趙振剛

（吉林省吉林市人民醫(yī)院 病理科，吉林 吉林 132001）

0 引言

隨著人們生活環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)、生活壓力等的不斷變化，腫瘤的發(fā)病率在臨床上不斷的增加。腫瘤是指機(jī)體中正常細(xì)胞在不同的始動因素與促進(jìn)因素長期作用下，所產(chǎn)生的增生與異常分化所形成的新生物[1]。腫瘤一般分為良性腫瘤和惡性腫瘤，良性腫瘤可以通過藥物和手術(shù)進(jìn)行有效的治療；惡性腫瘤進(jìn)入中晚期一般錯過了最佳的治療時期，預(yù)后差，患者一般只能夠通過化療等來延長生命[2]。冰凍切片技術(shù)是臨床診斷腫瘤疾病常用的病理學(xué)診斷方法，其利用低溫冰凍病灶組織，對病灶組織實(shí)施切片、固定、染色等處理，通過顯微鏡觀察和判斷腫瘤性質(zhì)，為手術(shù)治療提供依據(jù)[3]。鑒于此，本文將1900 例腫瘤病理標(biāo)本為例進(jìn)行分析，總結(jié)冷凍切片技術(shù)的方法，試探討其對疾病病理診斷的影響，報(bào)告具體內(nèi)容請看下文。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究例數(shù)有1900 例，研究時間在2019 年11月至2020 年11 月，觀察對象是腫瘤病理標(biāo)本，對比分為兩組，各950 例。對照組中男性標(biāo)本例數(shù)與女性標(biāo)本例數(shù)各自為500 例、450 例；患者年齡為28～55 歲，平均（41.23±2.11）歲；標(biāo)本類型：卵巢260 例、子宮240 例、淋巴結(jié)220 例、乳腺130例、甲狀腺100 例。研究組中男性標(biāo)本與女性標(biāo)本的構(gòu)成比為511:439；患者年齡為27～55 歲，平均（40.58±2.14）歲；標(biāo)本類型：卵巢270 例、子宮250 例、淋巴結(jié)210 例、乳腺120 例、甲狀腺100 例。對比分析兩組的各項(xiàng)信息，具有可比性（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①1900 例標(biāo)本主人同意實(shí)施手術(shù)治療；②經(jīng)告知后所有標(biāo)本主人均自愿參與，并簽署相關(guān)文件；③本次研究獲取倫理委員會的審核通過。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①標(biāo)本主人的心、肝、腎等器官存在嚴(yán)重器質(zhì)性病變；②標(biāo)本主人近段時間接受過重大手術(shù)治療，無法再次實(shí)施手術(shù)治療；③標(biāo)本主人的精神異常，聽覺與語言存在障礙，不能配合完成標(biāo)本采集。

1.2 方法

1900 例腫瘤病理標(biāo)本收集完成后，放入恒溫式冰凍切片機(jī)中，將提前準(zhǔn)備好的濃度為95%的乙醇90 mL+濃度為10%的甲醛5mL 加入恒溫式冰凍切片機(jī)中，隨后開展相應(yīng)的檢測。

研究組開展冰凍切片技術(shù)處理，詳細(xì)方法為：（1）標(biāo)本的選擇與保存。①在手術(shù)過程中，需要保證標(biāo)本適中且新鮮，標(biāo)本組織大小為15mm×15mm，厚度維持在0.2～0.5cm，在獲取標(biāo)本的時候，注意不要損傷周圍組織，并且盡量避開壞死組織和出血部位。②標(biāo)本收集好后，需要將標(biāo)本放置在冷凍的環(huán)境，結(jié)合實(shí)際需求和標(biāo)本的抗寒程度，合理調(diào)節(jié)冷凍環(huán)境的溫度。通常情況下，乳腺的冷凍溫度控制在-29～-21℃；卵巢的冷凍溫度維持在-21～-19℃；淋巴結(jié)、肝臟以及腎臟的冷凍溫度保持在-18～-17℃。冷凍時間≤3min，但是肝臟、淋巴結(jié)和甲狀腺的冷凍時間控制在2～2.5min。（2）標(biāo)本切片處理。①取出標(biāo)本后進(jìn)行切片處理，首先將標(biāo)本放置在玻璃片上，加入固定液對標(biāo)本進(jìn)行固定處理，固定時間大約為1min；②隨后采用清水沖洗標(biāo)本，確保固定液沖洗干凈后加入提前預(yù)溫的蘇木精，靜置2min 后進(jìn)行水洗，采用鹽酸分化與水洗，放入溫開水中呈現(xiàn)藍(lán)色，隨后加入水溶性伊紅進(jìn)行水洗；③加入梯度乙醇進(jìn)行脫水處理，隨后采用水風(fēng)機(jī)將乙醇吹干，最后進(jìn)行封片處理。

對照組展開常規(guī)石蠟切片技術(shù)處理，具體方法為：標(biāo)本的選擇與保存方法同冰凍切片技術(shù)相同，術(shù)后將標(biāo)本放入濃度為10%的福爾馬林溶液+二甲苯中，開火進(jìn)行煮沸，煮沸后吸掉標(biāo)本上的溶液，隨后放入丙酮溶液中再次進(jìn)行煮沸，煮沸后再次吸掉標(biāo)本上的溶液，最后將標(biāo)本放入溫度為70℃的石蠟溶液中進(jìn)行制片，大約30min 后完成制片。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）將手術(shù)病理學(xué)檢查作為參照標(biāo)準(zhǔn)，對比分析兩組的檢測結(jié)果，仔細(xì)記錄惡性腫瘤、良性腫瘤以及交界性腫瘤的例數(shù)，計(jì)算總確診率。

（2）觀察兩種切片技術(shù)的檢測質(zhì)量，邀請本院2 名資深病理學(xué)醫(yī)師進(jìn)行評估，主要評估清晰度、細(xì)胞形態(tài)以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行打分，每項(xiàng)為10 分，分?jǐn)?shù)越高，評定為檢測質(zhì)量越良好。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究所得數(shù)據(jù)均錄入至Excel 2010 中予以校對，采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行處理，（）表示計(jì)量資料，（%）表示計(jì)數(shù)資料，用t和χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 評價分析兩種切片技術(shù)的檢測結(jié)果

從表1 的結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，在準(zhǔn)確率上，對比對照組（84.21%），研究組（96.84%）明顯更高，差異較大（P＜0.05）。

表1 評價分析兩種切片技術(shù)的檢測結(jié)果[n(%)]

2.2 對比分析兩種切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)的差異

從表2 的結(jié)果能夠看出，在清晰度評分、細(xì)胞結(jié)構(gòu)評分以及細(xì)胞形態(tài)評分上，研究組高于對照組（P＜0.05）。

表2 對比分析兩種切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)的差異（,分）

表2 對比分析兩種切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)的差異（,分）

3 討論

近年來，腫瘤的患病人數(shù)不斷增加，死亡率也在不斷提高，已成為人口死亡的重要疾病原因。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，腫瘤的患病率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢，其中胃癌、腸道癌均位于我國發(fā)病率排行榜前幾名，對患者家庭以及社會均造成了極大的困擾[4]。很多腫瘤疾病的早期癥狀不明顯，等到引起患者的注意，確診的時候已經(jīng)處于晚期，降低了臨床治療效果，提高了患者的病死率，給患者的身體健康與生命安全構(gòu)成極大的威脅[5]。故臨床加強(qiáng)對腫瘤疾病的檢查是非常重要的。

隨著臨床醫(yī)學(xué)水平的發(fā)展與完善，病理學(xué)技術(shù)也發(fā)展迅速，在疾病診斷與鑒別中發(fā)揮著重要的作用，已成為腫瘤疾病的重要檢查手段。常規(guī)石蠟切片是一種常規(guī)病理學(xué)檢測技術(shù)，但是檢測效果不理想。而冰凍切片技術(shù)是指取出標(biāo)本后快速冷凍，冷凍到一定的硬度后進(jìn)行切片，該技術(shù)可以保存標(biāo)本的酶活性和結(jié)構(gòu)，方便后期病理學(xué)檢查[6]。根據(jù)操作方法的不同，冰凍切片技術(shù)分為：①低溫恒冷箱冰凍切片；②甲醇循環(huán)制冷凍切片；③二氧化碳冰凍切片；其中低溫恒冷箱冰凍切片的應(yīng)用范圍最廣、效果最佳。冰凍切片技術(shù)的操作過程簡單，不需要進(jìn)行固定、脫水和包埋等，可有效縮短制片時間；該技術(shù)不會影響標(biāo)本組織的結(jié)構(gòu)、類脂以及脂肪等成分，可以準(zhǔn)確判斷腫瘤疾病的良性和惡性，方便后續(xù)方案的制定[7]。呂雪瓊等[8]在研究中發(fā)現(xiàn)冰凍切片技術(shù)用于腫瘤疾病的診斷效果顯著，能夠準(zhǔn)確診斷出腫瘤的良惡性，這與本次研究結(jié)果相似。本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組經(jīng)冰凍切片技術(shù)檢查后，其準(zhǔn)確率明顯高于采用常規(guī)石蠟切片技術(shù)檢測的對照組（P＜0.05），提示冰凍切片技術(shù)檢測的診斷效果更佳。

王曉艷[9]在一項(xiàng)研究中將56 份病理組織樣本作為研究對象，經(jīng)快速冷凍切片技術(shù)與常規(guī)石蠟切片技術(shù)處理后，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在清晰度、細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞形態(tài)評分上，快速冰凍（8.34±0.64）分、（8.11±1.02）分、（8.51±0.56）分明顯高于常規(guī)石蠟（6.27±1.20）分、（7.02±0.85）分、（6.84±1.25）分，這與本次研究結(jié)果相似。本次研究發(fā)現(xiàn)，在清晰度評分、細(xì)胞結(jié)構(gòu)評分以及細(xì)胞形態(tài)評分上，研究組高于對照組（P＜0.05），表明冰凍切片技術(shù)可以更加清晰地觀察標(biāo)本組織的細(xì)胞形態(tài)與細(xì)胞結(jié)構(gòu)，提高切片質(zhì)量，從而提升檢出率。需要注意的是，雖然冰凍切片技術(shù)的病理診斷價值較高，但是在實(shí)際操作過程中制成連續(xù)切片和較薄的切片較為不易，若是操作人員在冷凍過程與切片過程中的操作不規(guī)范都會影響檢測結(jié)果，比如：①切片獲取標(biāo)本組織的體積過大會影響切片和染色效果；②冷凍時間過長，會導(dǎo)致標(biāo)本出現(xiàn)水結(jié)晶情況，從而影響組織細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)以及清晰度[10]。因此，需要嚴(yán)格要求病理科技術(shù)人員，定期組織技術(shù)人員進(jìn)行學(xué)習(xí)和培訓(xùn)，確?？梢允炀氄莆绽鋬銮衅夹g(shù)，防止出現(xiàn)誤差，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與真實(shí)性。

綜上所述，相較于常規(guī)石蠟切片技術(shù)，冰凍切片技術(shù)用于腫瘤病理的診斷效果理想，檢出率更高，可以更加清晰地觀察到組織細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，準(zhǔn)確判斷出良惡性腫瘤，為后續(xù)治療提供參考，具有較好的臨床推廣意義。