王 玙，王建強

(天水市動物疫病預防控制中心，甘肅 天水 741000)

實施動物免疫接種是我國目前控制重大動物疫病最根本、科學和直接有效的措施之一，確保免疫質量成為防控重大動物疫病工作的重中之重,而免疫抗體監(jiān)測是檢驗免疫質量直接有效的方法，也是衡量基層動物防疫人員工作效果的主要考核技術指標。為貫徹落實《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》，切實做好2020年天水市動物疫病強制免疫工作，面掌握天水市春季動物防疫工作情況，科學評價天水市重大動物疫病集中免疫工作質量和效果，于2020年5 ～6月，在全市34個自然村和27個畜禽養(yǎng)殖場隨機采集豬牛羊雞血清樣品共計425份，進行了口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、小反芻獸疫4個主要動物疫病的9種免疫抗體檢測，以便對免疫抗體合格率不達標或略高于70%的養(yǎng)殖場戶查漏補缺及時整改。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 檢測試劑 小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：青島立見診斷技術發(fā)展中心，試劑盒批號：020171906)；口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸疫研究所，試劑盒批號：20200428201)；口蹄疫A型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸疫研究所，試劑盒批號：20200303103-2)；豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒(試劑盒廠家：哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司，試劑盒批號：CSFV20161112)；禽流感H5亞型(Re-11)血凝抑制試驗抗原(試劑盒廠家：哈爾濱維科生物技術有限公司，試劑盒批號：2019007)；禽流感H7亞型(Re-2)血凝抑制試驗抗原(試劑盒廠家：哈爾濱維科生物技術有限公司，試劑盒批號：2019004)。

1.1.2 檢測樣品 于2020年5月份在全市春季統(tǒng)一集中免疫后3周左右后進行采樣，要求每個縣(區(qū))隨機選取至少4個中小規(guī)模養(yǎng)殖場(雞場、豬場、牛場、羊場各一個，豬存欄量在100～1 000頭，牛存欄量在20～200頭，羊存欄量在100～1 000只，禽存欄量在1 000～ 10 000羽)和2個自然村進行隨機采樣，每個養(yǎng)殖場至少采集血清樣品10份，每個自然村樣品來源不少于3家養(yǎng)殖戶，兼顧豬牛羊。全市共在34個自然村和27個規(guī)模養(yǎng)殖場采集豬牛羊雞血清樣品425份，其中豬103份、牛105份、羊105份、雞112份，全部低溫條件下送市動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室于6月上旬統(tǒng)一做重大病免疫抗體監(jiān)測。

1.1.3 疫苗種類 豬口蹄疫O型滅活苗(O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)(疫苗廠家：金宇保靈，疫苗批號：19136023)；口蹄疫O型-A型二價滅活疫苗(OHM/02株+AKT-III株，懸浮培養(yǎng))(疫苗廠家：中牧股份蘭州生物藥廠，疫苗批號：1911002)；重組禽流感(H5+H7)三價滅活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株)(疫苗廠家：乾元浩生物股份有限公司，疫苗批號：2019228)；豬瘟耐熱保護劑活疫苗(疫苗廠家：山東綠都生物科技有限公司，疫苗批號：1907033)；小反芻獸疫活疫苗(疫苗廠家：天康生物股份有限公司，疫苗批號：20210326)。

1.2 方法

豬瘟免疫抗體采用ELISA檢測方法(GB/T 16551-2008)；牛羊口蹄疫O型免疫抗體采用正向間接血凝試驗(GB/T 18935-2003)；豬口蹄疫O型免疫抗體采用正向間接血凝試驗和非結構蛋白抗體阻斷ELISA(GB/T 18935-2003)；牛羊口蹄疫A型免疫抗體采用液相阻斷ELISA檢測方法(GB/T 18935-2003)；禽流感H5(Re-11)亞型、H7(Re-2)亞型免疫抗體采用血凝與血凝抑制試驗檢測方法(GB/T 18936-2003)；羊小反芻獸疫免疫抗體采用阻斷ELISA檢測方法(GB/T 27982-2011進行)。在所有試驗對照均符合試劑盒說明書時，試驗結果成立，結果判定參照試劑盒說明書。

2 結果

2.1 全市整體情況

4個主要動物疫病的9種免疫抗體檢測結果及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析顯示，豬0型口蹄疫檢測103份，平均樣本合格率為81.6%；豬瘟檢測103份，平均樣本合格率為89.3%。牛O型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為78.1%；牛A型口蹄疫檢測95份，平均樣本合格率為63.2%。羊0型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為84.8%；羊A型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為69.5%；羊小反芻獸疫檢測102份，平均樣本合格率為95.1%。禽流感H5亞型檢測112份平均樣本合格率為92.0%；禽流感H7亞型檢測112份，禽流感為93.8%。具體見表1。

表1 9種免疫抗體檢測全市整體情況 %

2.2 規(guī)模場情況

所抽檢規(guī)模場中，豬0型口蹄疫場合格率為71.43%，平均樣本合格率為82.67%；豬瘟場合格率為85.71%，平均樣本合格率為96.0%。牛O型口蹄疫場合格率為85.71%，平均樣本合格率為83.75%；牛A型口蹄疫場合格率為71.43%，平均樣本合格率為62.67%。羊0型口蹄疫場合格率為85.71%，平均樣本合格率為86.25%；羊A型口蹄疫場合格率為57.14%，平均樣本合格率為73.75%；羊小反芻獸疫場合格率為100.00%，平均樣本合格率為98.75%。禽流感H5亞型場合格率為100.00%，平均樣本合格率為96.92%；禽流感H7亞型場合格率為100.00%，平均樣本合格率為98.46%。具體見表2。

表2 9種免疫抗體檢測規(guī)模場情況 %

2.3 散養(yǎng)戶情況

所抽檢散養(yǎng)戶中，其中豬型口蹄疫場點合格率為80.00%，平均樣本合格率為78.57%；豬瘟場點合格率為100.00%，平均樣本合格率為71.43%。牛O型口蹄疫場點合格率為40.00%，平均樣本合格率為60.0%；牛A型口蹄疫場點合格率為50.00%，平均樣本合格率為65.0%。羊0型口蹄疫場點合格率為80.00%，平均樣本合格率為為80.0%；羊A型口蹄疫場點合格率為20.00%，平均樣本合格率為56.0%；羊小反芻獸疫場點合格率為80.00%，平均樣本合格率為81.82%。禽流感H5亞型場點合格率為71.43%，平均樣本合格率為85.11%；禽流感H7亞型場點合格率為57.14%，平均樣本合格率為87.23%。具體見表3。

3 結果分析

3.1 不同病種之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

一是從全市整體來看，各類動物疫病免疫抗體之間的合格率存在較大差異。其中羊小反芻獸疫免疫抗體合格率為95.1%遠高于其他病種，高致病性禽流感H5亞型和H7亞型次之，分別為92.0%和93.8%，豬瘟和豬牛羊O型口蹄疫也都在70%以上，體現(xiàn)了良好的免疫效果，能夠有效防范此類重大動物疫病的發(fā)生。但牛羊A型口蹄疫整體達不到70.0%，針對A型口蹄疫抗體不合格的場戶需進行及時補免。具體見圖1。

圖1 不同病種免疫抗體水平情況比

3.2 采樣場點之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

采樣場點之間的區(qū)別主要是指規(guī)模場和散養(yǎng)戶之間的區(qū)別。從檢測結果來看，無論不同病種之間還是同病種不同亞型之間，規(guī)模養(yǎng)殖場的場合格率和平均樣本合格率普遍高于散養(yǎng)戶，也有個別病種散養(yǎng)戶免疫抗體合格率高于養(yǎng)殖場的情況。散養(yǎng)戶免疫抗體水平偏低的主要原因是散養(yǎng)畜禽飼養(yǎng)者免疫意識差，其次是農(nóng)村居住不集中，交通不便，飼養(yǎng)分散范圍廣，給免疫工作帶來很大困難。具體見表4。

表4 9種免疫抗體不同場點情況 %

3.3 同病種不同亞型之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

同病種不同亞型之間免疫抗體水平差異較大，主要表現(xiàn)在牛羊O型和A型口蹄疫之間。比如牛羊O型免疫抗體合格率分別為78.1%和84.8%，而牛羊A型分別為63.2%和69.5%。主要原因是檢測方法和檢測結果判斷標準不同引起，因為牛羊口蹄疫疫苗是口蹄疫O型-A型二價滅活疫苗，所以存在較低的漏免現(xiàn)象。從檢測方法來看，牛羊O型口蹄疫免疫抗體采用了正向間接血凝檢測方法，敏感性相對較低，首孔抗體滴度從1∶2開始，結果判斷人為主觀性偏高，而牛羊A型口蹄疫免疫抗體采用了液相阻斷ELISA檢測方法，敏感性較高，首孔抗體滴度從1∶16開始，結果判斷相對客觀。從判斷標準來看，牛羊O型口蹄免疫抗體效價以≥1∶32為合格，而牛羊A型口蹄疫免疫抗體效價以≥1∶128為合格，相對O型來說，A型判斷標準高于O型2個滴度，這是此次檢測O型口蹄疫免疫抗體水平高于A型的主要原因。

4 結論

從監(jiān)測結果分析，2020年上半年天水市高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、小反芻獸疫等主要動物疫病防制工作總體取得了良好成績，除了牛羊A型口蹄疫外，其他各類動物疫病免疫抗體合格率都在70%以上，體現(xiàn)了良好的免疫效果，能夠有效防范此類重大動物疫病的發(fā)生。而牛羊A型不合格的主要原因是檢測方法和檢測結果判斷標準不同引起，抗體效價尚未達到檢測結果判定合格標準的要求。為降低疫情發(fā)生風險，針對A型口蹄疫抗體不合格的場戶需進行及時補免以確保免疫抗體合格率處于較高水平。