齊景文，吳 靖，依穎新，楊蘊力，吳佳寧，曾慶南，宋如斌，李 祺

（沈陽市動植物及產(chǎn)品檢驗監(jiān)測中心，遼寧沈陽110031）

高致病性禽流感是由A型流感病毒引起的雞的急性、熱性、高度接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織定為A類傳染病，被我國定為一類傳染病。自1996年我國首次發(fā)現(xiàn)高致病性禽流感以來，H5亞型禽流感病毒傳播和流行區(qū)域逐漸擴大。隨著病毒不斷變異升級，疫情趨于復雜化，嚴重影響我國禽業(yè)養(yǎng)殖及畜產(chǎn)品安全。H5N6亞型禽流感病毒是H5N1和H6N6禽流感病毒重配整合形成的流感病毒，對水禽有較高致病力。2013年之前，家禽感染的禽流感病毒類型多以H5N1禽流感病毒為主，2013年出現(xiàn)家禽感染H5N6亞型禽流感，2014年發(fā)現(xiàn)首例人感染H5N6亞型禽流感病例[1-2]。

2021年4月8日，沈陽市動植物及產(chǎn)品檢驗監(jiān)測中心（簡稱中心）接到和平區(qū)市場監(jiān)管事務服務與行政執(zhí)法中心報告，在和平區(qū)長白街河堤西路的長白島森林公園有10只黑天鵝、1只大雁死亡。中心組織專家組前去調(diào)查處置和現(xiàn)場采樣。4月9日，經(jīng)市級和省級動物實驗室檢測，診斷病癥疑似H5亞型高致病性禽流感。4月10日，經(jīng)國家禽流感參考實驗室病毒分離鑒定，確定病癥為H5N6亞型高致病性禽流感。緊急流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，此次禽流感病毒很可能由遷徙候鳥引入，公園鳥類未及時開展免疫，鳥類體內(nèi)抗體水平低是疫情暴發(fā)的內(nèi)源因素。

1 流行病學調(diào)查

1.1 地理位置勘查

長白島森林公園位于渾河南堤（東經(jīng)：123°22′45.31″，北緯：41°44′48.73″），占地面積10 000 m2。疫點位置衛(wèi)星圖見圖1。由圖1可知，公園緊鄰渾河，渾河水面寬闊、兩岸植被豐富，森林覆蓋度80%，是遷徙野鳥的落腳點，也是過冬野鳥棲居地。公園屬于景區(qū)，游客較多，周圍8 km范圍內(nèi)沒有家禽養(yǎng)殖場和活禽交易市場，近1年內(nèi)未從外地引入活禽。

1.2 動物養(yǎng)殖情況

森林公園內(nèi)養(yǎng)殖觀賞鳥類8種，共280只，其中，黑天鵝117只、白天鵝7只、赤麻鴨29只、珍珠雞9只、孔雀15只、鴕鳥10只等。除禽類外，還有羊駝4只、駝羊2只、鹿12只、駱駝4只、矮馬6只、牦牛2只、羊15只、猴子25只等。今年未進行禽流感免疫。

2 發(fā)病經(jīng)過

4月6日，個別黑天鵝出現(xiàn)打蔫現(xiàn)象，當天有3只黑天鵝死亡，7日有2只黑天鵝死亡。截至目前，共死亡黑天鵝10只、大雁1只。

3 臨床剖檢結果

共剖檢黑天鵝2只，黑天鵝肝臟、胰臟剖檢情況見圖2、圖3。由圖2可知，剖檢可見黑天鵝肝臟病變明顯，肝臟腫大、兩側大小不一致、表面呈黃白色、內(nèi)部有纖維化病變。由圖3可知，黑天鵝氣管充血、胰臟表面有壞死灶、直腸大面積出血。其他器官未見明顯變化。

4 實驗室檢測結果

4.1 樣品采集

采集死亡黑天鵝組織臟器（心、腦、肺、脾）2份及其生活環(huán)境樣品（糞便、土壤、飼料、飲水）15份。病毒采樣管冷藏保存，2 h內(nèi)送至沈陽市動植物及產(chǎn)品檢驗監(jiān)測中心實驗室。

4.2 實驗室檢測

采用熒光定量PCR方法進行禽流感通用型及H5亞型、H7亞型、H9亞型病毒核酸檢測[3]。采用kingfisher核酸自動提取儀和ABI7500實時熒光定量PCR儀檢測。核酸檢測試劑盒購自鄭州中道生物技術有限公司，反應體系及參數(shù)參照試劑盒說明設置。

4.3 禽流感核酸檢測統(tǒng)計（見表1）

禽流感通用型核酸檢測陽性4份，其中組織2份，糞便2份。經(jīng)分型檢測，H5亞型流感核酸檢測陽性3份，組織1份、糞便2份；H7、H9亞型流感核酸檢測均為陰性。高度疑似禽流感H5亞型禽流感。

4.4 病例確診

經(jīng)國家禽流感參考實驗室進行病毒分離鑒定，最終確定為H5N6亞型高致病性禽流感疫情。

5 疫源分析

每年春秋兩季，有大批候鳥進行有規(guī)律的遷徙，往返于繁殖區(qū)和越冬區(qū)，候鳥會在途經(jīng)地選擇水源充足，植被覆蓋度較高的地點采食休息，留下糞便。長白島森林公園所處的渾河南堤是俄羅斯西伯利亞遷徙野鳥的落腳點，也是過冬野鳥的棲居地。野鳥體內(nèi)常攜帶禽流感病毒，推測本次疫情由遷徙野鳥帶毒傳入的可能性最大。近幾年暴發(fā)多起家禽及野生鳥類高致病性禽流感疫情。這些地區(qū)多數(shù)位于候鳥遷徙路線上，且H5N6亞型禽流感病毒更易感染野生水禽，由野生水禽攜帶跨區(qū)域傳播[4-5]。

比對疫情發(fā)生時間與空間，本次H5N6亞型禽流感疫情出現(xiàn)在春季，與野生鳥類遷徙時間一致；疫點處于候鳥遷徙路線上，空間上一致[6]。此外，疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)周邊3 km范圍內(nèi)，家禽養(yǎng)殖量極少，沒有活禽交易市場。因此，家禽感染風險低，疫情擴散風險極低，說明本次疫情的發(fā)生應該與野生鳥類遷徙密切相關。

6 疫情處置

劃定長白島森林公園為疫點，疫點向外周圍3 km范圍內(nèi)劃為疫區(qū)，以疫區(qū)邊緣向外延伸5 km為受威脅區(qū)。

按照《高致病性禽流感疫情應急實施方案》（2020年版）,在4月12日啟動Ⅳ級疫情響應，對公園內(nèi)飼養(yǎng)的所有禽類進行撲殺無害化處理，頒布封鎖令。疫情封鎖期間疫點、疫區(qū)內(nèi)的觀鳥通道禁止任何人員、車輛進出；設置多處消毒點和警示標識，對進出人員、車輛、物品等嚴格消毒，禁止載有畜禽等易感動物的車輛進出；在疫區(qū)、受威脅區(qū)禁止交易禽類及相關產(chǎn)品；繼續(xù)加強疫點管制和消毒工作；加強對疫區(qū)和受威脅區(qū)內(nèi)野生禽類巡查，發(fā)現(xiàn)異常立即按照國家規(guī)定進行上報及處置；依法做好疫區(qū)封鎖、隔離、管控等工作，依法維護景區(qū)管理制度及秩序。

7 結論

本次疫情是沈陽市首起黑天鵝H5N6亞型高致病性禽流感疫情。疫情發(fā)生后，沈陽市政府及相關機構迅速采取封鎖、消毒、撲殺、緊急免疫等應急處置措施，使疫情得到有效控制，避免疫情擴散。結合現(xiàn)場勘察排查和風險評估，推測這次疫情由攜帶病毒的遷徙野鳥傳入。本次疫情警示，在野鳥遷徙季節(jié)，要切實加強禽流感監(jiān)測和強制免疫工作，高度重視動物園及其附近場所珍稀禽類的免疫，以降低疫情發(fā)生風險。