趙亞偉 湯加勇 賈 剛 田 剛 劉光芒 陳小玲 蔡景義 康 波 趙 華*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學動物營養(yǎng)研究所，動物抗病營養(yǎng)教育部重點實驗室，成都 2611130；2.四川農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，成都 2611130)

硒(Se)是動物必需的微量元素，在提高畜禽生長性能、抗氧化能力和改善肉品質(zhì)等方面發(fā)揮著重要作用。缺硒易導(dǎo)致畜禽發(fā)生肌營養(yǎng)不良、滲出性素質(zhì)等缺乏癥。傳統(tǒng)硒添加劑以亞硒酸鈉為主，但因存在生物利用率低、毒性強等諸多缺點已被部分國家減少或禁止使用。因此，生物活性強、利用率高、環(huán)境污染小的有機硒和納米硒在現(xiàn)代養(yǎng)殖中的應(yīng)用越來越廣泛。已有研究表明，有機硒和納米硒在家禽生長性能、抗氧化能力和肉品質(zhì)等方面的積極作用均優(yōu)于無機硒[1]。

納米硒是利用納米技術(shù)制備而成的單質(zhì)硒，粒徑一般在60 nm以下，其不僅具有比普通單質(zhì)硒和無機硒更好的生物活性，還具有納米尺寸效應(yīng)和抗菌抑菌的效果[2-3]。與無機硒相比，納米硒具有較高的生物學效價、硒沉積率、穩(wěn)定性以及較低的毒性[4-5]；而與有機硒相比，納米硒具有較高的產(chǎn)品穩(wěn)定性以及低廉的價格。目前，在家禽生產(chǎn)中，酵母硒、硒代甲硫氨酸、納米硒與無機硒的比較研究較多[6-9]，但不同硒源對肉雞生長性能、組織硒沉積及肌肉品質(zhì)之間的比較缺乏系統(tǒng)研究。在此，本試驗擬以肉雞為研究對象，考察4種不同硒源(亞硒酸鈉、酵母硒、羥基-硒代蛋氨酸和納米硒)對肉雞生長性能、血清和肌肉硒含量、抗氧化能力及肉品質(zhì)的影響，以期為各硒源在肉雞生產(chǎn)中的合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

亞硒酸鈉來自成都某飼料有限公司，硒含量1%；酵母硒來自宜昌某股份有限公司，硒含量0.2%；羥基-硒代蛋氨酸來自法國某公司，硒含量2%；納米硒來自某生物科技有限公司，硒含量0.3%。

1.2 試驗設(shè)計

將450羽1日齡愛拔益加(AA)雄性肉雞(購自湖北襄大農(nóng)牧有限公司)按照單因素試驗設(shè)計隨機分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15只雞。對照組(CON組)飼喂不添加硒的基礎(chǔ)飼糧，試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.3 mg/kg(以硒計)的亞硒酸鈉(SS組)、酵母硒(SeY組)、羥基-硒代蛋氨酸(HMSeBA組)和納米硒(Nano-Se組)。試驗期42 d，分為1～21日齡、22～42日齡2個階段。

1.3 試驗飼糧和飼養(yǎng)管理

試驗在四川農(nóng)業(yè)大學動物營養(yǎng)研究所教學科研基地進行。采用網(wǎng)上籠養(yǎng)，自由飲水和采食，定期清糞消毒。每日觀察并記錄雞只生長狀況和飼料損失，其他飼養(yǎng)管理按照常規(guī)程序進行?；A(chǔ)飼糧參照我國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準《雞飼養(yǎng)標準》(NY/T 33—2004)進行配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。SS組、SeY組、HMSeBA組和Nano-Se組飼糧硒含量(實測值)分別為：1～21日齡 1 to 21 days of age，0.42、0.42、0.43和0.43 mg/kg；22～42日齡，0.47、0.47、0.49和0.48 mg/kg。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

1.4 樣品的采集與測定

1.4.1 生長性能

試驗期間，以重復(fù)為單位，于21和42日齡早晨空腹稱重，并準確記錄各階段的采食量和余料量。計算各組試驗1～21日齡、22～42日齡和1～42日齡的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 樣品的采集

42日齡后，依據(jù)體重相近原則，每個重復(fù)選取1只雞，采集頸靜脈血，靜置40 min后4 ℃、3 500 r/min離心10 min，取上清置于-20 ℃保存?zhèn)溆?。屠宰后取胸肌和腿肌于凍存管，放置液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.3 硒含量的測定

按照GB/T 13883—2008方法處理血清、胸肌和腿肌樣品，采用原子吸收光譜法(AFS-230E雙道原子熒光光度計，北京海光儀器公司)測定硒含量。

1.4.4 抗氧化指標的測定

測定血清、胸肌和腿肌的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、總抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量。所用試劑均購自南京建成生物工程研究所，具體操作步驟按照試劑盒說明書進行。

1.4.5 肉品質(zhì)的測定

利用色差儀和pH計分別測定屠宰后45 min、24 h胸肌和腿肌的亮度(L*)、紅度(a*)、黃度(b*)值及pH。取胸肌或腿肌5 g左右稱重(m1)，懸空放入自封袋，并置于0～4 ℃冷庫中，24 h后取出稱重(m2)，計算滴水損失：

滴水損失(%)=100×(m1-m2)/m1。

取胸肌或腿肌10 g左右稱重(m3)，放入80 ℃的恒溫水浴鍋中蒸煮30 min，冷卻20 min后稱重(m4)，計算蒸煮損失：

蒸煮損失(%)=100×(m3-m4)/m3。

1.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析

利用Excel 2016對數(shù)據(jù)進行初步整理，利用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析，對試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著者進行Duncan氏法多重比較，P<0.05表示差異顯著。所有數(shù)據(jù)均以平均值±標準差表示。

2 結(jié) 果

2.1 不同硒源對AA肉雞生長性能的影響

從表2可知，各組之間肉雞各階段的體重、ADG和ADFI均無顯著差異(P>0.05)。與CON組、SeY組和HMSeBA組相比，Nano-Se組肉雞1～21日齡的F/G顯著降低(P<0.05)；各組之間肉雞22～42日齡、1～42日齡的F/G均無顯著差異(P>0.05)。

表2 不同硒源對AA肉雞生長性能的影響

續(xù)表2項目Items組別 GroupsCONSSSeYHMSeBANano-SeP值P-value22～42日齡 22 to 42 days of age126.77±3.08120.11±2.19127.69±3.18126.75±2.90126.98±2.710.301～42日齡 1 to 42 days of age82.21±1.8881.02±1.1785.16±1.8484.57±1.7184.71±1.740.44料重比 F/G1～21日齡 1 to 21 days of age1.43±0.01ab1.40±0.00bc1.42±0.01ab1.43±0.01a1.38±0.02c0.0222～42日齡 22 to 42 days of age1.80±0.011.81±0.021.75±0.031.76±0.031.80±0.010.171～42日齡 1 to 42 days of age1.69±0.011.68±0.011.65±0.021.66±0.021.67±0.010.31

2.2 不同硒源對AA肉雞血清、胸肌和腿肌硒含量的影響

從表3可知，與CON組相比，SS組、SeY組、HMSeBA組和Nano-Se組肉雞胸肌和腿肌硒含量顯著升高(P<0.05)。與SS組相比，HMSeBA組和SeY組肉雞胸肌硒含量顯著升高(P<0.05)。Nano-Se組肉雞血清、胸肌和腿肌硒含量與SS組無顯著差異(P>0.05)。肉雞胸肌和腿肌硒含量高低依次為：HMSeBA組>SeY組>Nano-Se組≈SS組>CON組。

表3 不同硒源對AA肉雞血清、胸肌和腿肌硒含量的影響

2.3 不同硒源對AA肉雞血清和肌肉抗氧化指標的影響

從表4可知，與CON組相比，SS組、SeY組、HMSeBA組和Nano-Se組肉雞血清和腿肌GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)，但各硒源組之間肉雞胸肌GSH-Px活性無顯著差異(P>0.05)。各組之間肉雞血清、胸肌和腿肌T-SOD活性、T-AOC及MDA含量無顯著差異(P>0.05)。

表4 不同硒源對AA肉雞血清和肌肉抗氧化指標的影響

2.4 不同硒源對AA肉雞肉品質(zhì)的影響

表5 不同硒源對AA肉雞肌肉品質(zhì)的影響

3 討 論

3.1 不同硒源對AA肉雞生長性能的影響

微量元素硒能夠改善動物生長性能，但不同硒源對動物生長性能改善程度有所差異。與亞硒酸鈉相比，飼糧添加納米硒、酵母硒或硒代蛋氨酸可通過提高飼料轉(zhuǎn)化效率提高肉雞生長性能[8，10-11]。本試驗中，與CON組相比，飼糧添加0.3 mg/kg納米硒可顯著降低1～21日齡的F/G，與前人研究結(jié)果[10-11]一致。有研究表明，飼糧添加0.3 mg/kg亞硒酸鈉、酵母硒、DL-硒代蛋氨酸和納米硒對肉雞生長性能無顯著影響[9，12-13]。本試驗條件下，亞硒酸鈉、酵母硒、羥基-硒代蛋氨酸和納米硒添加對肉雞各階段的體重、ADG、ADFI及1～42日齡F/G無顯著影響，這與Bakhshalinejad等[9]和Boostani等[12]的結(jié)論一致。本試驗條件下，飼糧添加不同硒源對肉雞各階段的體重、ADG和ADFI無顯著影響，可能是肉雞基礎(chǔ)飼糧中的硒含量(0.14、0.18 mg/kg)已能夠滿足肉雞生長對硒的需要[14]。在1～21日齡，Nano-Se組肉雞的F/G最低，可能是納米硒具有一定的抗菌和抗應(yīng)激能力[2-3]。本試驗在夏季炎熱季節(jié)進行，同時受制于試驗場環(huán)境條件，可能是本試驗中42日齡各組體重偏低的原因。

3.2 不同硒源對AA肉雞血清和肌肉硒含量的影響

飼糧添加硒可提高動物血清和肌肉組織硒含量，不同硒源在動物組織中的硒沉積率不盡相同。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加0.25或0.30 mg/kg的納米硒、亞硒酸鈉、酵母硒或羥基-硒代蛋氨酸均可提高肉雞組織硒含量，且納米硒和羥基-硒代蛋氨酸的添加效果優(yōu)于亞硒酸鈉[1，15-16]。Bakhshalinejad等[9]在肉雞飼糧中添加不同硒源發(fā)現(xiàn)，納米硒組的胸肌硒含量顯著高于DL-硒代蛋氨酸組。本試驗中，飼糧添加不同硒源可提高肉雞血清、胸肌和腿肌硒含量，且Nano-Se組的血清硒含量顯著高于SeY組，造成該現(xiàn)象的原因可能與硒在體內(nèi)的代謝路徑有關(guān)，無機硒主要以簡單擴散的方式進行吸收代謝，有機硒主要以主動運輸?shù)姆绞竭M行吸收代謝，而納米硒是通過被動擴散和主動轉(zhuǎn)運的方式進行吸收代謝[17-18]。同時，與無機硒相比，納米硒具有更高的表面活性和極細的粒度[3-4]，因而其所含的硒更容易在組織中富集和存留。但本試驗條件下，Nano-Se組的胸肌和腿肌硒含量卻低于HMSeBA組和SeY組，與SS組相當，其原因還需通過試驗進一步驗證。

3.3 不同硒源對AA肉雞抗氧化能力的影響

抗氧化酶類是機體內(nèi)極為重要的抗氧化系統(tǒng)之一，主要通過T-SOD、GSH-Px、T-AOC和MDA等指標來反映機體抗氧化能力。其中，GSH-Px是典型的含硒酶，其活性可能與機體組織硒含量有關(guān)[19]。飼糧添加不同硒源可通過改變組織硒含量而影響GSH-Px活性[20]。有報道認為，GSH-Px的活性不受硒源和硒濃度的影響[21-22]。無機硒、有機硒和納米硒雖然在畜禽中都能夠發(fā)揮抗氧化功能，但納米硒的獨特之處在于其清除體內(nèi)過多自由基的效率高于無機硒和有機硒[23]。本試驗中，與CON組相比，飼糧添加不同硒源可提高血清和腿肌GSH-Px活性；但與SS組、SeY組和HMSeBA組相比，Nano-Se組的血清和腿肌GSH-Px活性無顯著差異，該結(jié)果與Meng等[21]、Cichoski等[22]和Li等[13]的研究結(jié)論一致。同時，Mikulková等[24]和Li等[25]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加亞硒酸鈉、酵母硒、硒代蛋氨酸和納米硒對胸肌GSH-Px活性無顯著影響，該結(jié)果與本試驗肌肉GSH-Px活性的研究結(jié)果相似。T-AOC和T-SOD能清除體內(nèi)過多的自由基，而MDA是動物機體脂質(zhì)的過氧化產(chǎn)物，T-AOC、T-SOD活性及MDA含量均可反映機體抗氧化能力。本試驗中，與CON組相比，飼糧添加不同硒源對肉雞血清、胸肌和腿肌T-SOD、T-AOC活性和MDA含量無顯著影響，可能原因是基礎(chǔ)飼糧所含的硒已能夠滿足肉雞生理需求。此外，正常生理狀態(tài)下，肉雞自身氧化與抗氧化系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)，額外補硒對其影響不大。

3.4 不同硒源對AA肉雞肉品質(zhì)的影響

4 結(jié) 論

本試驗條件下，飼糧添加不同硒源對肉雞ADG、ADFI無顯著影響，但飼糧添加納米硒降低了肉雞1～21日齡的F/G；飼糧添加不同硒源提高了肉雞血清和肌肉的硒含量；飼糧添加納米硒能夠一定程度改善肉雞肉品質(zhì)。