張志明，肖改娥，馬 瑩，劉 琳，姜小建

陜西省西安市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西西安 710003

尿液有形成分分析一般指尿液中的紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)、上皮細(xì)胞(EC)、管型(CAST)、細(xì)菌(BACT)等各種病理成分通過專用尿液有形成分分析儀或離心后人工用顯微鏡進(jìn)行檢查和識(shí)別，對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、糖尿病等一些全身性病變的診斷、判斷預(yù)后有不可替代的作用[1-3]。 UF-4000尿液有形成分分析儀作為Sysmex的第4代產(chǎn)品，采用流式法檢測(cè)原理檢測(cè)尿液中的有形成分，該儀器檢測(cè)項(xiàng)目較多，并且可拓展為模塊化流水線，可提高工作效率，縮短測(cè)定周期[4]。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明明確規(guī)定：尿液有形成分分析儀性能驗(yàn)證的內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、攜帶污染率和可報(bào)告范圍[5]。為此，本研究對(duì)UF-4000尿液有形成分分析儀中RBC、WBC、EC、CAST、 BACT 5項(xiàng)主要指標(biāo)進(jìn)行精密度、攜帶污染率、線性與臨床可報(bào)告范圍、參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1儀器狀態(tài)評(píng)價(jià)方案 測(cè)試前分析裝置按照說明書的要求進(jìn)行正常保養(yǎng)清洗，對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境(溫度、濕度及電源電壓進(jìn)行檢測(cè))和試劑信息進(jìn)行驗(yàn)證，判斷空白結(jié)果是否符合廠家提供的標(biāo)準(zhǔn)。

1.2攜帶污染率評(píng)價(jià)方案 取高濃度尿液標(biāo)本(建議RBC/WBC約10 000個(gè)/μL,BACT約10 000個(gè)/μL)，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度尿液標(biāo)本，連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3；按公式[攜帶污染率(%)=(L1-L3)/(H3-L3)×100%]計(jì)算攜帶污染率。判定標(biāo)準(zhǔn)：RBC攜帶污染率≤0.1%、BACT攜帶污染率≤0.05%(參照廠家提供的攜帶污染率標(biāo)準(zhǔn))[6-7]。

1.3精密度評(píng)價(jià)方案 采用UF-4000尿液有形成分分析儀配套質(zhì)控物[批號(hào)(UK0066)] 混勻后采取手動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)測(cè)定11次，計(jì)算第2～11次共10次的批內(nèi)精密度。批間精密度通過計(jì)算20 d的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)(CV)值獲得。判定標(biāo)準(zhǔn)：符合廠家提供的精密度標(biāo)準(zhǔn)。

1.4線性與臨床可報(bào)告范圍評(píng)價(jià)方案 取富含對(duì)應(yīng)項(xiàng)目的高值尿液標(biāo)本(RBC、WBC、細(xì)菌數(shù)約10 000個(gè)/μL)，以生理鹽水進(jìn)行1∶2、1∶4、1∶16、1∶64、1∶128的系列等比稀釋，以稀釋計(jì)算值作為理論值，各稀釋尿液標(biāo)本的實(shí)測(cè)值與理論值進(jìn)行回歸統(tǒng)計(jì)，判定標(biāo)準(zhǔn)：r≥0.975或r2≥0.950

1.5生物參考區(qū)間驗(yàn)證 依照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)EP28-A3C文件[8]要求進(jìn)行。選取體檢合格的健康個(gè)體男、女各20例，年齡15～53歲，按儀器說明書要求進(jìn)行尿液檢測(cè)。判斷標(biāo)準(zhǔn)：將每個(gè)測(cè)定值與需驗(yàn)證的參考區(qū)間比較，若40例受試者中落在參考區(qū)間外的測(cè)定值不超過4個(gè)(R≥90%，R=落在參考區(qū)間例數(shù)/實(shí)測(cè)例數(shù))，則說明該生物參考區(qū)間有效[9]。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。

2 結(jié) 果

2.1儀器狀態(tài)驗(yàn)證結(jié)果 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：環(huán)境溫度(18 ℃)、濕度(35%)、電源(220V)，試劑量檢查通過,檢測(cè)項(xiàng)目空白值見表1。

表1 檢測(cè)項(xiàng)目空白值(個(gè)/μL)

2.2檢測(cè)項(xiàng)目攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果 UF-4000尿液有形成分分析儀檢測(cè)項(xiàng)目攜帶污染率見表2。

表2 檢測(cè)項(xiàng)目攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果

2.3精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.3.1批內(nèi)精密度驗(yàn)證結(jié)果 見表3。

表3 批內(nèi)精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.3.2批間精密度驗(yàn)證結(jié)果 見表4。

表4 批間精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.4線性與臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果 見表5。

表5 線性與臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果

2.5檢測(cè)項(xiàng)目的生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果 見表6。

表6 檢測(cè)項(xiàng)目的生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

3 討 論

目前，尿液有形成分分析儀已成為許多臨床實(shí)驗(yàn)室的必備設(shè)備之一，UF-4000尿液有形成分分析儀是Sysmex公司最新推出的第4代產(chǎn)品，每小時(shí)檢測(cè)速度可達(dá)80份標(biāo)本；另外所檢測(cè)項(xiàng)目較多，雖然其檢測(cè)仍是篩選，但通過該儀器提供的多種臨床有用參數(shù)，檢測(cè)標(biāo)本不用進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)就可快速區(qū)分尿路感染致病菌(革蘭陰性菌或革蘭陽性菌)，提高了臨床合理使用抗菌藥物的能力[10-11]。

UF-4000尿液有形成分分析儀作為定量檢測(cè)儀器，按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》在臨床體液部分細(xì)則要求臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)性能進(jìn)行驗(yàn)證)及CNAS-CL02-A001:2018要求對(duì)設(shè)備、方法和系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證，一般在新儀器安裝時(shí)或儀器設(shè)備發(fā)生了較大的性能改變,比如更換了設(shè)備關(guān)鍵部件、進(jìn)行了大的維護(hù)和維修時(shí)均需做性能驗(yàn)證，該儀器在科室2018年8月新裝機(jī)后在臨床標(biāo)本檢測(cè)前進(jìn)行該儀器的性能驗(yàn)證，驗(yàn)證項(xiàng)目包括了RBC、WBC、EC、CAST、BACT 5項(xiàng)主要指標(biāo)，分別進(jìn)行了儀器狀態(tài)評(píng)價(jià)、攜帶污染率、批內(nèi)精密度和批間精密度、線性與臨床可報(bào)告范圍、生物參考區(qū)間的驗(yàn)證。首先，在性能驗(yàn)證前通過對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，如環(huán)境溫度(18 ℃)、濕度(35%)、電源(220V)，試劑量的檢查及項(xiàng)目空白值的檢測(cè)是保證儀器正常運(yùn)行的前提；其次，驗(yàn)證了RBC、BACT、WBC的攜帶污染率分別為RBC(-0.02%)、BACT(0.02%)、WBC(0.00%)均小于對(duì)應(yīng)的0.05%，因UF-4000尿液有形成分分析儀說明書中未對(duì)EC和CAST做具體要求，因此沒做這2個(gè)項(xiàng)目的驗(yàn)證，再次通過批內(nèi)精密度驗(yàn)證，RBC(2.10%)、WBC(1.80%)、EC(18.90%)、CAST(24.80%)和BACT(4.20%)，以及批間精密度驗(yàn)證RBC(2.79%)、WBC(2.86%)、EC(12.81%)、CAST(14.19%)和BACT(4.12%)均符合儀器要求范圍。另外，還進(jìn)行了線性與臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證，RBC(斜率=1.038 8，r2=1.000 0，可報(bào)告范圍為0.0～948 8.0個(gè)/μL)、WBC(斜率=1.002 6，r2=1.000 0，可報(bào)告范圍為0.0～10 410.4個(gè)/μL)、BACT(斜率=1.628 5，r2=0.994 1，可報(bào)告范圍為0.0～7 488.0個(gè)/μL)的范圍內(nèi)線性好，檢測(cè)參數(shù)均符合Sysmex儀器說明書。最后對(duì)生物參考區(qū)間進(jìn)行了驗(yàn)證，驗(yàn)證的20份標(biāo)本結(jié)果均在生物參考區(qū)間內(nèi)。自UF-4000尿液有形成分分析儀裝機(jī)應(yīng)用以來，儀器的穩(wěn)定性能為臨床診斷和治療提供了重要的參考依據(jù)，但在應(yīng)用實(shí)踐中有以下3點(diǎn)需要注意：(1)如果遇到標(biāo)本外觀十分清亮，尤其是一些患者為了憋尿進(jìn)行B超檢查，剛飲用了大量的水造成尿液稀釋，有些項(xiàng)目無法檢測(cè)，在標(biāo)本接收時(shí)需與患者做好溝通，建議患者間隔一段時(shí)間后再留取標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè);(2)如果遇到標(biāo)本外觀十分渾濁的可疑菌尿感染高值患者標(biāo)本時(shí)，標(biāo)本需要稀釋后檢測(cè)，并且標(biāo)本檢測(cè)后要及時(shí)進(jìn)行管道的清洗維護(hù)，以免影響后續(xù)標(biāo)本結(jié)果的準(zhǔn)確性;(3)目前，自動(dòng)化儀器還不能完全替代顯微鏡鏡檢，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)各自的實(shí)際情況制訂尿液有形成分的顯微鏡復(fù)檢程序并進(jìn)行確認(rèn)。

綜上所述，本研究通過對(duì)科室新購置的Sysmex UF-4000尿液有形成分分析儀性能進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)性能均符合該儀器所需要求，該儀器可用于臨床尿液有形成分的分析。