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        阿魏酸對炎性痛鎮(zhèn)痛作用探討

        2021-05-27 01:51:02邱春玉羅婉茹卯潤敏劉婷婷
        北方藥學(xué) 2021年9期
        關(guān)鍵詞:足趾生理鹽水容積

        邱春玉,魏 爽,羅婉茹,卯潤敏,劉婷婷*

        (1. 湖北科技學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,湖北 咸寧 437100 2. 湖北科技學(xué)院藥學(xué)院,湖北 咸寧 437100)

        疼痛是一種不愉快的感覺,一種情感體驗(yàn),在身體受傷的情況下,它通常是一個(gè)警告信號,是一種對周圍環(huán)境的保護(hù)性適應(yīng)方式。周圍神經(jīng)機(jī)制和中樞神經(jīng)機(jī)制[1]是疼痛形成的兩種機(jī)制。周圍神經(jīng)機(jī)制過程可以分為傷害性感受器,傷害性感受器的傳入,外周交感纖維活動與疼痛,外周敏感化。中樞神經(jīng)機(jī)制的過程可以分為初級傳入纖維在脊髓背角的終止,傳遞痛覺信息的上行通路,痛覺中樞,中樞敏感化和疼痛的中樞調(diào)整機(jī)制[2]。根據(jù)流行病學(xué)研究, 11%到38%的兒童和青少年患有慢性疼痛,5.6%到18.1%的成年人患有慢性背痛[3]。在一個(gè)人的生活中,疼痛是必不可少的,如果沒有疼痛,就會對燒傷、攻擊等也沒有防御反應(yīng)[4]。 但是治療疼痛已成為個(gè)體和社會的巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),鎮(zhèn)痛藥主要通過抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)來發(fā)揮其鎮(zhèn)痛作用,傳統(tǒng)的非甾體類解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥僅對輕中度疼痛有效且容易出現(xiàn)胃出血等副作用,嗎啡等阿片類鎮(zhèn)痛藥又具有成癮和耐受等許多嚴(yán)重不良反應(yīng)[5]。因此,研究安全有效不良反應(yīng)少的鎮(zhèn)痛藥物非常必要。

        阿魏酸(3-甲氧基-4-羥基肉桂酸)是肉桂酸的衍生物,它是阿魏,當(dāng)歸酸棗仁等中藥的有效成分之一,也是中藥的質(zhì)量指標(biāo)之一[6]。阿魏酸的生理功效主要有抗氧化,抑菌消炎,抗癌,抗輻射,抗血小板聚集和血栓的形成,改善心血管健康,防止骨質(zhì)流失,提高女性更年期綜合征的療效,使老年人恢復(fù)和提高記憶力[7]。由于阿魏酸能抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)的升高,所以在炎癥反應(yīng)中可以起到鎮(zhèn)痛作用[8]。

        本研究將阿魏酸腹腔注射給藥作為實(shí)驗(yàn)組,生理鹽水腹腔注射給藥為空白組,采用熱板實(shí)驗(yàn)、醋酸扭體實(shí)驗(yàn)、醋酸抬腿實(shí)驗(yàn)觀察阿魏酸對炎性痛的鎮(zhèn)痛作用。

        1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動物

        C-57小鼠,體重15~25g,性別不拘。由湖北省實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供。飼養(yǎng)條件:10只/籠,溫度(25±1)℃,濕度(50±10)%,自由攝食飲水。

        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

        本研究所用的主要儀器有分析電子天平秤、微量進(jìn)樣器、足趾容積測量儀和熱板儀;實(shí)驗(yàn)所用試劑主要有阿魏酸(上海源葉,B20007)、生理鹽水(H51021158,科倫藥業(yè))、乙醇(天力化學(xué)試劑,GB/T676-1990)、冰醋(GB/T678-2002,江北化學(xué)試劑)

        1.3 小鼠抬腿法

        取20只小鼠隨機(jī)分為2組,每組10只,分別為空白組和實(shí)驗(yàn)組。兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸(給藥量為0.02mL/10g)。給藥0.5h后,用微型注射器給小鼠左足趾皮下注射2%醋酸溶液(給藥量為20μL/10g),記錄小鼠5min內(nèi)的抬腿次數(shù)。

        1.4 小鼠扭體法

        取20只小鼠隨機(jī)分為2組,分別為空白組和實(shí)驗(yàn)組,每組10只。兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸(給藥量為0.02mL/10g)。二十分鐘后,各組小鼠腹腔注射2%醋酸溶液(給藥量為0.2mL/10g),記錄小鼠15分鐘出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)。

        1.5 小鼠熱板法

        室溫條件下,將熱板溫度調(diào)為為(55.0±0.5)℃,保持恒溫,并篩選出10~30秒內(nèi)有舔后足反應(yīng)的合格雌性小鼠20只,分為2組,每組10只,分別為空白組和實(shí)驗(yàn)組。測定小鼠的基礎(chǔ)痛閾值后腹腔注射給藥,給藥1h、2h、3h后分別測定小鼠的熱痛閾值。

        1.6 CFA法

        Day1取20只小鼠隨機(jī)分為2組,測定小鼠的基礎(chǔ)足趾容積;然后用微量注射器給小鼠左后足注射CFA(給藥量為20μL/10g);最后再進(jìn)行腹腔注射給藥。

        Day2 以同樣的方法測定小鼠的足趾容積后再進(jìn)行給藥。

        Day3兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸,給藥量為0.02mL/10g。

        Day4 測定小鼠的足趾容積后給藥。

        Day5兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸,給藥量為0.02mL/10g。

        Day6 測定小鼠足趾容積后給藥。

        Day7兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸,給藥量為0.02mL/10g。

        Day8測小鼠的足趾容積。

        2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        2.1 阿魏酸對小鼠扭體和抬腿次數(shù)的影響

        由表1可知,與生理鹽水組相比較,阿魏酸組扭體次數(shù)減少(P<0.01),抬腿次數(shù)也減少(P<0.05),說明阿魏酸對小鼠的扭體反應(yīng)和抬腿反應(yīng)均具有鎮(zhèn)痛作用。鎮(zhèn)痛百分率 =[(生理鹽水組小鼠的平均次數(shù) - 阿魏酸組小鼠的平次數(shù)) / 生理鹽水組小鼠的平均次數(shù)] × 100%。

        2.2 阿魏酸對小鼠痛閾值的影響

        實(shí)驗(yàn)組的基礎(chǔ)熱痛閾值為14.44,空白組的基礎(chǔ)熱痛閾值為11.54。在給藥1h時(shí),實(shí)驗(yàn)組的熱痛閾值為18.39,空白組的熱痛閾值為13.65,由圖1可知,與空白組相比,實(shí)驗(yàn)組熱痛閾增加。在給藥2h時(shí),實(shí)驗(yàn)組的熱痛閾值為15.35,空白組的熱痛閾值為11.26,與空白組相比,實(shí)驗(yàn)組熱痛閾顯著增加(P<0.05)。在給藥3h時(shí),實(shí)驗(yàn)組熱痛閾為19.13,空白組的熱痛閾為15.03,與空白組相比,實(shí)驗(yàn)組熱痛閾無顯著性差異(P>0.05)。

        圖1 小鼠熱痛閾值變化率

        2.3 阿魏酸對小鼠足趾容積的影響

        由圖2可知:第二天時(shí),實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積變化量為0.07,空白組小鼠足趾容積變化量為0.146,與空白組相比,實(shí)驗(yàn)組明顯降低了小鼠足趾腫脹度;第四天時(shí),實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積變化量為0.064,空白組小鼠足趾容積變化量為0.0325,實(shí)驗(yàn)組明顯降低了小鼠的足趾腫脹度;第六天時(shí),實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積變化量為0.0325,空白組小鼠足趾容積為0.042,與空白組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積無明顯差異;第八天時(shí),實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積變化量為0.0375,空白組小鼠足趾容積變化量為0.024,實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容無明顯差異。

        圖2 小鼠足趾容積變化量

        3 討論

        疼痛是一種不愉快的感覺,它警告身體受到威脅并引起一系列防御反應(yīng),但它也有局限性,一些急性和長期的疼痛已經(jīng)成為對身體無法忍受的折磨,并已成為當(dāng)今影響健康的嚴(yán)重問題之一。慢性疼痛是由身體和內(nèi)臟的慢性病引起的,慢性疼痛發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜且備受爭議,例如“周邊機(jī)械理論”、“中央機(jī)械理論”和“心理學(xué)理論”[9]。慢性疼痛除了疼痛的癥狀外,還給患者造成精神、情緒和多種生理功能的紊亂。本實(shí)驗(yàn)采用熱板法、醋酸扭體法、醋酸抬腿法和CFA4種疼痛模型,觀察小鼠急性和急慢性炎性痛反應(yīng)。

        阿魏酸鈉是從川芎中分離提純得到的一種藥物,在醫(yī)藥領(lǐng)域中,已知阿魏酸及其衍生物有降低血糖、清除自由基、止痛抗氧化等作用。有研究表明,氟桂利嗪和阿魏酸鈉治療偏頭痛的療效優(yōu)于氟桂利嗪,說明阿魏酸具有鎮(zhèn)痛作用[10]。在我國,由于阿魏酸抗氧化性和對酪氨酸酶活性的抑制作用,使其在化妝品工業(yè)中應(yīng)用也比較廣泛。

        本實(shí)驗(yàn)采用實(shí)驗(yàn)動物疼痛模型觀察阿魏酸對炎性痛的鎮(zhèn)痛作用。扭體法是將一定量和濃度的化學(xué)刺激劑注入小鼠的腹腔,沉積在腹腔和腹腔壁中,在腹腔底部造成普遍的炎癥疼痛,并作出胸部和后腿延伸反應(yīng),這是一個(gè)典型的外周鎮(zhèn)痛模型。 在小鼠扭體實(shí)驗(yàn)和抬腿實(shí)驗(yàn)中,與空白組相比,小鼠扭體次數(shù)和抬腿次數(shù)均減少,且均顯示阿魏酸的鎮(zhèn)痛率在30%左右;熱板法是以一定的熱強(qiáng)度刺激動物身體一部分的疼痛,刺激開始與反應(yīng)之間的潛伏時(shí)間被視為疼痛指標(biāo),是高位中樞參與的反應(yīng)。 在小鼠熱板實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組小鼠熱痛閾增加且實(shí)驗(yàn)組小鼠熱痛閾在給藥第二個(gè)小時(shí)時(shí)鎮(zhèn)痛效果達(dá)到最佳;在小鼠足趾容積實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組小鼠足趾容積腫脹度在第二天和第四天顯著減少,鎮(zhèn)痛效果最好,而第六天和第八天與空白組相差不大。綜上結(jié)果表明,阿魏酸對炎癥性疼痛具有一定鎮(zhèn)痛作用,而有研究表明其鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與阿魏酸使海馬、前額皮膚和杏仁核的 5-HT 和 NE 水平劑量依賴性增加及抑制腦內(nèi)MOA活性有關(guān)[11]。

        4 結(jié)論

        阿魏酸對炎性疼痛有一定的鎮(zhèn)痛作用,但是鎮(zhèn)痛作用不是特別強(qiáng)效,建議在患者有冠心病,糖尿病腎病伴有慢性疼痛時(shí),可以聯(lián)合用藥使用阿魏酸進(jìn)行鎮(zhèn)痛。

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