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        miR-4286靶向FOXO4對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲及凋亡的影響①

        2021-05-27 11:06:18厲永強(qiáng)石貞玉河南大學(xué)淮河醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科開封475000
        中國(guó)免疫學(xué)雜志 2021年8期
        關(guān)鍵詞:肺癌檢測(cè)

        趙 敏 厲永強(qiáng) 石貞玉(河南大學(xué)淮河醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科,開封 475000)

        肺癌是惡性腫瘤中發(fā)病率和死亡率增長(zhǎng)最快的疾病之一,更是全球癌癥相關(guān)死亡的最主要原因,對(duì)人類的健康和生命構(gòu)成嚴(yán)重威脅[1]。由于肺癌起病隱匿,確診時(shí)多為中晚期,且手術(shù)、放化療后易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,縮短了患者的生存期。因此,尋找有效的診療靶點(diǎn)抑制肺癌的轉(zhuǎn)移是目前肺癌治療的重大課題。微小RNA(microRNA,miRNA)是長(zhǎng)度為20~25個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼小RNA,其通過(guò)與靶基因的3′非翻譯區(qū)(untranslated region,UTR)結(jié)合調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活、增殖、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移[2]。大量研究證實(shí),在包括肺癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤中,miRNA發(fā)揮抑癌基因或致癌基因作用[3-4]。miR-4286位于人染色體8p23.1位點(diǎn),已經(jīng)證實(shí)可參與調(diào)節(jié)黑色素瘤、食管鱗癌和胰腺癌進(jìn)程[5-7]。在肺癌細(xì)胞中,miR-4286呈高表達(dá),其高表達(dá)與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)[8]。然而,miR-4286在肺癌進(jìn)展中的作用機(jī)制并未完全闡明。生物信息學(xué)分析顯示叉頭樣轉(zhuǎn)錄因子O4(forkhead box O4,F(xiàn)OXO4)可能是miR-4286的靶基因,作為一種轉(zhuǎn)錄抑制因子,研究顯示肺癌中FOXO4表達(dá)顯著降低,抑制其表達(dá)可促進(jìn)肺癌轉(zhuǎn)移[9-10]。但miR-4286能否靶向FOXO4參與肺癌進(jìn)展尚未明確。本研究旨在揭示miR-4286和FOXO4在肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和凋亡中的作用,為miR-4286在肺癌臨床生物治療中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

        1 資料與方法

        1.1 資料

        1.1.1 組織來(lái)源 選擇我院收治的肺癌患者29例,其中男性17例,女性12例;年齡40~75歲。分別取其肺癌組織及與其對(duì)應(yīng)的癌旁組織,手術(shù)切除后立即放入液氮中保存,隨后放入-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩K胁±g(shù)前均未接受化療或放療。所有患者均簽署知情同意書,且經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

        1.1.2 細(xì)胞株和主要試劑 肺癌細(xì)胞A549購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞研究所;DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清購(gòu)于美國(guó)Hyclone公司;逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR Pre?mix Ex TaqⅡ試劑盒購(gòu)于大連寶生物工程有限公司;miRNA抑制物陰性對(duì)照(anti-miR-NC)、miR-4286抑制物(anti-miR-4286)、小干擾RNA陰性對(duì)照(si-NC)、FOXO4小干擾RNA(si-FOXO4)購(gòu)于上海生工生物工程有限公司;細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(cell counting kit 8,CCK-8)、膜聯(lián)蛋白V異硫氰光素?zé)晒馑?碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)于杭州貝博生物公司;Transwell小室和基質(zhì)膠購(gòu)于美國(guó)Cornning公司;兔源FOXO4、P21、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)、上皮細(xì)胞鈣黏蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix me?talloproteinase 2,MMP-2)和磷酸甘油醛脫氫酶(glyc?eraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)抗體購(gòu)于美國(guó)Abcam公司;山羊抗兔二抗購(gòu)于北京中山金橋生物科技有限公司。實(shí)驗(yàn)引物由上海生工生物工程有限公司提供。FOXO4上游引物5′-CCGGCAAAAGCTCTTGGTG-3′,下 游 引 物5′-GGTCCACATATCGGCTTCTTCA-3′;GAPDH上游引物5′-TG?GTGAAGACGCCAGTGGA-3′,下游引物5′-GCACC?GTCAAGGCTGAGAAC-3′;miR-4286上游引物5′-ACACTCCAGCTGGGACCCCACTCCT-3′,下游引物5′-TACCAGGAGTGGGGTTT-3′;U6上 游 引 物5′-CTCGCTTCGGCAGCACA-3′,下游引物5′-AAGGCTTCACGAATTTGCGT-3′。

        1.2 方法

        1.2.1 RT-qPCR檢 測(cè)miR-4286和FOXO4 mRNA的表達(dá)Trizol法檢測(cè)肺癌組織、癌旁組織中總RNA,將提取的總RNA溶解于RNase-free水,紫外分光光度計(jì)檢測(cè)RNA濃度和純度。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書將RNA逆轉(zhuǎn)為cDNA后,按照SYBR Pre?mix Ex TaqⅡ試劑盒說(shuō)明書對(duì)miR-4286和FOXO4進(jìn)行PCR擴(kuò)增。miR-4286的檢測(cè)以U6為內(nèi)參,F(xiàn)OXO4 mRNA的檢測(cè)以GAPDH為內(nèi)參。2-ΔΔCt法計(jì)算miR-4286和FOXO4 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。

        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)分組 將A549細(xì)胞分為anti-miR-NC組(轉(zhuǎn)染anti-miR-NC)和anti-miR-4286組(轉(zhuǎn)染anti-miR-4286)。采用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)肺癌A549細(xì)胞。轉(zhuǎn)染前1 d,將A549細(xì)胞以2×105個(gè)/孔的密度接種于6孔板,按照脂質(zhì)體LipofectamineTM2000說(shuō)明書將anti-miR-NC、anti-miR-4286分別轉(zhuǎn)染至A549細(xì)胞,轉(zhuǎn)染48 h,檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果合格后進(jìn)行其他指標(biāo)檢測(cè)。為證實(shí)miR-4286是通過(guò)調(diào)控FOXO4進(jìn)而影響A549細(xì)胞的增殖、遷移侵襲能力和凋亡,將A549細(xì)胞分為anti-miR-4286+si-NC組(共轉(zhuǎn)染anti-miR-4286和si-NC)和anti-miR-4286+si-FOXO4組(共轉(zhuǎn)染anti-miR-4286和si-FOXO4),轉(zhuǎn)染48 h檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果合格后檢測(cè)細(xì)胞的增殖、遷移侵襲能力及凋亡變化。

        1.2.3 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞存活 將1×104個(gè)A549細(xì)胞接種于96孔板,根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,培養(yǎng)箱孵育48 h,向各孔內(nèi)加入10μl CCK-8試劑,繼續(xù)孵育2 h,酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm處各孔的吸光度值,計(jì)算細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率=(實(shí)驗(yàn)組OD-空白組OD)/(對(duì)照組OD-空白組OD)。

        1.2.4 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆形成能力 收集轉(zhuǎn)染48 h的anti-miR-NC組、anti-miR-4286組、an?ti-miR-4286+si-NC組 和anti-miR-4286+si-FOXO4組A549細(xì)胞,胰酶消化后,取2×103個(gè)細(xì)胞均勻分散鋪于6孔板,細(xì)胞培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng)7 d,當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的集落時(shí),棄去培養(yǎng)基,PBS緩沖液洗滌細(xì)胞1次,依次加入多聚甲醛和結(jié)晶紫染液進(jìn)行固定和染色,PBS緩沖液沖洗3次,常溫晾干后,顯微鏡下統(tǒng)計(jì)大于50個(gè)細(xì)胞的集落數(shù)。

        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡 收集轉(zhuǎn)染48 h的anti-miR-NC組、anti-miR-4286組、anti-miR-4286+si-NC組和anti-miR-4286+si-FOXO4組A549細(xì)胞,胰酶消化后,PBS洗滌細(xì)胞2次,離心后加入適量結(jié)合緩沖液制備細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/ml的單細(xì)胞懸液。取100μl細(xì)胞懸液加入流式管,按照Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡試劑盒分別加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI,避光孵育15 min,補(bǔ)加結(jié)合緩沖液至500μl,混勻后1 h上機(jī)檢測(cè)各組A549細(xì)胞凋亡情況。

        1.2.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲 侵襲實(shí)驗(yàn):將基質(zhì)膠均勻平鋪于Transwell小室上室膜,備用。細(xì)胞轉(zhuǎn)染48 h消化后,采用無(wú)血清培養(yǎng)基制備單細(xì)胞懸液。取200μl接種于Transwell上室,24孔板下室僅加入500μl含20%胎牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)基,將含有Transwell小室的24孔板置于培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng)24 h,取出Transwell小室,輕輕擦去上室膜未過(guò)膜細(xì)胞后,依次采用多聚甲醛、結(jié)晶紫進(jìn)行固定和染色,將Transwell小室倒置于顯微鏡下觀察細(xì)胞過(guò)膜情況,隨機(jī)選取5個(gè)視野進(jìn)行計(jì)數(shù)和拍照,以其均值表示侵襲細(xì)胞數(shù)目。遷移實(shí)驗(yàn)采用未包被基質(zhì)膠的Transwell小室,其他步驟同上。

        1.2.7 Western blot檢測(cè)FOXO4、P21、Caspase-3、Ecadherin和MMP-2蛋白的表達(dá) 采用RIPA分別提取anti-miR-NC組、anti-miR-4286組、anti-miR-4286+si-NC組 和anti-miR-4286+si-FOXO4組A549細(xì) 胞 的總蛋白,BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度。沸水浴3 min變性細(xì)胞蛋白,配制濃縮膠和分離膠,以每泳道30μg蛋白樣品上樣,隨后進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳。結(jié)束后,常規(guī)濕法將分離細(xì)胞蛋白轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜。將膜置于5%的牛血清蛋白溶液中室溫條件封閉1 h,洗膜后,將膜置于稀釋的一抗溶液室溫孵育2 h,洗膜,將膜置于稀釋的二抗溶液中室溫孵育1 h,洗膜后,于暗室進(jìn)行化學(xué)發(fā)光盒顯色。以GAPDH為內(nèi)參,采用Image J分析軟件分析各條帶的灰度值,以目的蛋白灰度值和GAPDH灰度值的比值表示目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。

        1.2.8 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-4286和FOXO4的靶向關(guān)系 采用TargetScan在線分析軟件預(yù)測(cè)miR-4286的靶基因,發(fā)現(xiàn)FOXO4是miR-4286的潛在功能性靶基因之一,推測(cè)miR-4286能靶向調(diào)控FOXO4表達(dá),并進(jìn)行雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證。構(gòu)建含有FOXO4-3′UTR序列的野生型熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒(WT-FOXO4)及含有FOXO4-3′-UTR突變序列的突變型熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒(MUT-FOXO4),質(zhì)粒構(gòu)建由上海吉瑪公司完成。將A549細(xì)胞接種至6孔板,利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑LipofectamineTM2000將WT-FOXO4、MUT-FOXO4分別與miR-NC、miR-4286 mimics共轉(zhuǎn)染至A549細(xì)胞,6 h后更換為完全細(xì)胞培養(yǎng)液,培養(yǎng)48 h后檢測(cè)各組細(xì)胞熒光素酶活性變化。為驗(yàn)證miR-4286對(duì)FOXO4的調(diào)控作用,以miR-NC、miR-4286 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-4286分別轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,轉(zhuǎn)染48 h裂解細(xì)胞按照Western blot步驟檢測(cè)FOXO4蛋白的表達(dá)變化。

        2 結(jié)果

        2.1 miR-4286、FOXO4在肺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)RT-qPCR檢測(cè)肺癌組織和癌旁組織中miR-4286和FOXO4 mRNA的表達(dá),結(jié)果顯示,肺癌組織中miR-4286的表達(dá)較癌旁組織顯著升高,F(xiàn)OXO4 mRNA的表達(dá)較癌旁組織顯著降低(P<0.05)。見表1。

        表1 miR-4286、FOXO4在肺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)(±s)Tab.1 Expressions of miR-4286 and FOXO4 in lung can-cer and paracancerous tissues(±s)

        表1 miR-4286、FOXO4在肺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)(±s)Tab.1 Expressions of miR-4286 and FOXO4 in lung can-cer and paracancerous tissues(±s)

        Note:1)P<0.05,compared with paracancerous tissue group.

        FOXO4 mRNA 1.01±0.10 0.22±0.021)41.717<0.001 Groups Paracancerous tissue Lung cancer tissue n 29 29 t P miR-4286 0.99±0.10 2.35±0.211)31.488<0.001

        2.2 抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響見圖1,轉(zhuǎn)染anti-miR-4286抑制miR-4286表達(dá)后,A549細(xì)胞中P21和Caspase-3蛋白表達(dá)顯著升高,細(xì)胞存活率從(100.12±10.06)%降為(47.95±4.68)%,克隆形成數(shù)從162±15.31降為76±7.15,細(xì)胞凋亡率從(7.65±0.83)%升高為(23.21±2.26)%(P<0.05)。

        圖1 抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響Fig.1 Effect of inhibiting miR-4286 on proliferation and apoptosis of lung cancer cells

        2.3 抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞遷移、侵襲的影響 見圖2,轉(zhuǎn)染anti-miR-4286抑制miR-4286表達(dá)后,A549細(xì)胞E-cadherin蛋白表達(dá)顯著增加,MMP-2蛋白的表達(dá)顯著降低,遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)顯著降低(P<0.05)。

        圖2 抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞遷移、侵襲及E-cadherin、MMP-2蛋白表達(dá)的影響Fig.2 Effect of inhibiting miR-4286 on lung cancer cell migration,invasion,and expression of E-cadherin and MMP-2 proteins

        2.4 miR-4286靶向、調(diào)控FOXO4表達(dá)TargetScan預(yù)測(cè)miR-4286的靶基因結(jié)果顯示,miR-4286和FOXO4的3′-UTR區(qū)域存在部分連續(xù)互補(bǔ)的核苷酸序列,見圖3A。雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-4286和FOXO4的靶向關(guān)系發(fā)現(xiàn),上調(diào)miR-4286表達(dá)可降低轉(zhuǎn)染W(wǎng)T-FOXO4的A549細(xì)胞的熒光素酶活性(P<0.05);而上調(diào)miR-4286表達(dá)對(duì)轉(zhuǎn)染MUTFOXO4的A549細(xì)胞的熒光素酶活性無(wú)顯著影響(圖3B),Western blot結(jié)果顯示上調(diào)miR-4286表達(dá)后A549細(xì)胞FOXO4在mRNA和蛋白水平的表達(dá)顯著降低;抑制miR-4286表達(dá)后A549細(xì)胞FOXO4蛋白的表達(dá)水平顯著升高(P<0.05),見圖3C。

        圖3 miR-4286靶向調(diào)控FOXO4Fig.3 miR-4286 targets regulated FOXO4

        2.5 抑制FOXO4能逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、凋亡的作用 見圖4,與anti-miR-4286和si-NC共轉(zhuǎn)染組比較,anti-miR-4286和si-FOXO4共轉(zhuǎn)染組A549細(xì)胞FOXO4、P21和Caspase-3蛋白表達(dá)顯著降低,細(xì)胞存活率從(48.23±4.61)%升高為(86.91±8.58)%,克隆形成數(shù)從77±7.15升高為137±12.94,細(xì)胞凋亡率從(23.11±2.18)%降為(11.34±1.26)%(P<0.05)。抑制FOXO4表達(dá)可逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。

        圖4 抑制FOXO4能逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響Fig.4 Inhibiting FOXO4 can reverse effects of inhibition of miR-4286 on lung cancer cell proliferation and apoptosis

        2.6 抑制FOXO4能逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞遷移、侵襲的作用 見圖5,與anti-miR-4286和si-NC共轉(zhuǎn)染組比較,anti-miR-4286和si-FOXO4共轉(zhuǎn)染組A549細(xì)胞E-cadherin蛋白表達(dá)顯著降低,MMP-2蛋白表達(dá)顯著升高,遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)顯著增加(P<0.05)。提示抑制FOXO4表達(dá)可逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。

        圖5 抑制FOXO4能逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286肺癌細(xì)胞遷移、侵襲及E-cadherin、MMP-2蛋白表達(dá)的影響Fig.5 Inhibiting FOXO4 can reverse effects of inhibiting miR-4286 on lung cancer cell migration,invasion,and E-cadherin,MMP-2 protein expression

        3 討論

        腫瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟、多基因參與,并受精確調(diào)控的過(guò)程。闡明肺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,尋找有效抑制肺癌轉(zhuǎn)移的靶基因?qū)Ψ伟┗颊叩木珳?zhǔn)治療意義重大。

        miR-4286已被證實(shí)是腫瘤進(jìn)展的重要參與者。KOMINA等[5]研究發(fā)現(xiàn)黑色素瘤中miR-4286表達(dá)顯著增加,轉(zhuǎn)染miR-4286抑制劑后黑色素瘤細(xì)胞凋亡率增加2.6倍,細(xì)胞增殖活力下降1.7倍。LI等[11]指出miR-4286在前列腺癌中呈高表達(dá),下調(diào)miR-4286可抑制前列腺癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。ZHANG等[6]研究表明,miR-4286高表達(dá)通過(guò)激活蛋白酪氨酸激酶2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與激活子3(JAK2/STAT3)信號(hào)通路顯著增加細(xì)胞活力以及遷移、侵襲能力,促進(jìn)食管癌發(fā)生發(fā)展。本研究顯示,肺癌組織中miR-4286表達(dá)顯著升高,抑制miR-4286可促進(jìn)A549細(xì)胞P21和Caspase-3蛋白表達(dá),降低細(xì)胞增殖、遷移侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。黏附和侵襲在腫瘤轉(zhuǎn)移中起重要作用,E-cadherin是一種典型的鈣黏蛋白,其下調(diào)導(dǎo)致上皮細(xì)胞特征的喪失和間充質(zhì)表型的獲得,從而促進(jìn)細(xì)胞增殖、運(yùn)動(dòng)和侵襲,并可能導(dǎo)致癌癥進(jìn)展[12]。MMP-2是破壞是腫瘤侵襲屏障的關(guān)鍵蛋白酶,其表達(dá)增加與腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能增加有關(guān)[13]。因此,抑制miR-4286可能通過(guò)抑制A549細(xì)胞MMP-2表達(dá),促進(jìn)E-cadherin表達(dá),進(jìn)而發(fā)揮抗肺癌轉(zhuǎn)移作用。既往研究顯示,miR-4286過(guò)表達(dá)在肺癌細(xì)胞中具有腫瘤啟動(dòng)子作用,抑制miR-4286表達(dá)除可抑制細(xì)胞活力、增殖和遷移以及促進(jìn)細(xì)胞凋亡外,還可誘導(dǎo)細(xì)胞周期G1期阻滯,與本研究類似[14-15]。以上研究表明,miR-4286在肺癌中發(fā)揮癌基因作用,抑制miR-4286可有效抑制肺癌進(jìn)展。

        FOX轉(zhuǎn)錄因子是一個(gè)大的進(jìn)化保守的轉(zhuǎn)錄調(diào)控家族,具有高度保守的雙翼螺旋DNA結(jié)合域。研究顯示FOXO4具有誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯、凋亡和DNA損傷修復(fù)的功能,是人類腫瘤的理想抑癌因子[16]。FOXO4表達(dá)缺失是膀胱癌預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素[17]。在結(jié)腸癌和胃癌中上調(diào)FOXO4可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移[18-19]。在肺癌中FOXO4表達(dá)缺失是上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化發(fā)生的重要原因之一,miR-150通過(guò)靶向FOXO4促肺癌轉(zhuǎn)移[20]。本研究顯示肺癌組織中FOXO4表達(dá)顯著降低,與miR-4286的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)顯示,F(xiàn)OXO4是miR-4286的功能性靶基因。外源性miR-4286模擬物或抑制物轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞可分別抑制或促進(jìn)FOXO4蛋白表達(dá)。進(jìn)一步研究顯示抑制FOXO4表達(dá)可逆轉(zhuǎn)抑制miR-4286對(duì)A549細(xì)胞增殖、遷移侵襲及凋亡的影響。提示miR-4286/FOXO4分子軸參與肺癌發(fā)生發(fā)展。

        綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)miR-4286/FOXO4分子軸在肺癌中表達(dá)失調(diào)。抑制miR-4286通過(guò)上調(diào)FOXO4抑制肺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。因此,靶向抑制miR-4286可能是轉(zhuǎn)移性肺癌的潛在治療策略。

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