楊忠敏，沈以紅，黃先智，王祖文，丁曉雯,

（1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶市農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品科學(xué)與工程國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，重慶 400716；2.西南大學(xué)科技處，重慶 400716）

長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)大量攝入D-半乳糖（D-galactose，D-Gal）會(huì)造成機(jī)體細(xì)胞內(nèi)D-Gal大量堆積，D-Gal在半乳糖氧化酶的作用下生成醛糖和活性氧（reactive oxygen species，ROS）等，這些物質(zhì)不能被細(xì)胞代謝，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激-自由基損害[1]作用的發(fā)生。肝臟是D-Gal的主要代謝器官，也是機(jī)體最重要的解毒器官，大量D-Gal產(chǎn)生的有毒物質(zhì)（如醛類）會(huì)直接損害肝細(xì)胞[2]。研究表明，氧化應(yīng)激參與糖尿病的發(fā)生或發(fā)展，是糖尿病發(fā)生的重要環(huán)節(jié)[3]。氧化應(yīng)激會(huì)損害胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶水平降低，抗氧化能力下降，進(jìn)而使得胰島β細(xì)胞對(duì)ROS的敏感性增加[4]。過量的ROS不僅會(huì)直接促進(jìn)胰島β細(xì)胞凋亡，還可以作為信號(hào)分子參與調(diào)節(jié)胰島素的分泌，從而間接抑制胰島β細(xì)胞的功能[5-6]。胰島β細(xì)胞受損使得胰島素的分泌量降低，進(jìn)而影響機(jī)體的糖代謝能力[7]。同時(shí)，氧化應(yīng)激也會(huì)促進(jìn)胰島素抵抗的發(fā)生和進(jìn)一步加劇脂代謝紊亂。脂代謝水平升高會(huì)增加耗氧量，進(jìn)而產(chǎn)生大量ROS，過量的ROS又會(huì)導(dǎo)致脂肪、蛋白質(zhì)等大分子變性，造成胰腺受損，進(jìn)而反向影響脂代謝，發(fā)生脂代謝紊亂[8]。而糖尿病是以糖代謝紊亂為主的代謝性疾病，同時(shí)也會(huì)引發(fā)脂代謝異常，繼而引發(fā)組織、器官以及消化系統(tǒng)病變[9]。因此，尋找能夠改善機(jī)體氧化應(yīng)激的物質(zhì)，尤其是天然產(chǎn)物，對(duì)預(yù)防氧化應(yīng)激導(dǎo)致的糖脂代謝異常和肝損傷的發(fā)生或發(fā)展具有重要意義。

桑葉是一種藥食兩用植物資源，味苦、甘，性寒，歸肺、肝經(jīng)，具有疏風(fēng)清熱、清肝明目等功效[10]。研究表明，桑葉中含有豐富的活性成分如黃酮、多糖和生物堿等，在抗高血壓[11]、抗凝血[12]、降血糖[13]、降脂[14]、抗腫瘤轉(zhuǎn)移[15]等方面有重要利用價(jià)值。桑葉生物堿所含的特殊羥基結(jié)構(gòu)使其具有許多生理功能。王祖文等[16]研究表明，桑葉生物堿對(duì)四氯化碳聯(lián)合高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠肝損傷具有較好的改善作用；文晉等[17]初步證明了桑葉生物堿粗提液可以調(diào)節(jié)小鼠體內(nèi)膽固醇代謝；王玲等[18]研究結(jié)果表明，桑葉生物堿的特征物質(zhì)1-脫氧野尻霉素能較好改善肥胖小鼠脂代謝。此外，桑葉生物堿對(duì)機(jī)體血糖水平也具有較好的調(diào)控作用[19]。但桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激伴隨的糖脂代謝異常及肝損傷情況作用效果的研究鮮見報(bào)道。本課題前期研究結(jié)果表明，桑葉生物堿能較好地改善氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體DNA、脂質(zhì)及蛋白質(zhì)的氧化損傷，同時(shí)對(duì)氧化應(yīng)激導(dǎo)致的腎臟損傷也具有明顯的改善作用。因此，本研究采用D-Gal誘導(dǎo)小鼠建立氧化損傷模型，通過評(píng)價(jià)小鼠血糖、血脂水平及肝損傷指標(biāo)的變化，探討桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠糖脂代謝異常與肝損傷的影響，旨在為開發(fā)桑葉生物堿相關(guān)保健食品提供理論依據(jù)，為氧化應(yīng)激導(dǎo)致糖脂代謝紊亂及肝損傷的預(yù)防與治療提供新方向。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

SPF級(jí)雄性昆明種小鼠220 只（體質(zhì)量18～20 g），4 周齡，購自重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（渝）20180003；使用許可證號(hào)：SYXK（渝）2018 0003）。基礎(chǔ)飼料購于重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

干燥桑葉粉由重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院提供；桑葉生物堿為實(shí)驗(yàn)室自制，采用硅鎢酸法測(cè)定得到干燥桑葉粉樣品中總生物堿質(zhì)量分?jǐn)?shù)為93.57%。

D-Gal（純度≥99%）、還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）（純度≥98%） 上海阿拉丁生化科技有限公司；總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）等檢測(cè)試劑盒 南京建成生物工程研究所有限公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

Symergy H1酶標(biāo)儀 基因有限公司；RE52CS-1旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；811DK高速冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf AG公司；KQ5200DB超聲波清洗儀 昆山市超聲儀器有限公司；DW-HL438超低溫冰箱 合肥美菱股份有限公司；XW-80A微型漩渦混合儀 上海精科實(shí)業(yè)有限公司；EG1105H型石蠟切片機(jī)德國Leica公司；包埋盒 江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司；生物顯微鏡 日本Olympus株式會(huì)社；ONE TOUCHTMBasicTMPlus血糖監(jiān)測(cè)儀 美國理康公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物飼養(yǎng)、造模及分組

小鼠按照西南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)和使用規(guī)則飼養(yǎng)，室溫（（23±2）℃）、相對(duì)濕度40%～60%，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間室內(nèi)通風(fēng)條件良好，12 h明暗交替（9∶00—21∶00），所有小鼠均飼喂基礎(chǔ)飼料，自由覓食、飲水。

220 只雄性SPF級(jí)昆明種小鼠，飼養(yǎng)7 d適應(yīng)環(huán)境后，隨機(jī)選擇40 只小鼠為正常對(duì)照組，腹腔注射與造模試劑等體積的生理鹽水；其余180 只小鼠腹腔注射D-Gal（1 000 mg/kgmb），連續(xù)注射20 d后，頜下采血，測(cè)定造模組、正常對(duì)照組小鼠血清中丙二醛濃度、超氧化物歧化酶活力是否存在顯著差異，若存在，則判定小鼠造模成功[19]，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

保留正常對(duì)照組小鼠40 只。剔除造模未成功及造模過程中死亡的20 只小鼠，剩余造模成功的160 只小鼠，取10 只作為灌胃0 周實(shí)驗(yàn)小鼠，根據(jù)1.3.2節(jié)方法采樣后用于相關(guān)指標(biāo)測(cè)定；剩余150 只小鼠隨機(jī)分為模型組（灌胃等體積生理鹽水），陽性藥物組（灌胃200 mg/kgmbGSH），桑葉生物堿低、中、高劑量組（分別灌胃50、100、200 mg/kgmb桑葉生物堿，灌胃劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定），每組30 只。所有小鼠每天灌胃1 次，分別連續(xù)灌胃4、8、12 周。

1.3.2 樣本采集

分別于灌胃第4、8、12周末，每次每組各取10 只小鼠，禁食不禁水16 h，眼球取血于含有肝素鈉的真空采血管中，4 ℃、3 000 r/min離心15 min，收集上清液即為血漿，于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 血糖、血脂相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

采用血糖監(jiān)測(cè)儀測(cè)定小鼠空腹血糖濃度；按照試劑盒說明書操作步驟測(cè)定小鼠血漿TC、TG濃度及ALT、AST活力。

1.3.4 肝臟組織病理學(xué)觀察

肝臟經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%福爾馬林溶液固定48 h后，脫水，石蠟包埋，切片（厚度約為4 μm），蘇木精-伊紅染色，在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行組織病理學(xué)觀察。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，每個(gè)樣本平均測(cè)定3 次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用單因素方差分析及多重比較進(jìn)行顯著性差異分析，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。采用Origin 9.0軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠空腹血糖水平的影響

機(jī)體的空腹血糖水平是糖尿病最常規(guī)的檢查指標(biāo)之一，可以反映胰島β細(xì)胞功能，一般能表示基礎(chǔ)的胰島素分泌功能[20]。

表1 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠空腹血糖濃度的影響Table 1 Effect of mulberry leaf alkaloids on fast blood glucose in mice suffering from oxidative stressmmol/L

由表1可知，在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，正常對(duì)照組小鼠的空腹血糖濃度隨灌胃時(shí)間的延長(zhǎng)呈緩慢升高趨勢(shì)，但變化不明顯，基本保持穩(wěn)定；灌胃0、4、8、12 周后，模型組小鼠空腹血糖濃度較相同灌胃時(shí)間的正常對(duì)照組小鼠分別增加了30.27%、29.48%、31.01%、24.96%（P＜0.05），提示氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體空腹血糖濃度升高，糖代謝發(fā)生紊亂。隨著桑葉生物堿灌胃劑量的增加，桑葉生物堿各劑量組小鼠空腹血糖濃度呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。灌胃4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，與模型組小鼠相比，陽性藥物組小鼠的空腹血糖濃度分別降低了21.73%、17.59%、20.58%（P＜0.05），桑葉生物堿高劑量（200 mg/kgmb）組小鼠的空腹血糖濃度分別降低了24.58%、22.03%、17.92%（P＜0.05）。桑葉生物堿中、高劑量組和陽性藥物組小鼠的空腹血糖濃度接近，并且均與正常對(duì)照組小鼠空腹血糖濃度無顯著差異（P＞0.05），表明100 mg/kgmb劑量以上桑葉生物堿的降糖作用與實(shí)驗(yàn)劑量GSH作用效果相當(dāng)，能夠使氧化應(yīng)激小鼠的空腹血糖濃度恢復(fù)到正常水平，其作用效果呈現(xiàn)較明顯的劑量依賴效應(yīng)，但無明顯的時(shí)間依賴效應(yīng)。

2.2 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠血脂水平的影響

血脂是血漿中中性脂肪的總稱，是生命基礎(chǔ)代謝的必需物質(zhì)，TG、TC為血脂主要成分。由表2可知，在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，正常對(duì)照組小鼠的血漿TC濃度隨灌胃時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(shì)，但變化不明顯；與正常組對(duì)照組相比，灌胃0、4、8、12 周后，模型組小鼠的血漿TC濃度分別增加了57.75%、75.88%、70.86%、71.41%，差異極顯著（P＜0.01），提示氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體出現(xiàn)血脂紊亂現(xiàn)象，表現(xiàn)為高血漿TC濃度。相同灌胃時(shí)間下，桑葉生物堿各劑量組小鼠的血漿TC濃度均隨灌胃劑量的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。灌胃4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，與模型組小鼠相比，陽性藥物組小鼠的血漿TC濃度分別降低了46.88%、42.68%、40.17%（P＜0.01），桑葉生物堿高劑量（200 mg/kgmb）組小鼠血漿TC濃度分別降低了41.73%、39.77%、40.80%（P＜0.01）。桑葉生物堿高劑量組小鼠血漿TC濃度與陽性藥物組接近，且兩組均與正常對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05），說明200 mg/kgmb桑葉生物堿對(duì)血漿TC濃度的降低作用達(dá)到實(shí)驗(yàn)劑量GSH的水平，能夠使氧化應(yīng)激小鼠血漿TC濃度恢復(fù)到正常水平，作用效果呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，但無明顯的時(shí)間依賴效應(yīng)。

表2 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠血漿TC濃度的影響Table 2 Effect of mulberry leaf alkaloids on plasma TC in mice suffering from oxidative stressmmol/L

表3 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠血漿TG濃度的影響Table 3 Effect of mulberry leaf alkaloids on plasma TG in mice suffering from oxidative stressmmol/L

由表3可知，在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，正常對(duì)照組小鼠血漿TG濃度基本保持穩(wěn)定；與正常組對(duì)照組相比，灌胃0、4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，模型對(duì)照組小鼠血漿TG濃度分別增加了36.84%、35.00%、38.10%、31.82%（P＜0.01），提示氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體出現(xiàn)血脂紊亂現(xiàn)象。相同灌胃時(shí)間下，桑葉生物堿各劑量組小鼠的血漿TG濃度均隨灌胃劑量的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。灌胃4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，與模型組小鼠相比，陽性藥物組小鼠的血漿TG濃度分別降低了22.22%、24.14%、24.14%（P＜0.01），桑葉生物堿高劑量（200 mg/kgmb）組小鼠血漿TG濃度分別降低了22.22%、31.03%、24.14%（P＜0.01）。桑葉生物堿中、高劑量小鼠血漿TG濃度與陽性藥物組接近，且3 組均與正常對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05），說明100 mg/kgmb以上桑葉生物堿對(duì)血漿TG濃度的降低作用達(dá)到實(shí)驗(yàn)劑量GSH的水平，能夠使氧化應(yīng)激小鼠血漿TG濃度恢復(fù)到正常水平，其作用效果呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，但無時(shí)間依賴效應(yīng)。

2.3 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠肝損傷的影響

ALT、AST活力是評(píng)價(jià)肝功能的重要指標(biāo)，通過肝臟病理切片能更直觀地判斷肝臟受損情況[21]。為考察桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠肝損傷的影響，測(cè)定小鼠血漿ALT、AST活力并進(jìn)行肝組織切片病理學(xué)觀察。

表4 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠血漿ALT活力的影響Table 4 Effect of mulberry leaf alkaloids on plasma ALT activity in mice suffering from oxidative stressIU/L

由表4可知，在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，正常對(duì)照組小鼠血漿ALT活力隨灌胃時(shí)間的延長(zhǎng)呈逐漸增加趨勢(shì)，但變化不明顯；與正常組對(duì)照組相比，灌胃0、4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，模型組小鼠的血漿ALT活力分別增加了58.48%、56.76%、84.97%、86.14%（P＜0.01），提示氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體出現(xiàn)肝損傷現(xiàn)象。相同灌胃時(shí)間下，桑葉生物堿各劑量組小鼠的血漿ALT活力均隨灌胃劑量的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。灌胃4、8、12 周后，在相同灌胃時(shí)間下，與模型組小鼠相比，陽性藥物組小鼠的血漿ALT活力分別降低了35.96%、49.26%、43.51%（P＜0.01），桑葉生物堿高劑量（200 mg/kgmb）組小鼠血漿ALT活力分別降低了32.27%、41.27%、41.97%（P＜0.01）。桑葉生物堿中、高劑量組小鼠血漿ALT活力較為接近，但均高于陽性藥物組和正常對(duì)照組，桑葉生物堿高劑量組小鼠血漿ALT活力與正常對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05），說明100 mg/kgmb以上的桑葉生物堿能夠使氧化應(yīng)激小鼠的血漿ALT活力恢復(fù)到正常狀態(tài)，且作用效果接近實(shí)驗(yàn)劑量的GSH水平，呈劑量依賴性，但無明顯時(shí)間依賴效應(yīng)。

由表5可知，在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，正常對(duì)照組小鼠血漿AST活力呈現(xiàn)逐漸增加趨勢(shì)，但變化較??；與正常對(duì)照組相比，灌胃0、4、8、12 周后，相同灌胃時(shí)間下，模型組小鼠血漿AST活力分別增加了170.94%、183.12%、216.07%、208.48%（P＜0.01），提示氧化應(yīng)激小鼠機(jī)體出現(xiàn)肝損傷現(xiàn)象。相同灌胃時(shí)間下，桑葉生物堿各劑量組小鼠的血漿AST活力均隨灌胃劑量的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。灌胃4、8、12 周后，在相同灌胃時(shí)間下，與模型組小鼠相比，陽性藥物組小鼠血漿AST活力分別降低了62.91%、66.78%、65.99%（P＜0.01），桑葉生物堿高劑量（200 mg/kgmb）組小鼠血漿AST活力分別降低了62.09%、65.92%、65.77%（P＜0.01）。桑葉生物堿高劑量組小鼠血漿AST活力與陽性藥物組接近，與正常對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05），說明200 mg/ kgmb桑葉生物堿降低血漿AST活力的作用達(dá)到實(shí)驗(yàn)劑量GSH水平，并能夠使氧化應(yīng)激小鼠血漿AST活力恢復(fù)到正常水平，其作用效果呈劑量依賴性，但無明顯時(shí)間依賴效應(yīng)。

表5 桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠血漿AST活力的影響Table 5 Effect of mulberry leaf alkaloids on plasma AST activity in mice suffering from oxidative stress IU/L

圖1 不同組小鼠肝組織病理切片圖（×200）Fig.1 Histopathological observation of liver tissue of mice in all groups (× 200)

由于桑葉生物堿能夠顯著降低ALT、AST活力，且無明顯時(shí)間依賴效應(yīng)，因此，選擇實(shí)驗(yàn)灌胃周期結(jié)束（12 周）時(shí)進(jìn)行小鼠肝臟病理學(xué)觀察。由圖1可知，正常對(duì)照組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)規(guī)整，肝細(xì)胞呈多邊形整體排列，細(xì)胞質(zhì)豐富，清亮透明，細(xì)胞核大而圓；注射D-Gal后，與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)不規(guī)整，肝細(xì)胞存在點(diǎn)狀壞死，細(xì)胞體積增大，細(xì)胞質(zhì)可見明顯疏松、腫脹；與模型組相比，陽性藥物組和桑葉生物堿各劑量組小鼠肝損傷情況明顯改善，且隨著劑量的增大，肝損傷程度降低，桑葉生物堿高劑量組小鼠肝組織狀態(tài)與陽性藥物組和正常對(duì)照組類似。

3 討 論

隨著對(duì)桑葉活性成分的深入研究，發(fā)現(xiàn)桑葉中的重要活性成分生物堿類化合物對(duì)桑葉的藥理作用具有關(guān)鍵作用。前期研究已證實(shí)桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激造成的生物大分子氧化損傷具有較好的改善作用，但桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激小鼠糖脂代謝、肝功能損傷的影響鮮有報(bào)道。本研究建立D-Gal誘導(dǎo)氧化應(yīng)激小鼠模型，研究桑葉生物堿對(duì)氧化應(yīng)激所致小鼠糖脂代謝與肝功能異常是否具有改善作用。

孫豐艷等[22]研究表明，隨著年齡增長(zhǎng)，機(jī)體中血糖、血脂（TG、TC）水平均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。本研究中，隨著喂飼時(shí)間的延長(zhǎng)，正常對(duì)照組小鼠空腹血糖、TG、TC濃度及ALT、AST活力均增加。當(dāng)機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激時(shí)，大量ROS導(dǎo)致糖脂代謝異常，血糖、血脂水平會(huì)有不同程度的升高[23-24]。本研究中模型組小鼠的測(cè)定結(jié)果也證實(shí)了此結(jié)論，并與Huang[25]、Do[26]等的研究結(jié)果一致。在本實(shí)驗(yàn)灌胃周期內(nèi)，桑葉生物堿調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激小鼠血糖和血脂水平的作用不具有明顯的時(shí)間依賴效應(yīng)，其原因有待深入研究。提示可從抑制氧化應(yīng)激的角度進(jìn)一步探討桑葉生物堿調(diào)節(jié)糖脂代謝異常的具體作用機(jī)理。

長(zhǎng)期肝損傷通常會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的肝臟病變以及不可逆的損傷，如肝纖維化、肝硬化，最終導(dǎo)致肝癌的發(fā)生[27]。研究證實(shí)，當(dāng)肝細(xì)胞及肝細(xì)胞線粒體發(fā)生損傷時(shí)，ALT、AST會(huì)被釋放進(jìn)入血液，血液中ALT、AST水平顯著升高，表明血液中ALT、AST水平與肝臟組織受損情況密切相關(guān)[28]。楊敏[29]的研究表明，正常組小鼠血漿ALT、AST活力呈基本穩(wěn)定狀態(tài)，隨著桑葉生物堿粗提液灌胃劑量的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，模型組小鼠血漿ALT、AST活力顯著降低（P＜0.05），且在實(shí)驗(yàn)劑量和周期范圍內(nèi)表現(xiàn)出顯著的劑量依賴效應(yīng)和時(shí)間依賴效應(yīng)。本研究中，氧化應(yīng)激導(dǎo)致小鼠肝臟發(fā)生損傷，血漿中ALT、AST活力極顯著升高（P＜0.01），隨著桑葉生物堿灌胃劑量的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，有效降低了模型組小鼠血漿ALT、AST活力，并且桑葉生物堿高劑量組小鼠的血漿ALT、AST活力恢復(fù)至正常水平，但在本實(shí)驗(yàn)劑量和周期范圍內(nèi)，僅表現(xiàn)出顯著的劑量依賴效應(yīng)，無明顯時(shí)間依賴效應(yīng)，這與楊敏[29]研究結(jié)果存在差異，原因有待進(jìn)一步探討。有研究表明，桑葉生物堿中的特征物質(zhì)1-脫氧野尻霉素可通過促進(jìn)血脂血糖的轉(zhuǎn)運(yùn)來改善小鼠肝損傷[30]。本研究結(jié)果表明，桑葉生物堿通過抑制氧化應(yīng)激作用，從而調(diào)節(jié)糖脂代謝，改善肝損傷，但其具體作用的氧化應(yīng)激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路尚不明確。

綜上認(rèn)為，桑葉生物堿可以改善氧化應(yīng)激導(dǎo)致的糖脂代謝異常和肝損傷，其機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。該研究結(jié)果有助于為研究糖脂代謝異常的發(fā)生原因及改善糖脂代謝異常、保護(hù)肝功能提供新思路。