忽欣怡，李雲(yún)，李學(xué)堯，傅思武，聶蕾，劉瑋瑋

（西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)部，甘肅 蘭州 730030）

0 引言

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019 年12 月至2020 年2 月大理地區(qū)三甲醫(yī)院（主要為大理大學(xué)第一附屬醫(yī)院）內(nèi)6 歲以下腹瀉患兒門(mén)診糞便標(biāo)本297 份，其中男性170份，女性127 份；0 ≤x＜1 歲263 份（88.55%），1≤x＜3歲24份（8.08%），3≤x≤6 歲10份（3.37%）。297 份標(biāo)本中白族兒童有112 份，白族男性63 份，白族女性49 份；0 ≤x＜1 歲104 份（92.86%），1 ≤x＜3 歲6 份（5.36%），3 ≤x ≤6 歲2 份（1.79%）。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≤6 歲；24h 排便≥3 次，且大便性狀改變（呈稀便、水樣便等）[2]，所有患兒監(jiān)護(hù)人均知情同意并簽署同意書(shū)。

1.2 試劑儀器

輪狀病毒/腺病毒抗原檢測(cè)試劑盒（乳膠法）（杭州艾博生物醫(yī)藥有限公司），血瓊脂平板、麥康凱平板、念珠菌平板（鄭州安圖生物工程股份有限公司），革蘭氏陽(yáng)性、陰性細(xì)菌藥敏卡（法國(guó)生物梅里埃公司），牛腦心浸液培養(yǎng)基（天和生物），全自動(dòng)微生物鑒定儀（型號(hào)：VITEK 2 Compact，法國(guó)生物梅里埃公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 鏡檢篩查寄生蟲(chóng)感染。

1.3.2 細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定

標(biāo)本于牛腦心浸液培養(yǎng)基內(nèi)增菌，24h 后分別接種于血平板和麥康凱平板，37℃培養(yǎng)24h 后選擇疑似致病菌的菌落進(jìn)一步分純（如：血平板有疑似念珠菌的灰白色隆起菌落，可進(jìn)行格蘭染色確認(rèn)后接種于念珠菌顯色平板上）。相關(guān)操作參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]進(jìn)行。已分離純化的病原菌用全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)VITEK 2 Compact 進(jìn)行鑒定。

1.3.3 病毒學(xué)檢測(cè)

輪狀病毒和腸道腺病毒檢測(cè)采用金標(biāo)及乳膠免疫層析法，具體操作步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0 軟件，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，檢出率的組間比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大理地區(qū)三甲醫(yī)院6 歲以下腹瀉患兒檢測(cè)情況

297 份標(biāo)本經(jīng)病原檢測(cè)陽(yáng)性為107 份，檢出率為36.03%。其中輪狀病毒（HRV）檢出94 例，檢出率最高，達(dá)31.65%（94/297），見(jiàn)表1。3 個(gè)年齡組中檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），不同性別兒童的檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

綜合以上實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，設(shè)計(jì)出生長(zhǎng)準(zhǔn)有序氮化鎵納米線的兩步生長(zhǎng)法：使用2nm/2nm鎳-金雙層薄膜作為催化劑，第一步在850℃生長(zhǎng)10s得到有序的但長(zhǎng)度較短的納米線，作為有序納米線“幼苗”；第二步將溫度降低到750℃生長(zhǎng)200s，得到表面光滑，方向性好的有序納米線。

2.2 白族兒童檢測(cè)情況

白族兒童112 份腹瀉標(biāo)本中經(jīng)病原檢測(cè)陽(yáng)性為37 份，檢出率為33.04%。其中輪狀病毒（RV）檢出31 例，檢出率最高，達(dá)27.68%（31/112），見(jiàn)表3。3 個(gè)年齡組中檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），不同性別兒童的檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）見(jiàn)表4。

表1 297 例腹瀉患兒病原微生物檢出率及構(gòu)成情況（n,%）

表2 297 例腹瀉患兒病原微生物年齡、性別分布（n,%）

表3 112 例白族腹瀉患兒病原微生物檢出率及構(gòu)成情況（n,%）

表4 112 例白族腹瀉患兒病原微生物年齡、性別分布（n,%）

2.3 白族和其他民族患兒檢測(cè)情況

107 例病原陽(yáng)性標(biāo)本病原微生物民族分布情況見(jiàn)表5。

表5 107 例病原陽(yáng)性標(biāo)本病原微生物民族分布[n(%)]

3 討論

3.1 研究意義

腹瀉?。―iarrhea）是由多種病因引起的以大便次數(shù)增多（每天＞3 次）和大便性狀改變（稀便或水樣大便）為主要特征的消化道綜合征。全球每年約有17 億例兒童腹瀉病的發(fā)生，每年約有52.5 萬(wàn)名5歲以下兒童死于腹瀉病，是5 歲以下兒童死亡的第二大原因[4]。2019 年中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)指出中國(guó)0～5 歲兒童過(guò)去2 周內(nèi)腹瀉發(fā)生率為7.5%，處于較高水平，且受年齡、城鄉(xiāng)、母親教育程度、家庭人均收入等多因素的影響[5]。加之白族的飲食結(jié)構(gòu)與生活習(xí)慣與其他地區(qū)人群相比有所不同，且經(jīng)濟(jì)相對(duì)落后、疾病預(yù)防意識(shí)淡薄、高原山區(qū)氣候多變等，兒童腹瀉發(fā)病率高。且目前尚無(wú)此方面的研究，臨床缺乏基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)支撐。因此開(kāi)展云南大理白族兒童冬季腹瀉病原學(xué)監(jiān)測(cè)工作意義重大，可為該地區(qū)兒童冬季腹瀉的防控提供數(shù)據(jù)參考。

3.2 結(jié)果分析

3.2.1 大理地區(qū)三甲醫(yī)院6 歲以下腹瀉患兒檢測(cè)情況

本研究顯示，大理地區(qū)297 份兒童腹瀉標(biāo)本病原檢出率為36.03%（107/297），其中病毒占94.39%（101/107），細(xì)菌占1.87%（2/107），真菌占2.80%（3/107），輪狀病毒合并豬帶絳蟲(chóng)感染占0.93%（1/107）。主要集中分布于0～1 歲嬰兒，占85.05%（91/107）。

3.2.2 白族兒童檢測(cè)情況

112 份白族兒童腹瀉標(biāo)本病原檢出率為33.04%，病毒占89.19%（33/37），細(xì)菌占2.70%（1/37）,真菌占5.41%（2/37），輪狀病毒合并豬帶絳蟲(chóng)感染占2.70%（1/37）。說(shuō)明2019 年12 月至2020 年2 月云南大理白族兒童冬季腹瀉病原微生物以病毒為主（尤其是輪狀病毒HRV，陽(yáng)性占比83.78%），這與本研究中所有6 歲以下腹瀉兒童病原檢測(cè)情況一致，也與上海等地區(qū)研究結(jié)果一致[6]。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)，全球每年約有45.34 萬(wàn)5 歲以下兒童死于輪狀病毒感染所致的腹瀉，死亡率約為5.00%[7]。這可能與輪狀病毒主要通過(guò)空氣和接觸被污染物進(jìn)行傳播、傳播速度快、有2～3d 潛伏期，且侵犯人體腸道后易誘發(fā)腸道壞死，造成嚴(yán)重的水、電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂有關(guān)[8]。從年齡分布來(lái)看，陽(yáng)性占比最高為0 ≤x＜1 歲組（83.78%），且3 歲以下患兒陽(yáng)性占比（94.59%）明顯高于3 歲以上患兒，這可能與3歲以下嬰幼兒從母體獲取的IgG 抗體逐漸消耗殆盡，而特異性IgM 抗體產(chǎn)生不足，免疫功能尚未發(fā)育成熟有關(guān)。這與國(guó)內(nèi)報(bào)道有所不同，朱佩強(qiáng)[9]研究顯示1 ≤x＜3 歲年齡組檢出率最高，造成不同的原因除了地區(qū)差異外還可能和本研究樣本量較少致使數(shù)據(jù)不夠具有代表性有關(guān)。而從性別分布來(lái)看，白族兒童男女檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.939＞0.05），提示白族兒童腹瀉檢出率對(duì)于不同性別無(wú)差異。

3.2.3 各民族分布情況

從表5 可知，107 例陽(yáng)性病例中，漢族和白族兒童最多，且所有民族病原陽(yáng)性占比最高均為輪狀病毒。此外，檢出的所有福氏志賀菌、豬帶絳蟲(chóng)感染以及大部分的白色念珠菌感染都來(lái)自白族兒童，提示可能與白族人群喜食生皮（生豬皮）等飲食習(xí)慣有一定關(guān)系，值得相關(guān)疾病防治時(shí)引起注意。

4 結(jié)論

云南大理白族兒童冬季腹瀉病原微生物以輪狀病毒為主，此外白色念珠菌、福氏志賀菌、豬帶絳蟲(chóng)感染也占一定比例，提示可能與飲食習(xí)慣等社會(huì)因素有關(guān)[10-12]。其檢出率與性別無(wú)關(guān)，但與年齡有關(guān)，3 歲以下兒童更容易發(fā)生感染性腹瀉，這與嬰幼兒自身免疫功能未完善有關(guān)[13-15]。因此，臨床治療應(yīng)在了解微生物感染類型及分布規(guī)律基礎(chǔ)上實(shí)行針對(duì)性防治，同時(shí)家屬和醫(yī)護(hù)人員也應(yīng)該重視飲食衛(wèi)生和習(xí)慣在腹瀉防治中的作用。