尼洛支杰 張 靜 祁俊生 楊 雙 崔建波 張 君

（1.重慶市工程實(shí)驗(yàn)室 重慶 404100；2.重慶三峽學(xué)院 重慶 404100）

延胡索（Corydalis yanhusuo），別名玄胡索、元胡，為罌粟科紫堇屬植物延胡索（Corydalis yanhusuoW.T.Wang）的干燥塊莖，早期載于《本草拾遺》，目前我國(guó)野生延胡索主要在浙江、安徽、江蘇等地，川、渝、滇地區(qū)有引種栽培。延胡索為常用大宗藥材“浙八味”之一[1-2]。延胡索有理氣、治跌打損傷、抗心律失常、鎮(zhèn)痛作用等[3]。隨社會(huì)的發(fā)展，中藥逐步走向國(guó)際化，藥材的種植業(yè)迅速發(fā)展，特別是今年中藥在抗擊疫情中發(fā)揮了很重要的作用。近年來(lái)延胡索地市場(chǎng)需求逐年增加，種植面積擴(kuò)增[4]。周錄英等[5]研究表明施鈣顯著增加花生的莢果和籽仁產(chǎn)量，并提高花生籽仁中脂肪和蛋白質(zhì)的含量。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)單因素4個(gè)實(shí)驗(yàn)梯度，采用盆栽試驗(yàn)，研究就中量元素鈣、鎂、硫等3種養(yǎng)分濃度對(duì)延胡索產(chǎn)量和品質(zhì)的影響。為延胡索種植提供科學(xué)合理的施肥依據(jù)。

一、材料與方法

（一）試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于重慶市萬(wàn)州區(qū)重慶三峽學(xué)院百安新區(qū)延胡索栽培試驗(yàn)基地（東經(jīng)108°27＇06"，北緯30°45＇26"），年均氣溫16.25～24.16℃，年降水量1000～1295 mm，屬于亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候。供試土壤為偏酸性紫色土，其理化性質(zhì)如表1。

表1 供試土壤理化性質(zhì)

（二）試驗(yàn)材料

供試植物：大葉延胡索塊莖（Corydalis yanhusuo）購(gòu)于浙江省東陽(yáng)市農(nóng)業(yè)局，經(jīng)處理后儲(chǔ)存于重慶三峽學(xué)院百安壩校區(qū)科研基地。從塊莖中各選取塊莖大小基本一致的地下塊莖備用。

鹽酸黃連堿（批號(hào)：DST180426-003）、脫氫紫堇堿（批號(hào)：DST200423-025）、原阿片堿（批號(hào)：110853-201003）、鹽酸巴馬?。ㄅ?hào)：DST180725-031）、批號(hào)鹽酸小檗堿（批號(hào)：110713-201212）、延胡索乙素（批號(hào)：DST181108-101）等對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，供含量測(cè)定用）。

（三）試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素4個(gè)水平試驗(yàn)，以農(nóng)田土壤中鈣素、鎂素、硫素養(yǎng)分最適標(biāo)準(zhǔn)的1倍、2倍和4倍分別設(shè)置養(yǎng)分梯度，即分別以0、40、80、160 mg·kg-1CaCl2·2H2O、MgCl2·6H2O、Na2SO4配成水溶液形式施入。每組處理重復(fù)5次，共計(jì)60盆。CK為空白對(duì)照，S1-S3施鈣濃度（分別對(duì)應(yīng)40、80、160 mg·kg-1）；S4-S6為施鎂濃度（分別對(duì)應(yīng)40、80、160 mg·kg-1）；S7-S9為施硫濃度（分別對(duì)應(yīng)40、80、160 mg·kg-1）。

采用盆栽試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)采用高20 cm，內(nèi)徑30 cm的花盆，延胡索栽種前，鈣、鎂、硫肥均以基肥的形式一次性施入，與土壤充分混勻，每盆裝拌有對(duì)應(yīng)土壤10 kg，將消毒處理大小均勻的延胡索塊莖播種于對(duì)應(yīng)花盆中，定期檢查延胡索植株的生長(zhǎng)情況。試驗(yàn)過(guò)程中鈣、鎂、硫濃度不同以外，其余試驗(yàn)條件完全保持一致。播種下去開(kāi)始計(jì)時(shí)，生長(zhǎng)期為205～220 d，生長(zhǎng)期滿收獲延胡索的地下部分（塊莖）。

二、測(cè)定指標(biāo)及方法

（一）產(chǎn)量測(cè)定

在延胡索成熟期采收已處理得延胡索塊莖，去除表面得泥土后，用清水洗凈，至陰涼通風(fēng)處晾干，去除其表皮的水分，稱重。得到單株延胡索得總產(chǎn)量。用總產(chǎn)量減去播種時(shí)的重量，得到延胡索的單株增產(chǎn)量。將已洗凈晾干的延胡索塊莖至烘箱內(nèi)，用45 ℃恒溫烘干得到延胡索的干重。

藥材單株增產(chǎn)量=單株收獲總量-初始播種量

折干率=單株收獲總量的干重/單株收獲總量的鮮重

（二）品質(zhì)測(cè)定

將干燥后得到的延胡索塊莖放置粉碎機(jī)內(nèi)，打成粉末，過(guò)100目篩，得到備用的延胡索粉末。采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)延胡索延胡索乙素、鹽酸小檗堿等生物堿進(jìn)行測(cè)定[6]，計(jì)算單株延胡索生物堿的產(chǎn)量。

單株生物堿產(chǎn)量（mg）=單株收獲總量的干重×生物堿含量

三、數(shù)據(jù)分析

采用EXCEL整理所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，用SPSS22.0軟件對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和顯著分析，用Origin繪圖。

四、結(jié)果與分析

（一）不同施肥處理對(duì)延胡索單株產(chǎn)量的影響

由表3可知，S1、S4、S5施肥對(duì)延胡索的鮮重沒(méi)有明顯的影響，其余的處理延胡索的鮮重顯著下降。鈣、鎂、硫的施肥處理對(duì)延胡索的干重?zé)o影響，當(dāng)鈣、鎂、硫的施肥處理濃度提高時(shí)，延胡索的干重反而下降。S1、S7、S9的施肥處理可提高延胡索的單株折干率，分別是1.08倍、1.02倍、1.04倍，其余處理對(duì)其折干率沒(méi)有影響。

表3 鈣、鎂、硫?qū)ρ雍魉幉牡膯沃戤a(chǎn)量的影響（±s，n=5）

表3 鈣、鎂、硫?qū)ρ雍魉幉牡膯沃戤a(chǎn)量的影響（±s，n=5）

注：同列中沒(méi)有顯著性差異用相同小寫(xiě)字母表示，有顯著性差異用不同小寫(xiě)字母表示（P<0.05），下同。

（二）不同施肥處理對(duì)延胡索藥材中生物堿含量的影響

由表4可知。S1、S4處理時(shí)，延胡索中原阿片堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿等生物堿的含量均有提高，其中S1處理組的延胡索中鹽酸巴馬汀的含量是CK1.18倍。S1、S4處理的延胡索中鹽酸小檗堿的含量分別是CK的5.97倍、3.05倍。延胡索乙素是評(píng)價(jià)延胡索質(zhì)量的重要依據(jù)，S4、S8、S9處理均能提高延胡索中延胡索乙素的堿含量，其中S8、S9有顯著差異，其余沒(méi)有顯著差異。S8、S9處理組的延胡索乙素的含量分別是CK組的3.64倍和3.61倍。根據(jù)綜上所述，選擇較低濃度的鈣、鎂和較高濃度的硫?qū)ρ雍魉幉倪M(jìn)行處理，延胡索產(chǎn)量和品質(zhì)最佳。

表4 鈣、鎂、硫?qū)ρ雍魉幉闹猩飰A含量的影響（mg·g-1，n=5）

（三）鈣、鎂、硫的施量對(duì)延胡索增產(chǎn)量的影響

1.鈣、鎂、硫施量對(duì)延胡索增產(chǎn)量的影響

圖1 施肥處理與單株延胡索增產(chǎn)量的關(guān)系

因素內(nèi)對(duì)鈣、鎂、硫濃度進(jìn)行多重比較，結(jié)果顯示，隨鈣、鎂、硫施量的增加，其延胡索的產(chǎn)量隨之增加，但鈣、鎂、硫濃度分別超S1、S4、S8處理時(shí)不再增加，反而下降。從圖1中可以看出S1處理時(shí)，單株延胡索的增產(chǎn)量最高，較CK處理顯著提高68.69%，達(dá)顯著水平（P＜0.05），往后依次是S4、S5、S8，但與CK比較無(wú)顯著差異。研究確定最佳的鈣、鎂、硫的處理濃度分別為40 mg·kg-1、40 mg·kg-1、80 mg·kg-1，故選擇低濃度鈣、鎂和較高濃度的硫?qū)ρ雍魉幉倪M(jìn)行處理最佳。

五、討論

中量元素在植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生理功能中有著不可替代的作用，如硫參與蛋白質(zhì)合成、生物固氮、糖代謝等。適當(dāng)提高鈣、鎂、硫等中量元素的含量能夠促進(jìn)延胡索藥材中有效成分的合成。陸元等[7]研究發(fā)現(xiàn)施鎂量在125 kg·hm-2施煙草的產(chǎn)量和質(zhì)量較好。選擇較高水平的施硫量能顯著提高甘草的出苗率和成活率[8]。在本研究中鈣、鎂的分別為40 mg·kg-1、40 mg·kg-1施延胡索的產(chǎn)量和生物堿含量最高。硫的濃度為80 mg·kg-1時(shí)延胡索的產(chǎn)量最高，延胡索乙素的含量也最高。故施較低濃度的鈣、鎂和較高濃度硫能顯著提高延胡索的產(chǎn)量和品質(zhì)。本研究可為延胡索藥材種植者提供科學(xué)的施肥依據(jù)。

六、結(jié)束語(yǔ)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明適量施鈣、鎂、硫（S1、S4、S8）均可提高延胡索的產(chǎn)量，其中S1處理組最顯著，與CK處理組比較，單株延胡索產(chǎn)量顯著提高68.69%。適量施鈣、鎂、硫可顯著提高延胡索中生物堿含量。S1處理的延胡索中原阿片堿、鹽酸黃連堿、鹽酸巴馬汀、脫氫紫堇堿的產(chǎn)量較CK處理組提高41.01%、46.20%、57.02%、55.48%。施硫量為S8、S9時(shí)，延胡索產(chǎn)量有所提高，且延胡索乙素的含量最高。其延胡索乙素的含量分別CK的3.64倍、3.61倍。