茆 政 應(yīng) 斐 崔 凡

B族鏈球菌(group B streptococcus，GBS)為革蘭陽性鏈球菌，在血平板上呈β-溶血。因菌體表面含有蘭氏抗原分類B群抗原而得名。通常定殖于消化道或生殖道內(nèi)，屬于條件致病菌。上世紀(jì)70年代，國外有報道新生兒GBS感染病例。近年來，國內(nèi)也有孕婦和新生兒GBS感染的報道。目前，我國已將GBS篩查作為產(chǎn)前備查項目。研究發(fā)現(xiàn)，GBS帶菌率存在地域和人種差異，國內(nèi)眾多報道也顯示不同地區(qū)之間GBS檢出率有較大差異。本文主要研究安徽蕪湖地區(qū)1 379例孕婦GBS的感染率，并探討孕婦GBS的感染與胎兒宮內(nèi)窘迫、胎膜早破和早產(chǎn)發(fā)生率的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年6月至2019年9月蕪湖市第一人民醫(yī)院產(chǎn)前檢查的1 379例孕婦(剔出重復(fù)檢查的同一孕婦)作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡20～42歲者；②同意參與此研究，自愿簽署知情同意書者。

1.2 采集方法 采集陰道下部1/3處及直腸肛門括約肌上2～3 cm處分泌物拭子進(jìn)行GBS檢測。

1.3 檢測方法與材料

1.3.1 檢測方法 采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)結(jié)合Taqman技術(shù)，利用特異性引物和熒光標(biāo)記探針，對GBS的特異性脫氧核糖核酸片段進(jìn)行熒光檢測。參照試劑盒說明，標(biāo)本試管中加入1 mL無菌生理鹽水，充分震蕩搖勻，吸取液體轉(zhuǎn)至1.5 mL離心管中，13 000 r/min離心5 min。沉淀加無菌生理鹽水1 mL混勻，13 000 r/min離心5 min，再重復(fù)洗滌1次。沉淀直接加入100 μL核酸提取液充分混勻，99℃干浴10 min，13 000 r/min離心5 min，取上清4 μL作為PCR反應(yīng)模板。再取36 μL GBS核酸熒光PCR檢測混合液分別置于PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件：37℃ 2 min，94℃ 2 min，93℃ 15 s，60℃ 60 s，循環(huán)40次；單點(diǎn)熒光檢測在60℃。

1.3.2 檢測材料 儀器：羅氏Cobas Z480全自動熒光PCR分析儀；湖南湘儀TG16-WS高速離心機(jī)。試劑：上海之江B族鏈球菌核酸測定試劑盒(批號：P20180301)。

1.4 檢測結(jié)果的判讀 陽性結(jié)果：FAM通道Ct值≤38，VIC通道Ct值≤38或No Ct(高濃度的目的基因競爭性抑制)；陰性結(jié)果：FAM通道Ct值No Ct或N/A，VIC通道Ct值≤38；Ct值在38～40，需進(jìn)行重復(fù)檢測，如仍在38～40，結(jié)果報告陰性。

2 結(jié)果

2.1 GBS檢出率情況 1 379例孕婦中，GBS陽性檢出55例(3.99%)，陰性檢出1 324例(96.01%)。

2.2 不同妊娠階段檢出率情況 55例GBS陽性孕婦中，早、中孕期感染5例(9.09%)，晚孕期感染50例(90.91%)。

2.3 兩組孕婦發(fā)病情況比較 陽性組孕婦胎兒宮內(nèi)窘迫、胎膜早破及早產(chǎn)發(fā)病率均高于陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

P

<0.05)。見表1。

表1 兩組孕婦發(fā)病情況比較[例(%)]

2.4 兩組孕婦年齡、Ct值比較 不良妊娠組孕婦Ct值低于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

P

<0.05)。見表2。

表2 兩組孕婦年齡、Ct值比較

3 討論

GBS定殖于正常人類生殖道和消化道內(nèi)，為人類的條件致病菌。當(dāng)懷孕時機(jī)體抵抗力下降，GBS可上行感染子宮和胎膜引發(fā)胎兒宮內(nèi)窘迫，還可刺激機(jī)體釋放磷脂酶A、前列腺素及細(xì)胞因子(白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子)，刺激子宮收縮、降低胎膜張力，可導(dǎo)致早產(chǎn)和胎膜早破，是導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的重要原因。研究發(fā)現(xiàn)，GBS在不同地區(qū)和人群中有不同的帶菌率。本研究觀察安徽蕪湖地區(qū)1 379例孕婦，其中GBS陽性檢出55例，陰性檢出1 324例，帶菌率為3.99%，較其他地區(qū)報道的帶菌率低，各地區(qū)應(yīng)當(dāng)結(jié)合本地區(qū)的流行病學(xué)特點(diǎn)，建立感染預(yù)防和治療方案。

依據(jù)美國《圍生期B族鏈球菌感染篩查及防治指南》，目前主要針對35～37周孕晚期的孕婦圍生期(包括妊娠后期、分娩過程和新生兒早期3個階段)的感染預(yù)防和治療。本研究中，不良妊娠組孕婦有5例早、中孕期檢出GBS，因此，需要進(jìn)一步研究GBS對整個妊娠周期的影響情況。

本研究結(jié)果顯示，陽性組孕婦胎兒宮內(nèi)窘迫、胎膜早破和早產(chǎn)的發(fā)生率高于陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

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<0.05)。表明GBS感染的孕婦發(fā)生胎兒宮內(nèi)窘迫、胎膜早破和早產(chǎn)等不良妊娠的風(fēng)險會增大，提示臨床需加強(qiáng)對GBS的重視，及早預(yù)防降低不良妊娠的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，GBS感染的孕婦中，不良妊娠組孕婦的Ct值低于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

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<0.05)。表明不良妊娠結(jié)局的孕婦體內(nèi)含有較多的GBS菌量，可能導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。因此，在臨床上針對GBS感染的孕婦需要根據(jù)PCR的檢測結(jié)果定量分析，制定針對不同風(fēng)險的分級治療制度。

綜上所述,對孕婦進(jìn)行GBS監(jiān)測，并根據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行有計劃的抗菌藥物預(yù)防性治療，對于產(chǎn)婦和新生兒的健康、安全有重要意義。