亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        經(jīng)典名方當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性研究

        2021-05-27 03:38:02苗家燕高曉燕張志強(qiáng)蔣宇航劉雨涵關(guān)雅戈韓妮娜喬延江
        分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2021年5期
        關(guān)鍵詞:藁本脂素凍干粉

        苗家燕,羅 贛,高曉燕,張志強(qiáng),蔣宇航, 韓 晨,劉雨涵,關(guān)雅戈,韓妮娜,喬延江

        (1.北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥學(xué)院,北京 100029;2.北京康仁堂藥業(yè)有限公司,北京 101301)

        《人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求 國(guó)際協(xié)調(diào)委員會(huì)藥物研發(fā)指導(dǎo)原則》[1]中提出,關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQAs)是用以保證產(chǎn)品質(zhì)量的物理、化學(xué)、生物或微生物性質(zhì)或特征,這些性質(zhì)或特征應(yīng)有適當(dāng)?shù)南薅取⒎秶蚍植?。?jīng)典名方的CQAs在上述基礎(chǔ)上融合了中醫(yī)藥元素,是傳承中醫(yī)理論的重要介質(zhì)。從傳統(tǒng)湯劑到物質(zhì)基準(zhǔn)再到復(fù)方制劑,CQAs貫穿于經(jīng)典名方研究的整個(gè)過(guò)程。在安全有效的前提下,經(jīng)典名方復(fù)方制劑還應(yīng)與其物質(zhì)基準(zhǔn)的CQAs保持一致。

        當(dāng)歸四逆湯(DSD)出自東漢張仲景的《傷寒論》[2],收錄于《古代經(jīng)典名方目錄(第一批)》[3]。全方由當(dāng)歸、桂枝、白芍、細(xì)辛、木通、甘草和大棗7味藥組成,方中當(dāng)歸甘溫,養(yǎng)血和血以補(bǔ)虛,桂枝辛溫,溫經(jīng)散寒以通脈,細(xì)辛溫經(jīng)散寒,助桂枝溫通血脈,白芍養(yǎng)血和營(yíng),助當(dāng)歸補(bǔ)益營(yíng)血,木通通利經(jīng)脈以暢血行,大棗、甘草益氣健脾,養(yǎng)血補(bǔ)虛,重用大棗,既合歸、芍以補(bǔ)營(yíng)血,又防桂、辛燥烈太過(guò),傷及陰血,甘草調(diào)和諸藥,全方共奏溫經(jīng)散寒、養(yǎng)血通脈之效。DSD是治療血虛寒厥證的代表方劑,臨床上主要用于治療雷諾病、痛經(jīng)、肩周炎、糖尿病伴隨周?chē)窠?jīng)病變等疾病[4-7],其臨床應(yīng)用廣泛,具有很好的開(kāi)發(fā)價(jià)值。

        物質(zhì)基準(zhǔn)作為經(jīng)典名方的藥用物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)[8],可為復(fù)方制劑的開(kāi)發(fā)提供參照,在經(jīng)典名方復(fù)方制劑開(kāi)發(fā)過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。目前關(guān)于DSD物質(zhì)基準(zhǔn)關(guān)鍵質(zhì)量屬性研究的報(bào)道尚屬空白。針對(duì)此問(wèn)題,本文以DSD物質(zhì)基準(zhǔn)為載體,構(gòu)建其高效液相色譜(HPLC)特征圖譜,同時(shí)測(cè)定了DSD物質(zhì)基準(zhǔn)對(duì)應(yīng)實(shí)物(DSD凍干粉)的出膏率和5種指標(biāo)成分的含量,從全方化學(xué)輪廓與指標(biāo)成分含量測(cè)定的角度對(duì)DSD物質(zhì)基準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)與控制,完善DSD物質(zhì)基準(zhǔn)質(zhì)量控制體系,以期為其復(fù)方制劑的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 儀器與試劑

        Waters 2695高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司);XP-6型百萬(wàn)分之一精密天平(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司);KQ5200DA超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);Milli-Q超純水系統(tǒng)(美國(guó)Millipore公司);Sorvall ST 8R高速冷凍離心機(jī)(賽默飛世爾科技有限公司);陶瓷鍋(曼達(dá)尼旗艦店);LC-E013S電陶爐(廣東順德忠臣電器有限公司);SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)。

        對(duì)照品阿魏酸(批號(hào) DST191112-001)、芍藥苷(批號(hào) DST191024-070)、藁本內(nèi)酯(批號(hào) DST200610-007)、細(xì)辛脂素(批號(hào)DST190528-014)、甘草苷(批號(hào) DST191027-009)、甘草酸銨(批號(hào) DST190702-008)均購(gòu)自成都德思特生物技術(shù)有限公司;對(duì)照品桂皮醛(批號(hào)110710-201418)購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院。上述對(duì)照品純度>98%。色譜純乙腈(賽默飛世爾科技有限公司);分析純甲醇、磷酸(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);水為實(shí)驗(yàn)室自制超純水。

        1.2 藥 材

        DSD中各藥材產(chǎn)地信息見(jiàn)表1,經(jīng)前期研究確定各藥材的炮制方法,由北京康仁堂藥業(yè)有限公司提供各批次飲片。經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)楊瑤珺教授鑒定分別為傘形科植物當(dāng)歸Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根,樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥嫩枝,毛茛科植物芍藥PaeonialactifloraPall的干燥根,馬兜鈴科植物北細(xì)辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.mandshuricum(Maxim.)Kitag的干燥根和根莖,木通科植物三葉木通Akebiatrifoliata(Thunb.)Koidz的干燥藤莖,豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch的干燥根和根莖,鼠李科植物棗ZiziphusjujubaMill的干燥成熟果實(shí)。

        表1 當(dāng)歸四逆湯各藥材產(chǎn)地信息Table 1 Origin information of medicinal materials of Danggui Sini Decoction

        (續(xù)表1)

        No.OriginAngelicae Sinensis Radix(當(dāng)歸)Cinnamomi Ramulus(桂枝)Paeoniae Radix Alba(白芍)Asari Radix et Rhizoma(細(xì)辛)Akebiae Caulis(木通)Glycyrrhizae Radix et Rhizoma(甘草)Jujubae Fructus(大棗)S4甘肅岷縣廣東肇慶亳州譙城吉林通化安徽霍山黑石渡鎮(zhèn)甘肅定西山東棗莊S5甘肅岷縣廣東肇慶亳州譙城遼寧撫順安徽霍山與兒街鎮(zhèn)甘肅定西河北石家莊S6甘肅渭源縣廣東省肇慶四川德陽(yáng)黑龍江牡丹江安徽霍山太陽(yáng)鄉(xiāng)內(nèi)蒙古包頭河北石家莊S7甘肅通渭縣廣西南寧亳州譙城遼寧撫順安徽霍山諸佛庵鎮(zhèn)內(nèi)蒙古包頭河北滄州S8甘肅岷縣云南文山亳州譙城黑龍江牡丹江安徽霍山真龍地鄉(xiāng)寧夏吳忠河北滄州S9甘肅岷縣廣東肇慶四川自貢吉林通化安徽霍山漫水河鎮(zhèn)甘肅定西新疆哈密S10甘肅通渭縣云南文山浙江金華黑龍江牡丹江安徽霍山太陽(yáng)鄉(xiāng)內(nèi)蒙古包頭新疆和田S11甘肅岷縣廣西南寧亳州譙城吉林通化安徽霍山道士沖鄉(xiāng)內(nèi)蒙古包頭新疆和田S12甘肅通渭縣廣西玉林四川瀘州遼寧撫順安徽霍山但家廟鎮(zhèn)內(nèi)蒙古包頭新疆阿克蘇S13云南麗江玉龍自治縣廣西南寧浙江金華遼寧撫順安徽霍山上土市鎮(zhèn)寧夏吳忠新疆喀什S14云南麗江華坪縣廣東肇慶亳州譙城遼寧撫順安徽霍山東西溪鄉(xiāng)寧夏吳忠河北保定S15云南麗江永勝縣廣西南寧亳州譙城黑龍江佳木斯安徽霍山落兒嶺鎮(zhèn)寧夏吳忠山東棗莊

        1.3 樣品制備

        1.3.1 當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)對(duì)應(yīng)實(shí)物的制備《傷寒論》中記載的DSD的用法用量:“當(dāng)歸三兩,桂枝三兩(去皮),芍藥三兩,細(xì)辛三兩,甘草二兩(炙),通草二兩,大棗二十五枚(擘)。上七味,以水八升,煮取三升,去滓,溫服一升,日三服?!苯?jīng)考證,確定東漢一兩相當(dāng)于今日13.8 g[9],一升相當(dāng)于200 mL。因此確定處方劑量為當(dāng)歸、白芍、桂枝、細(xì)辛各41.4 g,木通、炙甘草各27.6 g,大棗25枚(破開(kāi)去核)。分別稱(chēng)取相應(yīng)批次處方量的當(dāng)歸、白芍、桂枝、細(xì)辛、木通、炙甘草和大棗置于3 L陶瓷鍋內(nèi),加去離子水1 600 mL,電陶爐武火(8檔)加熱至煮沸后轉(zhuǎn)文火(5檔)煎煮60 min,趁熱以300目尼龍篩網(wǎng)濾過(guò),棄去藥渣,放冷,定容至500 mL,即得DSD水煎液。取上述水煎液適量,于4 ℃、9 000 r·min-1條件下離心20 min后精密移取100 mL上清液置于恒重的蒸發(fā)皿中,冷凍干燥3 d即得DSD凍干粉,用于含量測(cè)定和特征圖譜研究。

        1.3.2 混合對(duì)照品溶液制備取芍藥苷、阿魏酸、甘草苷、桂皮醛、甘草酸銨、細(xì)辛脂素和藁本內(nèi)酯對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,分別置于7個(gè)容量瓶中,加甲醇配制成質(zhì)量濃度分別為2.710、0.223、0.418、0.943、1.240、0.147、0.512 mg·mL-1的各對(duì)照品儲(chǔ)備液;依次量取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液適量置于10 mL容量瓶中,加甲醇配制成質(zhì)量濃度分別為26.000、23.000、10.500、23.600、106.000、33.200、 12.800 μg·mL-1的混合對(duì)照品溶液。

        1.3.3 供特征圖譜研究和4個(gè)指標(biāo)成分含量測(cè)定用供試品溶液的制備取凍干粉0.45 g,精密稱(chēng)定,去離子水定容至10 mL,超聲處理3 min至全部溶解,取1 mL在4 ℃、13 000 r·min-1條件下離心20 min的上清液用于DSD凍干粉的特征圖譜研究及芍藥苷、甘草酸銨、桂皮醛和藁本內(nèi)酯的含量測(cè)定。

        1.3.4 供細(xì)辛脂素含量測(cè)定用供試品溶液的制備取凍干粉0.85 g,精密稱(chēng)定,去離子水定容至10 mL,超聲處理3 min至全部溶解后倒入50 mL分液漏斗中,以等量乙酸乙酯萃取兩次,合并兩次萃取后的乙酸乙酯層溶液于200 mL蒸發(fā)皿中,80 ℃水浴揮干溶劑,甲醇定容至2 mL,取1 mL在4 ℃、13 000 r·min-1條件下離心20 min的上清液用于細(xì)辛脂素的含量測(cè)定。

        1.3.5 單味藥樣品及陰性樣品溶液制備分別稱(chēng)取處方量的各飲片,按“1.3.1”項(xiàng)下水煎液制備方法,分別制備各單味藥樣品溶液以及缺各單味藥的陰性樣品溶液。

        1.4 色譜條件

        1.4.1 特征圖譜色譜條件Phenomenex Luna?C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B),梯度洗脫:0~8 min,5%~10%A;8~15 min,10%~13%A;15~24 min,13%~15%A;24~30 min,15%~17%A;30~34 min,17%~20%A;34~45 min,20%~30%A;45~50 min,30%~45%A;50~65 min,45%~80%A;65~67 min,80%~95%A;67~70 min,95%A。柱溫30 ℃,體積流量1.0 mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm和290 nm,進(jìn)樣量10 μL。

        1.4.2 含量測(cè)定色譜條件Phenomenex Luna?C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B),梯度洗脫:0~8 min,16%A;8~35 min,16%~50%A;35~45 min,50%~100%A;45~50 min,100%~16%A。柱溫30 ℃,體積流量1.0 mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm和290 nm,進(jìn)樣量10 μL。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜的建立

        2.1.1 精密度試驗(yàn)取同一批凍干粉(S3)供試品溶液,按“1.4.1”色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果以芍藥苷(230 nm)和桂皮醛(290 nm)為參照峰,各共有峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于3.0%,表明儀器精密度良好。

        2.1.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一批凍干粉(S3)供試品溶液,按“1.4.1”色譜條件,分別于樣品制備后0、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣,結(jié)果顯示,各共有峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的RSD均小于3.0%,表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

        2.1.3 重復(fù)性試驗(yàn)平行制備同一批凍干粉(S3)供試品溶液6份,按“1.4.1”色譜條件進(jìn)樣,結(jié)果顯示,各共有峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的RSD均小于3.0%,表明該方法重復(fù)性良好。

        2.1.4 特征圖譜建立及相似度評(píng)價(jià)采用“1.3.3”方法制備15批凍干粉供試品溶液,按“1.4.1”色譜條件進(jìn)行分析。將15批物質(zhì)基準(zhǔn)HPLC數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),以S1樣品圖譜為參照?qǐng)D譜,時(shí)間窗寬度設(shè)定為0.1 min,采用中位數(shù)法,進(jìn)行多點(diǎn)校正和全譜峰匹配,得到230 nm和290 nm下15批物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜(S1~S15)及共有模式(軟件基于15批物質(zhì)基準(zhǔn)的圖譜擬合出的對(duì)照?qǐng)D譜,包含15批物質(zhì)基準(zhǔn)的共有信息,R)(圖1),混合對(duì)照品的色譜圖見(jiàn)圖2。特征圖譜中共標(biāo)記45個(gè)共有峰,共有峰45為當(dāng)歸特征峰,共有峰42、43、44為桂枝特征峰,共有峰7、8、9、16、20為白芍特征峰,共有峰34、35、36、37、38為細(xì)辛特征峰,共有峰11、22、24、26、28、29、32、33為甘草特征峰,共有峰15為木通特征峰。經(jīng)與對(duì)照品比對(duì)共指認(rèn)7個(gè)共有成分,分別是9號(hào)峰芍藥苷、10號(hào)峰阿魏酸、11號(hào)峰甘草苷、32號(hào)峰甘草酸銨、36號(hào)峰細(xì)辛脂素、43號(hào)峰桂皮醛、45號(hào)峰藁本內(nèi)酯。以生成的共有模式為參照,15批物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜的相似度均大于0.89。

        特征圖譜應(yīng)盡量多的呈現(xiàn)藥材的特征成分信息,兼顧各指標(biāo)成分的響應(yīng)強(qiáng)度,故本研究選擇不同波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)藥典中各指標(biāo)成分的檢測(cè)波長(zhǎng),擬選定230 nm和290 nm作為DSD色譜分析的檢測(cè)波長(zhǎng)。通過(guò)對(duì)凍干粉供試品溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描(210~400 nm)發(fā)現(xiàn),230 nm下色譜峰數(shù)量多,290 nm下藁本內(nèi)酯和桂皮醛色譜峰峰形好,吸收強(qiáng)。因此,確定特征圖譜和含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm和290 nm。

        2.2 當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的出膏率

        按“1.3.1”方法制備DSD凍干粉,測(cè)定出膏率,計(jì)算公式為出膏率=(m/M)×100%,式中m表示凍干粉的質(zhì)量,M表示飲片投料量,結(jié)果見(jiàn)表2。15批物質(zhì)基準(zhǔn)出膏率為13.37%~16.64%,平均值為15.00%,RSD為6.1%。

        2.3 當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的多成分含量測(cè)定

        2.3.1 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)以“1.3.3”和“1.3.4”方法分別制備用于4個(gè)指標(biāo)成分與細(xì)辛脂素含量測(cè)定的供試品溶液,按照“1.4.2”色譜條件測(cè)定混合對(duì)照品溶液、凍干粉的供試品溶液、7個(gè)單味藥及其陰性樣品溶液。結(jié)果顯示樣品中芍藥苷、桂皮醛、甘草酸銨、細(xì)辛脂素和藁本內(nèi)酯的分離度和理論塔板數(shù)均較好,且陰性無(wú)干擾,可進(jìn)行含量測(cè)定。

        2.3.2 線(xiàn)性關(guān)系考察精密吸取按“1.3.2”制備的芍藥苷、桂皮醛、甘草酸銨、細(xì)辛脂素和藁本內(nèi)酯各對(duì)照品儲(chǔ)備液,配制成系列濃度的對(duì)照品溶液,于“1.4.2”條件進(jìn)行色譜分析。記錄不同質(zhì)量濃度(X)對(duì)照品的色譜峰面積(Y),擬合得到線(xiàn)性回歸方程為:芍藥苷Y=12 588X-89 698(r=0.998 3),桂皮醛Y=110 079X+181 094(r=0.999 4),甘草酸銨Y=392 7.5X-26 446(r=0.999 1),細(xì)辛脂素Y=12 697X+5 827.8(r=0.999 9),藁本內(nèi)酯Y=19 054X+36 541(r=0.999 9)。結(jié)果表明,上述成分依次在0.016 9~2.71、0.000 118~0.236、0.007 72~1.24、0.460~147、0.000 512~0.512 μg·mL-1的范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

        圖1 230 nm(A)及290 nm(B)下15批當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的HPLC特征圖譜(S1~S15) 及當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的HPLC對(duì)照?qǐng)D譜(R)Fig.1 HPLC characteristic chromatogram of 15 batches substance benchmarks of Danggui Sini Decoction (S1~S15) and HPLC reference chromatogram of substance benchmarks of Danggui Sini Decoction (R) at 230 nm(A)and 290 nm(B)

        圖2 230 nm和290 nm下當(dāng)歸四逆湯混合對(duì)照品溶液色譜圖Fig.2 Chromatograms of Danggui Sini Decoction mixed control solution at 230 nm and 290 nm A:230 nm,B:290 nm;9.paeoniflorin(芍藥苷) ,10.ferulic acid(阿魏酸),11.liquiritin (甘草苷),32.ammonium glycyrrhizinate (甘草酸銨),36.asarinin(細(xì)辛脂素),43.cinnamaldehyde (桂皮醛),45.ligustilide(藁本內(nèi)酯)

        2.3.3 精密度試驗(yàn)取同一批凍干粉(S3)供試品溶液,按“1.3.3”和“1.3.4”方法分別制備用于4個(gè)指標(biāo)成分與細(xì)辛脂素含量測(cè)定的供試品溶液,按“1.4.2”色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果顯示各成分峰面積RSD均小于2.0%,表明儀器精密度良好。

        2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一批凍干粉(S3)供試品溶液,按“1.3.3”和“1.3.4”方法分別制備用于4個(gè)指標(biāo)成分與細(xì)辛脂素含量測(cè)定的供試品溶液,按“1.4.2”色譜條件分別于樣品制備后0、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣。結(jié)果顯示各成分峰面積RSD均小于2.0%,表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

        2.3.5 重復(fù)性試驗(yàn)平行制備同一批凍干粉(S3)供試品溶液6份,按“1.3.3”和“1.3.4”方法分別制備用于4個(gè)指標(biāo)成分與細(xì)辛脂素含量測(cè)定的供試品溶液,按“1.4.2”色譜條件進(jìn)樣。結(jié)果顯示各成分峰面積RSD均小于2.0%,表明該方法重復(fù)性良好。

        2.3.6 加標(biāo)回收率試驗(yàn)取凍干粉(S3)0.25 g,精密稱(chēng)定,以指標(biāo)成分含量的50%、100%、150%分別加入芍藥苷、桂皮醛、藁本內(nèi)酯和甘草酸銨對(duì)照品溶液各3份,按“1.3.3”方法制備供試品溶液;另取凍干粉(S3)0.85 g,精密稱(chēng)定,以細(xì)辛脂素含量的50%、100%、150%加入細(xì)辛脂素對(duì)照品溶液各3份,按“1.3.4”方法制備供試品溶液。上述各供試品溶液按“1.4.2”條件進(jìn)行色譜分析。結(jié)果顯示5種成分的加標(biāo)回收率為95.0%~105%,RSD為1.7%~2.4%,表明該方法準(zhǔn)確可靠。

        2.4 樣品含量測(cè)定

        采用“1.3.3”和“1.3.4”方法分別制備15批凍干粉供試品溶液,按“1.4.2”條件進(jìn)樣。如表2所示,15批物質(zhì)基準(zhǔn)中芍藥苷、甘草酸銨、細(xì)辛脂素、桂皮醛和藁本內(nèi)酯的含量分別為8.226~13.46、1.929~6.535、0.020 02~0.034 30、0.076 61~0.543 3和0.075 94~0.140 6 mg·g-1。

        表2 15批當(dāng)歸四逆湯物質(zhì)基準(zhǔn)的出膏率及5種指標(biāo)成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)Table 2 Yield of dry extract and mass fraction of 5 index components in 15 batches substance benchmarks of Danggui Sini Decoction

        以2020年版《中國(guó)藥典》中各藥味的含測(cè)項(xiàng)為基礎(chǔ),結(jié)合各供試品溶液及混合對(duì)照品溶液的色譜圖綜合分析,以含量高、性質(zhì)穩(wěn)定、無(wú)陰性干擾、易于檢測(cè)、峰形良好且保留時(shí)間適中為原則,選擇芍藥苷、甘草酸銨、細(xì)辛脂素、桂皮醛作為指標(biāo)成分進(jìn)行DSD物質(zhì)基準(zhǔn)的含量測(cè)定研究。藥典中對(duì)當(dāng)歸飲片缺少質(zhì)控成分,而當(dāng)歸中主要為揮發(fā)油和有機(jī)酸,其中含量最高的為藁本內(nèi)酯和阿魏酸[10-12],但阿魏酸存在陰性干擾,且不具有專(zhuān)屬性,故將藁本內(nèi)酯納入含測(cè)項(xiàng);最終確定藁本內(nèi)酯、桂皮醛、芍藥苷、細(xì)辛脂素和甘草酸銨作為含量測(cè)定的指標(biāo)成分。

        對(duì)15批DSD凍干粉的指標(biāo)成分進(jìn)行含量測(cè)定,發(fā)現(xiàn)芍藥苷、細(xì)辛脂素和藁本內(nèi)酯的含量為均值的70%~130%[13],3個(gè)批次的桂皮醛和10個(gè)批次的甘草酸銨含量超出了均值的70%~130%。對(duì)處方中的各藥材及其飲片進(jìn)行含量測(cè)定,發(fā)現(xiàn)藥材和飲片中同批次的桂皮醛和甘草酸銨也超出含量均值的70%~130%,由此說(shuō)明飲片質(zhì)量的均一性是保證經(jīng)典名方關(guān)鍵質(zhì)量屬性一致性的必要條件。

        將特征圖譜中的45個(gè)共有峰進(jìn)行藥材歸屬,結(jié)果顯示,除大棗外其余藥味均存在特征峰,故需對(duì)大棗進(jìn)行單獨(dú)的質(zhì)控研究。首先,采用HPLC對(duì)大棗中的白樺脂酸、齊墩果酸進(jìn)行檢測(cè)[14],但在紫外檢測(cè)器(UV)和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)下二者均未檢出,推測(cè)以上兩個(gè)成分的極性較弱,難以煎出。據(jù)報(bào)道,大棗的主要成分為氨基酸和多糖[15],但方中當(dāng)歸也富含多糖,故無(wú)法對(duì)大棗多糖進(jìn)行薄層色譜(TLC)鑒別。嘗試對(duì)大棗氨基酸進(jìn)行薄層鑒別[16],發(fā)現(xiàn)陰性樣品亦存在嚴(yán)重干擾。因此需進(jìn)行后續(xù)研究以實(shí)現(xiàn)對(duì)大棗的質(zhì)量控制。

        3 結(jié) 論

        本文基于HPLC特征圖譜、出膏率指標(biāo)成分含量,闡明了DSD物質(zhì)基準(zhǔn)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,為經(jīng)典名方DSD的開(kāi)發(fā)提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),為經(jīng)典名方關(guān)鍵質(zhì)量屬性的研究提供了參考思路。

        猜你喜歡
        藁本脂素凍干粉
        藁本基原與遼藁本道地藥材本草考證 *
        擬藁本屬及近緣物種中國(guó)分類(lèi)群花粉形態(tài)與質(zhì)體基因組系統(tǒng)發(fā)育研究
        凍干粉護(hù)膚,效果真的很好嗎
        亞麻木脂素提取液滲透模型建立與驗(yàn)證
        祛風(fēng)除濕的藁本
        《豬瘟高免血清凍干粉的初步研究》圖版
        黃荊子總木脂素的提取工藝優(yōu)選
        中成藥(2016年8期)2016-05-17 06:08:39
        響應(yīng)面法優(yōu)化竹葉椒總木脂素的超聲提取工藝
        注射用復(fù)方葒草凍干粉針與常用輸液配伍穩(wěn)定性研究
        中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:51
        藁本的真?zhèn)舞b別
        久久精品视频91| 亚洲国产欲色有一二欲色| 日韩人妻有码中文字幕| 美女与黑人巨大进入免费观看| 成熟人妻换xxxx| 久久久久久亚洲av无码蜜芽| 人人做人人妻人人精| 中文无码日韩欧免费视频| 美国又粗又长久久性黄大片| 在线免费观看黄色国产强暴av| 婷婷色婷婷开心五月四房播播| 国产丰满老熟女重口对白| 日韩亚洲欧美精品| 女同亚洲一区二区三区精品久久| 黄片视频免费观看蜜桃| 亚洲精品无码专区| 色欲av亚洲一区无码少妇| av综合网男人的天堂| 亚洲国产丝袜美女在线| 少妇极品熟妇人妻无码| 亚洲国产精品成人久久久| 国产亚洲精品成人av在线| 国产真人无遮挡作爱免费视频| 丰满少妇人妻无码| 丝袜美女美腿一区二区| 精品无码久久久久久久动漫| 丰满少妇被猛烈进入高清播放| 国产亚洲精选美女久久久久| 中国a级毛片免费观看| 国产夫妻自拍视频在线播放| 成人影院免费观看在线播放视频| 三级在线看中文字幕完整版| 人妻少妇不满足中文字幕| 太大太粗太爽免费视频| 亚洲精品久久中文字幕| 久久婷婷综合激情五月| 欧美人与动牲交片免费| 一本之道高清无码视频| 国产成人精品久久亚洲高清不卡| av毛片在线播放网址| 久久久噜噜噜久久中文字幕色伊伊|