陳偉國，戎鳳鳴，趙明珠，楊一平，戴建忠，錢秋杰

（1.海寧市經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400； 2.浙江雅云生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司，浙江 海寧 314407）

敵敵畏（Dichlorvos）是一種高效、廣譜有機(jī)磷殺蟲劑，具有熏蒸、觸殺、胃毒作用，對害蟲的擊倒力強(qiáng)，速效性好。施藥后易分解，殘毒期短，特別適合對農(nóng)殘要求嚴(yán)格的作物害蟲的防治。高純度敵敵畏更被廣泛用于桑葉害蟲的防治［1］。在NY/T 1027-2006《桑園用藥技術(shù)規(guī)程》中，77.5%敵敵畏乳油用于防治鱗翅目、鞘翅目、半翅目、雙翅目、纓翅目、同翅目等多種桑樹害蟲，推薦濃度為1000倍稀釋液［2］。

敵敵畏常規(guī)劑型是以苯類為溶劑的乳油，為降低成本、減輕溶劑對環(huán)境的污染，近年來研發(fā)高含量、新劑型敵敵畏產(chǎn)品逐漸受到重視［1，3］，賓榮佩等［4］報(bào)道了90%敵敵畏可溶液劑應(yīng)用于桑樹害蟲的防治效果。目前，江蘇省南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司的90%敵敵畏乳油已取得農(nóng)藥登記［5］，為掌握敵敵畏高含量新產(chǎn)品在桑樹上使用的安全性，測定比較了90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對家蠶的急性食下毒性及其在桑葉上的殘毒期，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試農(nóng)藥

供試農(nóng)藥90%敵敵畏乳油（農(nóng)藥登記證號PD20150856）、對照農(nóng)藥77.5%敵敵畏乳油（農(nóng)藥登記證號PD85105-2），均由江蘇省南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 供試家蠶

供試家蠶品種為“白玉×秋豐”，由浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。飼養(yǎng)至3齡起蠶備用。

1.1.3 供試桑園及桑樹品種

浙江雅云生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司桑園，強(qiáng)桑1號，2年生，中干偏低樹型養(yǎng)成，每667 m2桑園栽植750株。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 兩種敵敵畏乳油對家蠶急性食下毒性試驗(yàn)

經(jīng)預(yù)備試驗(yàn)，將77.5%敵敵畏乳油和90%敵敵畏乳油按質(zhì)量濃度分別稀釋成5個(gè)濃度梯度，供試桑葉浸入不同濃度的稀釋液中1 min，取出后自然晾干，放置于保鮮盒內(nèi)，每個(gè)濃度處理小區(qū)給入20頭3齡起蠶，以清水處理為空白對照，重復(fù)3次，在溫度（26.5±1.0）℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后更換成新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)，直至4齡起蠶，每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率。采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析［6］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 兩種敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期試驗(yàn)

將90%敵敵畏乳油稀釋成500倍、1000倍和1500倍液（敵敵畏質(zhì)量濃度分別為1800 mg/L、900 mg/L、600 mg/L），77.5%敵敵畏乳油稀釋成1000倍液（敵敵畏質(zhì)量濃度為775 mg/L）。將各濃度藥液均勻噴灑于供試桑樹，桑葉正反葉面噴濕為度，處理間設(shè)保護(hù)行隔離。噴藥后每天采摘不同濃度藥液噴灑的桑葉，以新鮮無毒桑葉為對照，每處理小區(qū)30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，飼養(yǎng)至4齡起蠶結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計(jì)算中毒死亡率。

1.2.3 避光冷藏對兩種敵敵畏乳油處理桑葉的殘毒期影響

將1.2.2噴藥處理的桑葉在藥液晾干后連同枝條剪下，用塑料袋封裝后置于5℃的冷庫中冷藏，間隔不同時(shí)間采摘桑葉喂蠶，飼養(yǎng)方法同1.2.2。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種敵敵畏乳油對家蠶3齡起蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定2種濃度敵敵畏乳油對3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的致死中濃度（LC50）分別為90%敵敵畏乳油17.6212 mg/L和77.5%敵敵畏乳油16.1004 mg/L（表1），兩者對家蠶的急性食下毒性差異很小。參照2014年發(fā)布的GB/T 31270.11-2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對家蠶的毒性等級劃分”［7］，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對家的毒性等級均為高毒（0.5＜LC50≤20 mg/L）。

表1 90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對3齡起蠶的急性食下毒性Table 1 Acute Ingestion Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.5%Dichlorvos EC to Newly Exuviated Silkworms of 3rd Instar

2.2 兩種敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期

由表2可見，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油稀釋液噴于桑葉后2 h采葉飼喂3齡起蠶，中毒死亡率均達(dá)到100%；噴藥后1 d采葉喂蠶，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率為41.11%，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍液均無中毒和死亡，對照農(nóng)藥77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率為40.00%；噴藥后2 d采葉喂蠶，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率下降到5.56%，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍液均無中毒和死亡，對照農(nóng)藥77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率為10.00%；噴藥后3 d～5 d，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油各濃度藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶均無中毒和死亡。試驗(yàn)結(jié)果表明：90%敵敵畏乳油500倍與77.5%敵敵畏乳油1000倍的殘毒期相似，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍的殘毒期短于77.5%敵敵畏乳油1000倍。

表2 90%敵敵畏乳油和77.50%敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期測定結(jié)果Table 2 Residual Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.50%Dichlorvos EC on Mulberry Leaves

2.3 兩種敵敵畏乳油處理桑葉在避光冷藏條件下的殘毒期

由表3可見，90%敵敵畏乳油500倍、1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液處理的桑葉在5℃環(huán)境中避光冷藏，間隔1 d、2 d、3 d后飼喂3齡起蠶，死亡率均為100%；間隔4 d后，90%敵敵畏乳油1500倍液的死亡率下降到87.78%，其余處理的死亡率均為100%；間隔5 d后，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率100%，90%敵敵畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率分別下降到75.56%、18.89%和35.56%；間隔8 d后，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率仍達(dá)100%，90%敵敵畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率則下降到5.56%、3.33%和1.11%。

表3 兩種敵敵畏乳油處理桑葉在避光冷藏下的殘毒期測定結(jié)果Table 3 Residual Toxicity Period of Mulberry Leaves Preserved Low Temperature and Dark Condition after Treated with the Two Kinds of Dichlorvos EC

對比表2和表3可見，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油稀釋液處理的桑葉，在田間生長條件下的毒性降解很快，但在避光冷藏條件下的毒性降解很慢。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，90%敵敵畏乳油對家蠶3齡起蠶的急性食下毒性（LC50）為17.6212 mg/L，略低于77.5%敵敵畏乳油的16.1004 mg/L，但差異很小，均屬于高毒級；兩種敵敵畏乳油在桑葉上的毒性殘留都很短，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍稀釋液噴藥后1 d的桑葉、90%敵敵畏乳油500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍稀釋液噴藥后3 d的桑葉，飼喂3齡起蠶無中毒癥狀和死亡蠶；但兩種敵敵畏乳油稀釋液處理桑葉在避光冷藏條件下，殘毒期比田間環(huán)境中的農(nóng)藥處理桑葉大大延長，說明光照和溫度會(huì)顯著影響敵敵畏的降解。

幾十年來，敵敵畏是最常用農(nóng)藥之一［8］，目前登記在桑樹上使用的有50個(gè)敵敵畏乳油制劑產(chǎn)品，其中77.5%（80%）的有39個(gè)，48.0%（50%）的有11個(gè)［5］。需要說明的是至今敵敵畏乳油含量規(guī)格標(biāo)注值尚未完全統(tǒng)一，是因?yàn)閿硵澄啡橛偷纳a(chǎn)工藝和有效成分含量檢測技術(shù)發(fā)生變化所致。敵敵畏乳油最初采用敵百蟲堿解法的生產(chǎn)工藝，在原中華人民共和國化學(xué)工業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)HG 2-297-65《敵敵畏乳油》中，敵敵畏有效成分含量應(yīng)用堿解分析法檢測；1981年制訂的中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2548-81《敵敵畏乳油》取代了原化工部標(biāo)準(zhǔn)HG 2-297-65，應(yīng)用敵百蟲堿解法生產(chǎn)的敵敵畏乳油僅1種80%的規(guī)格，在技術(shù)指標(biāo)要求中使用堿解法測定敵敵畏含量應(yīng)≥80.0%，以氣相色譜法為仲裁法，測得的敵敵畏含量應(yīng)≥77.5%；上世紀(jì)九十年代逐漸開始應(yīng)用產(chǎn)品質(zhì)量更高、生產(chǎn)成本更低的亞磷酸三甲酯法工藝路線直接合成敵敵畏，堿解分析法已不適用于敵敵畏含量檢測，且隨著氣相色譜測定方法的普及，在第一次修訂的國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2548-1993《敵敵畏乳油》中規(guī)定，敵百蟲堿解法和亞磷酸三甲酯法兩種工藝路線生產(chǎn)的敵敵畏含量測定采用氣相色譜法，盡管取消了堿解分析法，但仍然沿用了兩種檢測法的數(shù)據(jù)，在技術(shù)指標(biāo)要求中80%敵敵畏乳油的敵敵畏含量≥77.5%，另外還新增了50%敵敵畏乳油的規(guī)格（敵敵畏含量≥48.0%），這種規(guī)格和含量不一致現(xiàn)象困擾了推廣使用；因此，在第二次修訂的國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2548-2008《敵敵畏乳油》中將規(guī)格由80%和50%分別改為77.5%和48.0%，從而使規(guī)格和含量實(shí)現(xiàn)了統(tǒng)一［9～11］。

90%敵敵畏乳油相比于77.5%敵敵畏乳油，有效成分含量增加，相應(yīng)減少了輔劑用量，感觀上農(nóng)藥的刺鼻臭味也有所減輕，符合農(nóng)藥產(chǎn)品更加環(huán)保的發(fā)展趨勢。

雖然本試驗(yàn)結(jié)果和賓榮佩等［4］報(bào)道的2種90%敵敵畏制劑在桑葉上的殘毒期均很短，但目前取得正式登記證號的3個(gè)90%敵敵畏制劑（1個(gè)乳油、2個(gè)可溶液劑），僅登記在水稻、十字花科蔬菜和觀賞菊花等作物上使用。因此，在桑園害蟲防治時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎推薦未登記在桑樹上使用的產(chǎn)品，如生產(chǎn)上無其他替代藥劑或需要緊急防治的，應(yīng)當(dāng)與生產(chǎn)廠家簽訂質(zhì)量保證協(xié)議并向農(nóng)業(yè)主管部門報(bào)備，以規(guī)避技術(shù)推廣部門和使用者的風(fēng)險(xiǎn)。