、飼養(yǎng)工具進行消毒，及時對糞尿做無害化處理；禁止非本場人員及車輛進入養(yǎng)殖區(qū)，嚴格實行生物安全制度；堅持自我繁育，持續(xù)監(jiān)測牛只血清學抗體水平，逐步清除患牛；嚴格檢疫所引入的牛只，杜絕隱性感染牛進場。通過綜合疫病控制手段，切實阻斷JD的傳播，為牛場疫病防治工作作出指導，保障養(yǎng)牛業(yè)健康平穩(wěn)發(fā)展。