陳慧婷，徐翠，黎家祥，花象柏

（南昌德爾塔生物技術(shù)有限公司，江西南昌330013)

豬丁型冠狀病毒又稱δ（德爾塔）冠狀病毒（PDCoV),該病毒于2012年由香港大學(xué)Woo等從169份豬糞樣品中檢出，檢出率約為10.1%,美國于2014年檢出[1]。2015年，從江西暴發(fā)的新生仔豬腹瀉中，也檢出了PDCoV[2]。2021年2月，從江西省南昌市新建區(qū)西山鎮(zhèn)某養(yǎng)豬戶所送的新生仔豬腹瀉病料檢測出PDCoV為陽性，豬流行性腹瀉病毒（PEDV)呈陰性，從而確定該養(yǎng)豬戶新生仔豬腹瀉由PDCoV引起，現(xiàn)診療情況報告如下。

1 發(fā)病情況

該養(yǎng)豬戶飼養(yǎng)母豬100頭左右，其中生產(chǎn)母豬60余頭。從2020年7月份開始，持續(xù)出現(xiàn)新生仔豬腹瀉，先后30窩仔豬發(fā)病。新生仔豬腹瀉多從產(chǎn)后3～4日齡開始，7d以內(nèi)仔豬發(fā)生腹瀉的多以死亡為轉(zhuǎn)歸，耐過7d不死的則可存活下來，每窩殘存仔豬數(shù)0～4頭不等。當(dāng)時未作實驗室檢測，認(rèn)為由PEDV引起，先后給母豬免疫過豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活苗和豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉和豬輪狀病毒三聯(lián)活疫苗各2次，新生仔豬腹瀉發(fā)病沒有減少。

2 臨床癥狀

新生仔豬于3～4日齡突然發(fā)病，先嘔吐，后水樣腹瀉，發(fā)病豬經(jīng)過3～4d脫水死亡。前期體溫不升高，后期有些下降。

3 剖檢變化

剖檢2頭死亡仔豬，胃內(nèi)有大量新鮮乳白色凝固乳汁，腸壁變薄，腸內(nèi)有多量淡黃色米湯樣內(nèi)容物，其余臟器無肉眼可見變化。

4 實驗室檢測

4.1 檢測樣品采集

2頭剖檢仔豬均取下列病料。一是內(nèi)臟病料，包括扁桃體、肺、脾、肝、腎、和肺門、肝門、腹股溝和腸系膜等部位的淋巴結(jié)等組織少許，用作發(fā)病誘因檢測；由于剖檢病例看不到豬瘟和豬偽狂犬病的病變，故只作豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）的檢測。二是結(jié)扎5～10cm的小腸一段，用作新生豬最常見的兩個發(fā)病原因PEDV和PDCoV的檢測。

4.2 實驗試劑

RNA提取試劑盒來自TAKARA公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒及其他試劑來自天根生化科技（北京）有限公司。

4.3 實驗方法

按試劑盒說明書操作，先從采集的樣品提取RNA，再以RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄擴增cDNA，然后以cDNA為模板，進行PCR擴增，最后用PCR產(chǎn)物進行核酸電泳，觀察實驗結(jié)果。

4.4 實驗結(jié)果

內(nèi)臟病料相關(guān)病原PRRSV和腸道病料相關(guān)病原PEDV及PDCoV的檢測結(jié)果見表1：

表1 內(nèi)臟病料檢測結(jié)果

5 討論

我國自2010年暴發(fā)新生仔豬腹瀉以來，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。關(guān)于引起新生仔豬腹瀉的病原研究，已確定主要病原為PEDV,其次為PDCoV。但是，由PEDV和PDCoV這兩種病原引起的新生仔豬腹瀉，在流行病學(xué)、臨床癥狀和剖檢病變等方面都極為相似，無法在臨床上對兩者進行鑒別。本次發(fā)病的新生仔豬腹瀉，一直當(dāng)作PED來處理，發(fā)現(xiàn)不奏效后，才送病料至實驗室進行檢測。對所送兩個病例的檢測結(jié)果表明，PEDV均為陰性，PDCoV均為陽性；在發(fā)病誘因上，PRRSV的檢測結(jié)果也為陰性；故可確定本次新生仔豬腹瀉，由單一PDCoV病原引起。

美國于2014年暴發(fā)新生仔豬腹瀉，在腹瀉樣品中PDCoV的檢出率達30%[2]。賀冬生等報道[3]，華南某豬場有母豬2 000頭，3～7日齡新生豬發(fā)生腹瀉，發(fā)病率90%,死淘率90%以上，經(jīng)實驗室檢測豬傳染性胃腸炎病毒、PEDV和豬輪狀病毒等均為陰性，PDCoV為陽性，從而確定該豬場的新生仔豬腹瀉由PDCoV引起。D.Song等報道[2]，在中國江西暴發(fā)的新生仔豬腹瀉中檢出PDCoV,從2012年11月到2015年3月，所收集的新生仔豬腹瀉樣品中，PDCoV的單一感染率為33.71%。逄鳳嬌等報道[4]，華東地區(qū)豬場2014～2015年收集的43份腹瀉樣品檢測，PDCoV陽性率為18.60%。陳建飛等分離出國內(nèi)首株丁型冠狀病毒[5]。由此看來，PDCoV確成為引起新生仔豬腹瀉的重要病原之一。鑒于目前尚無控制PDCoV的疫苗，故開發(fā)防控PDCoV所致新生仔豬腹瀉的疫苗迫在眉睫。