李 敏，李 飛，李崇清，孟慶峰，賈澤峰▲

(1聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東 聊城 252059；2貴州習(xí)水國家級自然保護(hù)區(qū)管理局，貴州 遵義 564600；3遵義醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，貴州 遵義 563000)

貴州習(xí)水國家級自然保護(hù)區(qū)位于貴州省北部，地處習(xí)水縣境內(nèi)西北部，東經(jīng)105°50′～106°29′，北緯28°07′～28°34′，海拔在420～1756 m之間，以中亞熱帶常綠闊葉林森林生態(tài)系統(tǒng)為主要保護(hù)對象，是目前貴州省面積最大的國家級自然保護(hù)區(qū)。區(qū)內(nèi)巖石主要為紅砂巖；水系屬長江水系，主要河流為赤水河和習(xí)水河；土壤系紫色土最多；屬亞熱帶濕潤季風(fēng)性氣候；年降水量在900～1300 mm之間；動(dòng)植物資源豐富[1]。然而，該地區(qū)的地衣型真菌不曾有人報(bào)道過，尚為空白。

地衣型真菌，簡稱地衣，是真菌與藻類和/或藍(lán)細(xì)菌共生而形成的復(fù)合體，共生菌為光合生物(藻類或藍(lán)細(xì)菌)提供可溶性礦物鹽和可逆保護(hù)，光合生物提供給共生菌碳素營養(yǎng)[2]。目前世界范圍內(nèi)記載的地衣型真菌有28000余種[3-5]；中國記載有3000余種[6]。地衣型真菌在食用、藥用、生化試劑和冰核降雨等方面具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值[7-10]。

本研究對采自貴州習(xí)水自然保護(hù)區(qū)的200余份標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)、解剖學(xué)、化學(xué)、地理學(xué)和分子生物學(xué)方面等分類學(xué)研究，共鑒定出16科22屬，其中貴州省新記錄3個(gè)，即斑果裂衣(Chapsaleprocarpa)，錫蘭裂隙衣(Fissurinacingalina)和扁果黑文衣(Phaeographisplatycarpa)，該研究填補(bǔ)了該保護(hù)區(qū)內(nèi)地衣型真菌物種多樣性研究之空白，為其進(jìn)一步研發(fā)提供了基礎(chǔ)資料。

1 實(shí)驗(yàn)材料

所用材料為采自貴州習(xí)水國家級自然保護(hù)區(qū)的200余份地衣標(biāo)本，現(xiàn)全部保存于聊城大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院地衣標(biāo)本館。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 形態(tài)及解剖學(xué)研究

在形態(tài)學(xué)研究中使用體視顯微鏡OLYMPUS SZX16對地衣的外部形態(tài)進(jìn)行了觀察；在解剖學(xué)研究中使用光學(xué)顯微鏡OLYMPUS BX53對地衣子囊器結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察。

2.2 化學(xué)研究

綜合化學(xué)顯色反應(yīng)法和薄層色譜法對地衣的代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定[11-14]。

2.3 分子生物學(xué)研究

以高效植物基因組DNA提取試劑盒提取的地衣DNA為模板，分別用ITS1F、ITS4和AL2R、LR6作為引物擴(kuò)增其ITS和LSU序列，送鉑尚生物技術(shù)有限公司(濟(jì)南)測序后，通過NCBI進(jìn)行blast。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過分類學(xué)研究，共鑒定出16科22屬地衣，如表1所示。

表1 貴州習(xí)水國家級自然保護(hù)區(qū)地衣型真菌科屬統(tǒng)計(jì)Tab.1 Checklist of families and genera of lichenized fungi in Xishui National Nature Reserve in Guizhou

貴州新記錄種：

3.1 錫蘭裂隙衣(圖1)

Fissurinacingalina(Nyl.)Staiger，Biblthca Lichenol.85：128(2002).

≡Graphinacingalina(Nyl.)Zahlbr.，Cat.Lich.Univers.2：401(1923)[1924].

≡GraphiscingalinaNyl.，Acta Soc.Sci.Fenn.26(10)：21(1900).

A：地衣體和子囊果；B：子囊果縱切；C：子囊和孢子標(biāo)尺：A=1 mm；B=50 μm；C=100 μm。圖1 錫蘭裂隙衣Fig.1 Fissurina cingalina

地衣體樹皮生，殼狀，具裂縫，表面灰綠色，光滑，有光澤。

子囊果線狀，黃褐色，單一，時(shí)具常分支，埋生，長1.8～2.5 mm，寬約0.2 mm。盤面閉合至裂縫狀。固有盤被與地衣體同色；體質(zhì)盤被不炭化，囊層被不明顯；子囊層無色，清晰狀，高95～150 μm；囊層基無色，15～20 μm。子囊梭形，含8個(gè)孢子；子囊孢子無色透明，磚壁型，橢圓形，常在一段加寬，20～30 μm×9～16 μm，具光暈，非淀粉質(zhì)。

化學(xué)：地衣體 K+黃褐色，C-，P-；薄層色譜法未檢測出。

標(biāo)本：丹霞谷，1130～1145 m，樹皮，GZ19525、GZ19526、GZ19527、GZ19528、GZ19529、GZ19559。

文獻(xiàn)記載：福建、云南[15]。

分布：東方泛熱帶[15]，印度、斯里蘭卡、委內(nèi)瑞拉、巴西[16]。

討論：該種主要特征是子囊果黃褐色，盤面閉合至裂縫狀，子囊含8個(gè)孢子，子囊孢子磚壁型，無色透明。該種與Fissurinaadscribenshe和Fissurina.columbina相似，不同的是Fissurinaadscribenshe皮層無裂縫且子囊孢子更窄，而Fissurinacolumbina子囊果突生且分支不規(guī)則，子囊孢子淀粉質(zhì)[15]。

3.2 扁果黑文衣(圖2)

PhaeographisplatycarpaMüll.Arg.，Bot.Jb.20：284(1894).

D：地衣體和子囊果；E：子囊果縱切；F：子囊和孢子標(biāo)尺：D=0.5 mm；E=200 μm；F=50 μm。圖2 扁果黑文衣Fig.2 Phaeographis platycarpa

地衣體樹皮生，殼狀，黃綠色至淺黃褐色，表面光滑，有光澤。

子囊盤線狀，灰黑色，半埋生至貼生，簇生，單一至具分支，長1.5～4.5 mm，寬約0.25 mm；盤唇發(fā)育不良；盤面可見，灰褐色，微覆有灰白色粉霜。盤被不明顯；囊層被褐色，厚20～26 μm；子囊層滲入狀，高 80～100 μm，非淀粉質(zhì)；囊層基微褐色，40～50 μm。子囊棒狀，含8個(gè)孢子，子囊孢子淺褐色，橫隔透鏡型，長橢圓形，22～30 μm×6～10 μm，淀粉質(zhì)。

化學(xué)：地衣體 K+紅褐，C-，P+黃色；薄層色譜法檢測到norstictic acid。

標(biāo)本：丹霞谷，1130～1160 m，樹皮，GZ19534、GZ19535、GZ19556-1。

文獻(xiàn)記載：海南[14]。

世界分布：泛熱帶分布[14]，巴西、坦桑尼亞、澳大利亞[17]。

討論：該種主要特征是線盤簇生、盤被不明顯或缺乏，子實(shí)層滲入狀，子囊孢子橫隔透鏡型、淺褐色、具6～8胞室、22～30 μm×6～10 μm，含norstictic acid。該種與Paeographisdendritica和Paeographisintricans近似，不同之處是Paeographisdendritica子實(shí)層 I+紅褐色至紫褐色、線盤不呈現(xiàn)簇生狀，而Paeographisintricans具明顯的子座區(qū)域、較小的子囊孢子(15～20 μm×5～7 μm)[14]。

3.3 斑果裂衣(圖3)

Chapsaleprocarpa(Nyl.)Frisch，Biblthca Lichenol.92：108(2006).

≡Graphinaleprocarpa(Nyl.)Zahlbr.，Cat.Lich.Univers.2：412(1923)[1924].

≡GraphisleprocarpaNyl.，Acta Soc.Sci.Fenn.7(2)：472(1863).

≡Thelotremaleprocarpum(Nyl.)Tuck.，Gen.Lich.(Amherst)：139(1872).

G：地衣體和子囊果；H：子囊果縱切；I：子囊和孢子標(biāo)尺：G=1 mm；H=100 μm；I=50 μm。圖3 斑果裂衣Fig.3 Chapsa leprocarpa

地衣體樹皮生，殼狀，連續(xù)，表面淺灰色到灰綠色，輕微不平至具疣體，無皮層。

子囊盤有角到輕微加長，直徑0.3～1.5 mm，邊緣高起，深裂到具裂片，裂片后彎，具白色氈狀的內(nèi)表面；盤面褐色，覆有白色粉霜。盤被杯狀；囊層被無色，8～15 μm高；子囊層無色，非滲入狀，高100～150 μm；側(cè)絲單一，頂部念珠狀；緣絲長達(dá)40 μm。子囊棒狀，含1個(gè)孢子；子囊孢子無色，磚壁型，60～110 μm×20～40 μm，輕微光暈，非淀粉質(zhì)。

化學(xué)：地衣體 K+黃，C-，P-；薄層色譜法未檢測出。

標(biāo)本：丹霞谷，1145 m，樹皮，GZ19520、GZ19521、GZ19522、GZ19530、GZ19531、GZ19536、GZ19537、GZ19538。

文獻(xiàn)記載：廣西[18]。

世界分布：泛熱帶分布到亞熱帶[18]；喀麥隆、坦桑尼亞、斯里蘭卡、婆羅洲、美國、巴西[18]。

討論：該種的主要特征是地衣體無皮層，表面淺灰色到灰綠色，子囊盤具后彎的裂片，盤面覆有白色粉霜，子囊含1個(gè)孢子，子囊孢子磚壁型，60～110 μm×20～40 μm，不含地衣化學(xué)。該種與Chapsaniveocarpa和Chapsapatens相似，不同的是Chapsaniveocarpa子實(shí)層滲入狀，子囊含1(2)個(gè)孢子，子囊孢子更大(80～190 μm×20～50 μm)[19]，Chapsapatens海拔更高，子實(shí)層更厚，子囊孢子更大[20]。

4 地衣型真菌名錄

(一)Cladoniaceae 石蕊科

(1)Cladia篩蕊屬

1)Cladiaaggregata(Sw.)Nyl.聚篩蕊

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，土層，GZ19498；天鵝池，950 m，土層，GZ19458；天鵝池，950 m，石生，GZ19477。

(2)Cladonia石蕊屬

1)CladoniafenestralisNuno 繁鱗石蕊

標(biāo)本：天鵝池，950～960 m，土層，GZ19465、GZ19466、GZ19467、GZ19483、GZ19485。

2)CladoniamacilentaHoffm.瘦柄紅石蕊

標(biāo)本：天鵝池，960 m，布條，GZ19486、GZ19491；天鵝池，960 m，土層，GZ19488；天鵝池，960～1230 m，腐木，GZ19489、GZ19490、GZ19552、GZ19553。

3)CladoniarappiiA.Evans 寬杯石蕊

標(biāo)本：藺江村，640 m，土層，GZ19580。

4)CladoniasubconisteaAsahina 擬小杯石蕊

標(biāo)本：天鵝池，950 m，土層，GZ19456。

(二)Collemataceae 膠衣科

(1)Collema膠衣屬

標(biāo)本：天鵝池，950 m，土層，GZ19479。

(三)Gomphillaceae 楔形衣科

(1)Tricharia毛蠟衣屬 (該屬貴州未有報(bào)道，曾報(bào)道于香港、云南和臺灣[6])

標(biāo)本：丹霞谷，1040～1160 m，樹葉，GZ19500、GZ19501、GZ19541、GZ19542。

(四)Graphidaceae 文字衣科

(1)Fissurina裂隙衣屬

1)Fissurinacingalina(Nyl.)Staiger 錫蘭裂隙衣(貴州新記錄)

標(biāo)本：丹霞谷，1130～1145 m，樹皮，GZ19525、GZ19526、GZ19527、GZ19528、GZ19529、GZ19559。

(2)Graphis文字衣屬

1)GraphisassimilisNyl.黑脈文字衣

標(biāo)本：藺江村，850 m，樹皮，GZ19571。

2)GraphiscognataMüll.Arg.鈍盤文字衣

標(biāo)本：丹霞谷，1130 m，樹枝，GZ19556、GZ19557、GZ19558。

3)GraphisimmersicansA.W.Archer 半陷文字衣

標(biāo)本：藺江村，850 m，樹皮，GZ19569、GZ19570。

4)GraphislongirameaMüll.Arg.長枝文字衣

標(biāo)本：丹霞谷，1130 m，樹皮，GZ19519。

5)GraphisoligosporaZahlbr.寡孢文字衣

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，樹皮，GZ19511。

6)GraphissubdisserpensNyl.亞紋皮文字衣

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，樹皮，GZ19506。

7)GraphisvittataMüll.Arg.條紋文字衣

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，樹皮，GZ19512。

(3)Phaeographis黑文衣屬

1)Phaeographisintricans(Nyl.)Staiger 纏結(jié)黑文衣

標(biāo)本：藺江村，850 m，樹皮，GZ19565、GZ19566、GZ19567、GZ19568、GZ19576、GZ19577。

2)PhaeographisplatycarpaMüll.Arg.扁果黑文衣(貴州新記錄)

標(biāo)本：丹霞谷，1130～1160 m，樹皮，GZ19534、GZ19535、GZ19556-1。

(五)Lecanoraceae茶漬科

(1)Lecanora茶漬屬

1)LecanorapacificaTuck.太平洋茶漬

標(biāo)本：藺江村，850 m，樹皮，GZ19574。

(六)Lecideaceae 網(wǎng)衣科

(1)Porpidia假網(wǎng)衣屬

1)Porpidiaalbocaerulescens(Wulfen)Hertel & Knoph 白蘭假網(wǎng)衣

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，石生，GZ19505。

(七)Opegraphaceae 孔文衣科

(1)Cresponea雞冠衣屬 (該屬貴州未有報(bào)道，曾報(bào)道于香港和臺灣[6])

標(biāo)本：天鵝池，640～1050 m，石生，GZ19492、GZ19495、GZ19450、GZ19581、GZ19582。

(八)Parmeliaceae 梅衣科

(1)Parmotrema大葉梅屬

1)Parmotremacetratum(Ach.)Hale 睫毛大葉梅

標(biāo)本：天鵝池，950 m，土層，GZ19462、GZ19475；藺江村，640 m，樹皮，GZ19587。

(2)Punctelia星點(diǎn)梅屬

1)Puncteliaborreri(Turner)Krog 粉斑星點(diǎn)梅

標(biāo)本：天鵝池，1050 m，石生，GZ19446。

2)Puncteliarudecta(Ach.)Krog 粗星點(diǎn)梅

標(biāo)本：天鵝池，970 m，石生，GZ19453；天鵝池，950 m，土層，GZ19459、GZ19461、GZ19464、GZ19470、GZ19476。

(3)Usnea松蘿屬

標(biāo)本：天鵝池，960 m，土層，GZ19487；天鵝池，1050 m，樹皮，GZ19497。

(九)Peltigeraceae 地卷科

(1)Peltigera地卷屬

1)Peltigeracanina(L.)Willd.犬地卷

標(biāo)本：天鵝池，950 m，土層，GZ19471；丹霞谷，1130～1230 m，土層，GZ19544、GZ19548、GZ19555、GZ19551；藺江村，640 m，土層，GZ19578、GZ19588。

2)Peltigerahymenina(Ach.)Delise 赭腹地卷

標(biāo)本：天鵝池，950 m，土層，GZ19455；丹霞谷，1040 m，土層，GZ19504。

(十)Pertusariaceae 雞皮衣科

(1)Pertusaria雞皮衣屬

標(biāo)本：天鵝池，950 m，石生，GZ19463、GZ19472、GZ19473、GZ19484。

(十一)Physciaceae 蜈蚣衣科

(1)Heterodermia啞鈴孢屬

1)Heterodermiaobscurata(Nyl.)Trevis.暗啞鈴孢

標(biāo)本：藺江村，640 m，土層，GZ19584。

2)Heterodermiapseudospeciosa(Kurok.)W.L.Culb.擬啞鈴孢

標(biāo)本：藺江村，640 m，土層，GZ19583。

(十二)Porinaceae 污核衣科

(1)Porina污核衣屬

標(biāo)本：丹霞谷，1145～1160 m，樹皮，GZ19524、GZ19539、GZ19540。

(十三)Ramalinaceae 樹花衣科

(1)Bacidia桿孢衣屬

標(biāo)本：丹霞谷，1160 m，樹皮，GZ19532、GZ19533。

(十四)Stereocaulaceae 珊瑚枝科

(1)Lepraria癩屑衣屬

標(biāo)本：丹霞谷，1040 m，樹皮，GZ19499、GZ19502；天鵝池，1050 m，土層，GZ19448。

(2)Stereocaulon珊瑚枝屬

標(biāo)本：天鵝池，960 m，土層，GZ19482。

(十五)Thelotremataceae 疣孔衣科

(1)Chapsa裂衣屬

1)Chapsaleprocarpa(Nyl.)Frisch 斑果裂衣 貴州新記錄

標(biāo)本：丹霞谷，1145 m，樹皮，GZ19520、GZ19521、GZ19522、GZ19530、GZ19531、GZ19536、GZ19537、GZ19538。

(十六)Verrucariaceae 瓶口衣科

(1)Verrucaria瓶口衣屬

標(biāo)本：藺江村，590 m，石生，GZ19635、GZ19636。

5 致謝

感謝國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31750001)的經(jīng)費(fèi)支持；感謝習(xí)水國家級自然保護(hù)區(qū)管理局所有工作人員的支持；感謝給予本研究提供材料的所有標(biāo)本采集者。